拮抗CC趋化因子受体5信号诱导肿瘤细胞凋亡并调节肿瘤微环境抑制肿瘤生长

目的探索拮抗CC趋化因子受体5(CCR5)信号通路对肿瘤生长和肿瘤微环境的影响。方法采用CCK8细胞毒试验研究CCR5选择性拮抗剂Maraviroc体外对小鼠Lewis肺腺癌细胞增殖的影响,并运用流式细胞术和RT-PCR检测肿瘤细胞凋亡和Caspase 8基因的表达。然后采用免疫荧光组织化学染色法研究了Maraviroc对小鼠体内肿瘤生长和肿瘤微环境中CD4^(+)和CD8^(+)以及Foxp3^(+)细胞比例的影响。结果拮抗CCR5信号在体内外均能够抑制癌细胞的生长。体外研究发现:CCR5拮抗剂可通过增强凋亡基因Caspase 8表达而诱导肿瘤细胞凋亡。在小鼠体内,CCR5拮抗剂可明显增加肿瘤微环境中CD4^(+)和CD8^(+)细胞的浸润而减少Foxp3^(+)细胞的浸润。结论拮抗CCR5信号可能通过诱导肿瘤细胞凋亡,逆转免疫抑制性肿瘤微环境而抑制肿瘤生长。

肝细胞癌肿瘤微环境中肿瘤浸润淋巴细胞的研究进展

肝癌是病死率极高的恶性肿瘤。随着靶向药物、免疫治疗等技术手段的不断发展,转化治疗已成为目前中晚期肝癌治疗的共识。肝脏自身存在的免疫耐受,肿瘤组织以及各种免疫成分构成了动态变化的肝癌微环境。肝癌微环境下的免疫逃逸是当前免疫治疗的主要障碍。细胞免疫是机体抗肿瘤免疫的重要组成部分,免疫细胞的状态和功能与癌症预后密切相关。本文归纳了肝细胞癌微环境中肿瘤浸润淋巴细胞的研究进展,以便更好地探索针对性的抗肿瘤临床治疗策略。

肿瘤微环境中与CD8^(+)T细胞耗竭相关的分化及代谢重编程的研究进展

CD8^(+)T细胞耗竭是导致机体免疫应答减弱及恶性肿瘤复发转移的核心原因。T细胞不仅在迁移进入肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)时需要突破重重屏障,而且在浸润至肿瘤微环境的T细胞的分化及代谢过程依然受到多因素的调控,往往造成CD8+T细胞抗肿瘤活性受到抑制,进一步形成耗竭性T细胞,导致免疫逃逸。因此,研究导致T细胞耗竭的相关因素及发生机制是逆转机体低免疫应答的关键,为抗肿瘤免疫治疗提供坚实的基础及依据。该文综述了近年来关于CD8^(+)T细胞在肿瘤微环境中的浸润分化、代谢重编程及耗竭性T细胞形成的相关过程,以期为改善T细胞抗肿瘤疗效提供潜在策略。

基于单细胞RNA测序数据对胰腺癌肿瘤微环境中缺氧肿瘤亚群的探究

胰腺癌作为恶性程度极高的肿瘤之一,多数患者确诊时已处于不可切除或转移性阶段。随着单细胞RNA测序(single-cell RNA-sequencing, scRNA-seq)技术的发展,我们能够以更高分辨率深入探索肿瘤微环境(tumor microenvironment, TME)的内部异质性,从而揭示胰腺癌进展中预后不良的关键机制。先前研究指出,缺氧是实体瘤TME的固有特性,能激活血管生成与转移相关的信号通路,但缺氧TME的异质性仍需进一步阐释。通过基因集富集分析、拟时序分析和细胞间通讯分析等手段,对胰腺癌scRNA-seq数据进行分析,识别出具有不同生物学功能的肿瘤亚群,特别是与缺氧密切相关的亚群。该缺氧肿瘤亚群与不良预后紧密相关,据此构建的风险评分模型可有效预测胰腺癌患者总生存期。本研究加深了对胰腺癌TME的了解,为胰腺癌预后的预测提供了一定参考。

