甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎模型大鼠Th1/Th2细胞平衡偏移的影响

目的:探讨甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠Th1/Th2细胞平衡偏移作用机制。方法:采用Lewis大鼠建立AIT大鼠40只,6周后随机分为模型组、甲炎康泰低、中、高剂量组,每组10只,每天分别按去离子水、0.708、1.417、2.834 g?kg-1剂量连续灌胃8周。检测血清Tg Ab、TPOAb;Th1、Th2细胞分布比例及Th1/Th2比率;检测血浆中IL-4、IL-5、IFN-γ、TNF-α和IL-1α含量;HE染色观察甲状腺组织的病理;免疫组织化学检测甲状腺IFN-γ、IL-4蛋白表达。结果:甲炎康泰高剂量组能够下降AIT大鼠TPOAb、TGAb水平,降低甲状腺炎发生率、Th1与Th2细胞分布比例以及Th1/Th2比率;降低血浆IFN-γ、TNF-α、IL-1α、IL-4、IL-5含量;降低甲状腺IFN-γ、IL-4蛋白表达。结论:甲炎康泰具有降低AIT大鼠甲状腺自身抗体的作用,可能与通过调节细胞因子水平和Th1/Th2细胞平衡偏移有关。

地塞米松对内毒素肺损伤大鼠Th1/Th2细胞偏移的影响

观察地塞米松 (DEX )对Th1/Th2偏移的影响 ,从Th1/Th2偏移的角度探讨DEX对内毒素肺损伤的治疗作用。静脉注射脂多糖制作大鼠内毒素肺损伤模型。分离、提纯外周血与BALF中T淋巴细胞 ,抗大鼠CD4 FITC单克隆抗体标记 ,通过流式细胞仪分选后 ,应用免疫组织化学技术动态观察Th1、Th2细胞的变化。结果LPS致伤后 ,外周血与BALF中IFN γ阳性细胞 (Th1细胞 )与IL 4阳性细胞 (Th2细胞 )数目均减少 ,Th1细胞在