单细胞RNA测序技术在肺癌肿瘤微环境研究中的进展

免疫微环境对肿瘤的发生发展起着关键作用。近年来,随着高通量测序技术的飞速发展,研究人员对肿瘤微环境中的免疫细胞组成及其功能有了更深入的了解。然而,传统的群体测序技术难以解析单个细胞层面的异质性,限制了对肿瘤微环境复杂性的全面理解。单细胞RNA测序技术的兴起,为揭示肺癌免疫微环境的异质性带来了新的机遇。当前以T细胞为中心的免疫治疗在临床中容易出现免疫原性耐药或者免疫相关性肺炎等影响预后的副作用,其关键因素是肿瘤微环境中免疫细胞与肿瘤细胞的相互作用发生了变化。而单细胞RNA测序技术可以从细胞间互作、拟时序分析等角度揭示肿瘤微环境中不同亚群间的起源与作用,进而发现新的细胞亚群或新生生物标志物,为揭示免疫治疗的耐药及疗效监测等提供新的途径。该综述系统回顾了单细胞RNA测序技术在揭示肺癌特别是免疫治疗后肺癌微环境异质性方面的最新研究进展,为促进肺癌免疫治疗的精准化与个体化提供参考。

胶质母细胞瘤肿瘤复发微环境相关的功能成像研究进展

胶质母细胞瘤(GBM)是成人最常见的原发性中枢神经系统恶性肿瘤,其预后不良的主要原因是肿瘤复发,GBM复发与其独特的肿瘤微环境异常有关,包括微血管状态、水分子运动、离子环境、蛋白质变化、氧代谢和免疫异常等。近年来,功能MRI技术已在GBM复发肿瘤微环境研究方面取得较多进展,可反映GBM复发的微血管结构、水分子扩散、离子代谢物、蛋白表达和组织氧张力等方面的异常。GBM肿瘤微环境研究已从离体病理生理学层面拓展到活体功能成像水平。本文就GBM复发微环境相关的功能MRI研究[PWI、DWI、MRS、酰胺质子转移成像(APT)和血氧水平依赖性功能磁共振成像(BOLD-fMRI)]进展进行综述。

肿瘤微环境中细胞外囊泡释放对肿瘤免疫的影响

肿瘤微环境(TME)是一张编织极为复杂的网络,肿瘤细胞、基质细胞和免疫细胞通过细胞间的直接接触或细胞因子的旁分泌信号互相影响,形成了复杂的细胞间通讯系统。而近年来,基于细胞外囊泡(EV)的细胞间通讯已成为日益重要的通讯方式。EV可通过传递生物活性物质或通过其表面的配体影响所接触的各种细胞,进而使肿瘤免疫微环境发生巨大变化。因此,整合EV与免疫系统的相互作用和联系对于EV在基础研究和临床实践中的应用具有重要意义。该文综述了TME中不同来源的EV在肿瘤免疫调控中的作用,具体分析了EV在肿瘤免疫调控过程中的作用,旨在为临床肿瘤疾病的诊断和治疗提供新思路。

肿瘤微环境下调节性B细胞的功能机制研究进展

调节性B细胞(Breg细胞)以较高比例存在于多种恶性肿瘤微环境(TME)中,在维持免疫平衡和调节免疫反应方面发挥重要作用,可阻碍机体抗肿瘤免疫应答。Breg细胞由TME中的一系列信号分化诱导而成,可分泌细胞因子和颗粒酶B、腺苷等代谢物,并通过表达抑制性膜结合分子等机制影响TME中其他免疫调节细胞,从而促进肿瘤的生长和转移。因此,深入理解Breg细胞的分化来源及其在肿瘤免疫调节中关键作用机制可为未来开发新的免疫治疗策略提供方向。

非小细胞肺癌患者奥西替尼治疗前后肿瘤免疫微环境变化及与预后的关系

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者奥西替尼治疗前后肿瘤免疫微环境变化及与预后的关系。方法 选取2017年6月至2022年12月于本院收治的125例NSCLC患者为研究对象,纳入训练集。按照相同标准另选取100例NSCLC患者纳入验证集。免疫组化法分析CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD10^(+)、CD56^(+)表达情况。根据患者预后情况分为预后良好组(n=65)和预后不良组(n=60),比较两组患者的一般资料及奥西替尼治疗前后肿瘤免疫微环境变化。采用多因素Cox风险比例模型分析临床因素在训练集和验证集上的一致性指数(C指数)。多因素Logistic回归分析影响预后不良发生的危险因素。并建立列线图模型,利用Logistic回归和临床决策曲线(DCA)曲线分析预后影响因素的临床预测价值。并通过X-tile软件进行危险分层。结果 奥西替尼治疗6个月后,CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)以及CD56^(+)的表达水平较治疗前明显增加,CD10^(+)表达水平较治疗前明显降低(P<0.05)。重复测量方差分析显示,不同组别和治疗时间对CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD10^(+)以及CD56^(+)的交互效应具有统计学意义(均P<0.05)。多因素Cox风险比例模型分析结果显示,吸烟史、鳞癌、淋巴结转移、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD10^(+)及CD56^(+)均具有最大的C指数,组成的多因素模型对评估NSCLC患者预后不良的风险具有较准确的表现。有吸烟史、组织学类型为鳞癌、淋巴结转移、奥西替尼治疗后6个月CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)以及CD56^(+)降低,治疗后6个月CD10^(+)水平升高均为NSCLC患者奥西替尼治疗后预后不良的危险因素(P<0.05)。依据独立影响因素构建的列线图预测模型具有较高的区分度、准确性和临床适用性。使用X-tile软件确定最佳临界值(280.4分和345.1分),可将患者分为三个组,依次为<280分(低危),≥280分且小于345分(中危),≥345分(高危)。结论 奥西替尼治疗后,CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD56^(+)的平均阳性率较治疗前明显增加,CD10^(+)的平均阳性率较治疗前明显降低,结合患者临床特征构建的预测模型可有效预测NSCLC患者的预后情况。

基于转录组学和蛋白质组学技术分析缺氧对肝细胞癌肿瘤微环境的影响

目的探讨缺氧对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)肿瘤微环境的影响,为HCC患者的诊治提供指导。方法收集2018年5月至2019年7月在广西医科大学附属肿瘤医院行根治性肝切除术的116例HCC患者组织样本及相应的临床病理资料,基于HALLMARK-HYPOXIA基因集和单样本基因集富集分析方法计算HCC患者的缺氧评分,并使用转录组测序数据和深度学习模型检测的免疫组化染色结果对评分结果进行验证。通过Log-rank检验、单因素和多因素Cox比例风险模型及卡方检验分析缺氧评分与HCC患者预后和临床病理参数的关系。利用转录组学和蛋白质组学技术探讨高、低缺氧评分HCC患者的分子特征和肿瘤微环境异质性。结果根据缺氧评分将116例HCC患者分为高缺氧评分组(n=58)和低缺氧评分组(n=58)。与低缺氧评分组相比,高缺氧评分组的缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor1α,HIF-1α)表达水平明显升高(P<0.001);HCC患者的缺氧评分与HIF-1α的表达水平呈正相关(r=0.672,P<0.001)。高缺氧评分组患者的总生存期(P=0.001)和无复发生存期(P=0.006)均明显低于低缺氧评分组患者,且高缺氧评分与HCC患者更高的巴塞罗那分期(P=0.040)和肿瘤复发率(P=0.020)有关。高缺氧评分是HCC患者预后不良的独立因素(HR=2.074,95%CI:1.036~4.153,P=0.040)。高缺氧评分组患者主要富集调控HCC干细胞的信号通路(包括Wnt、Hedgehog、TGF-β等信号通路),且该组患者的肝癌干细胞相关标志物(包括CD24、CD44、CXCL12、EpCAM、ICAM1、KRT19、PROM1和THY1)表达上调。高缺氧评分组和低缺氧评分组的肿瘤微环境细胞组成存在异质性,且高缺氧评分组患者的CD45-CD326+类肿瘤干细胞亚群和CD45+CD326+恶性双阳性细胞亚群的HCC干细胞相关标志物(包括CD54、CK19、CD34、OV6、CD13、CD133)表达水平较低缺氧评分组更高。结论高缺氧评分患者的生存预后较低缺氧评分患者差且具有更强的肿瘤干性特征的肿瘤微环境。

Hedgehog信号通路在肝细胞癌中的作用及其与肿瘤微环境的关系

Hedgehog(Hh)信号通路在肝细胞癌的发生发展和肿瘤微环境中发挥重要作用。Hh信号异常激活可加速肿瘤的生长。Hh信号通路和肿瘤微环境之间的相互串扰与肿瘤的生长和抑制性肿瘤微环境的形成密切相关。有证据表明,抑制Hh信号在抑制肝细胞癌生长中发挥重要作用。本文就Hh信号异常激活在肝细胞癌和肝癌肿瘤微环境中作用及机制的研究现状与潜在的治疗意义作一综述,为肝癌的治疗提供新的思路。

肿瘤干细胞与免疫微环境调控

肿瘤干细胞是肿瘤中一小群具有自我更新和分化能力的细胞,是肿瘤发生、转移、治疗抵抗和复发的关键。肿瘤干细胞处于特定微环境中,其数量维持、自我更新和分化均受到微环境的精细调控,其中免疫微环境是肿瘤干细胞最关键的微环境之一。近年来肿瘤免疫疗法取得了较大成功,但是免疫治疗后耐药和复发频现,肿瘤干细胞与普通肿瘤细胞相比,具有更强的免疫逃逸能力,其在肿瘤免疫逃逸中的作用受到越来越多的关注。本文论述了肿瘤干细胞的发现历史和谱系来源,重点描述了肿瘤干细胞微环境中的免疫细胞类型,例如肿瘤浸润淋巴细胞、肿瘤相关巨噬细胞和肿瘤相关树突状细胞等,剖析了肿瘤干细胞-免疫细胞相互作用机制,并阐述了靶向肿瘤干细胞及其免疫微环境的干预策略。随着肿瘤干细胞-免疫细胞共培养、单细胞测序和谱系示踪等先进技术的发展和应用,通过靶向肿瘤干细胞与免疫细胞的相互作用或逆转免疫抑制性微环境,抑制肿瘤干细胞的免疫逃逸,有望为肿瘤免疫治疗的耐药和复发难题提供潜在解决方案。

肿瘤微环境中免疫细胞自身调控及中药成分对其调控的研究进展

目的了解肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中免疫细胞的调节机制、免疫治疗的新靶点以及中药成分对免疫细胞的调节作用。方法查阅相关文献,总结TME中免疫细胞调控机制和发挥抗肿瘤免疫治疗的新靶点以及中药成分对免疫细胞的调节作用。结果总结了肿瘤微环境中T细胞、巨噬细胞、树突状细胞在分化、发育、功能上的调控机制,归纳了抗肿瘤免疫治疗的新靶点,基于这些调控机制分析不同种类的中药成分对免疫细胞的调控作用。结论梳理总结TME中免疫细胞的自身调控机制和中药成分对免疫细胞的调节作用,为中药抗肿瘤免疫机制的深入探索奠定基础。

胰腺星状细胞在胰腺导管腺癌肿瘤微环境中的作用研究进展

胰腺导管腺癌(PDAC)是胰腺癌中一种常见的恶性肿瘤类型,疾病进展快、恶性程度高、预后差、对放化疗不敏感。PDAC的恶化、远处转移、治疗抵抗不仅取决于PDAC细胞,肿瘤微环境在疾病进展与演变的过程中也发挥着不可或缺的作用。胰腺星状细胞(PSCs)是建设肿瘤微环境重要的参与者,为癌细胞的“成长”构建一个“舒适”的微环境。本文通过总结PSCs在肿瘤微环境的发挥的作用以及对PDAC的影响,希望可以从肿瘤微环境方面改善治疗方案,提高患者的生存率。

肿瘤相关成纤维细胞对结直肠癌肿瘤微环境中免疫细胞调节作用的研究进展

结直肠癌(CRC)是全球癌症死亡的第二大原因,常规的治疗手段并未明显降低其死亡率。近年来,免疫治疗给许多肿瘤患者带来了新希望。但是,大多数CRC患者对免疫治疗缺乏响应,耐药的关键机制在于肿瘤微环境(TME)中各类细胞间的相互作用,导致肿瘤抑制性免疫微环境的形成。肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)是TME中重要的组成部分,在CRC的发生、发展及免疫治疗抵抗中扮演了重要角色。该文拟对近年来有关CAFs通过调节CRC微环境中免疫细胞促进肿瘤产生免疫逃逸和免疫治疗抵抗机制的研究进行综述,为靶向CAFs、提高CRC免疫治疗效果提供理论依据。

基于单细胞测序探究去势抵抗性前列腺癌肿瘤微环境及细胞间通讯相关信号分子

目的:探究去势抵抗性前列腺癌(castration-resistant prostate cancer,CRPC)的肿瘤微环境中相关信号分子,并分析其与肿瘤发生发展之间的关系。方法:通过基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中CRPC患者的单细胞RNA测序(scRNA-seq)数据(GSE137829),分析CRPC肿瘤微环境的主要组成成分;通过CellPhoneDB分析微环境中不同细胞间的相互作用,重点揭示肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)与恶性上皮细胞之间的联系;应用CellChat分析CAFs与恶性上皮细胞通讯相关的信号分子,结合肿瘤基因组图谱前列腺癌(TCGA-PRAD)的数据,寻找与CRPC患者预后密切相关的信号分子。使用siRNA在CRPC细胞中敲低相关信号分子Delta样经典Notch配体3(DLL3),并通过实时荧光定量PCR、蛋白质印迹实验验证敲低效率。通过CCK8法、EdU实验以及Transwell和含有基质胶的Transwell实验,探究DLL3对CRPC细胞增殖、迁移、侵袭等生物学行为的影响。单基因差异分析以及过表征富集分析(ORA)、基因集富集分析(GSEA)寻找DLL3相关差异表达基因富集的通路。结果:单细胞转录组测序结果表明,CRPC肿瘤微环境的主要细胞组成包括恶性上皮细胞、CAFs以及免疫细胞等。CAFs与恶性上皮细胞之间通过通讯相关信号分子相互作用实现紧密的通讯,共筛选出CAFs与恶性上皮细胞通讯密切相关的信号分子63个;单因素Cox回归分析显示关键信号分子肿瘤坏死因子相关配体超家族成员12(TNFSF12)以及DLL3转录本的表达与CRPC患者预后显著相关,其中DLL3高表达与CRPC患者不良预后显著相关。体外实验结果表明,敲低DLL3显著抑制CRPC细胞的生长、增殖、迁移和侵袭能力。KEGG和GSEA富集分析表明,DLL3相关差异表达基因在代谢相关通路中显著富集。结论:肿瘤微环境中CAFs与恶性上皮细胞之间通过细胞间通讯相关信号分子实现紧密通讯,其中DLL3的表达与患者预后呈负相关,且影响CRPC细胞生物学行为,DLL3或是人CRPC恶性进展的关键信号分子。

结直肠癌肿瘤微环境中CD8^(+)T细胞研究进展

结直肠癌(CRC)在全球的发病率逐年上升,是全球最常见的消化道恶性肿瘤之一。CD8^(+)T细胞是CRC肿瘤免疫中的主要效应细胞,也是免疫治疗主要靶细胞,对CRC患者的治疗和预后具有重要影响。但由于肿瘤微环境中各种细胞、细胞因子、代谢产物的抑制作用,CD8^(+)T细胞常常处于功能失活状态。因此,了解CD8^(+)T细胞与CRC肿瘤微环境中的相互作用对研发更加有效的治疗策略十分必要。文章就此领域的研究进展做一综述。

肿瘤相关巨噬细胞在子宫内膜癌肿瘤微环境中作用的研究进展

子宫内膜癌肿瘤微环境中存在多种免疫细胞,其中肿瘤相关巨噬细胞在子宫内膜癌的发生发展及转归等各个阶段都发挥着重要作用。本文对巨噬细胞的来源及异质性、巨噬细胞在子宫内膜癌肿瘤微环境中的分布特点与作用机制以及靶向巨噬细胞对子宫内膜癌的干预作用予以综述,旨在为子宫内膜癌免疫治疗提供更多的理论依据。

胶质瘤微环境中神经元与肿瘤细胞相互作用的研究进展

脑胶质瘤是最常见的原发性中枢神经系统肿瘤。最新的世界卫生组织中枢神经系统肿瘤分类在传统的组织病理学基础上,重点强调了分子病理,并将脑胶质瘤的分子病理作为主要的分类依据,指导疾病的分类和治疗。低级别肿瘤(如毛细胞星形细胞瘤)是儿童和青少年中最常见的原发性脑肿瘤类型。而弥漫性胶质瘤,如胶质母细胞瘤(glioblastoma, GBM)、异柠檬酸脱氢酶野生型,是成人中最常见的原发性恶性脑肿瘤类型。

低氧微环境增强MACC1调控PI3K/AKT信号通路促进结直肠癌肿瘤干细胞样特性

目的探讨低氧微环境和结肠癌转移相关基因1(MACC1)对结直肠癌(CRC)肿瘤干细胞(CSC)样特性生物学行为的影响及机制。方法将空载体(LV-ctrl组)、MACC1过表达载体(LV-MACC1)转染结肠癌细胞HCT116,同时在低氧微环境条件下培养LV-MACC1细胞(LV-MACC1+hypoxia组)。分别应用CCK-8法及免疫细胞化学法、划痕实验、Transwell侵袭实验、肿瘤球形成实验检测细胞增殖、迁移能力、侵袭能力及体外肿瘤形成能力。免疫印迹法检测MACC1、CD133、CD44、AKT和p-AKT蛋白的表达,740 Y-P验证PI3K/AKT在MACC1诱导的肿瘤干细胞样特性中的作用。结果与LV-ctrl组比较,LV-MACC1组的细胞增殖、迁移和侵袭能力均增强,肿瘤球形成增多,CD44、CD133和p-AKT蛋白的表达水平增高(P<0.05)。与LV-MACC1组比较,LV-MACC1+hypoxia组的细胞增殖、迁移和侵袭能力增强,肿瘤球形成增多(P<0.05);CD44、CD133和p-AKT蛋白的表达水平增高(P<0.05)。与对照组比较,740 Y-P增加了细胞CD133和CD44蛋白表达水平(P<0.05)。结论低氧微环境增强MACC1调控PI3K/AKT信号通路促进结直肠癌细胞出现肿瘤干细胞样特性。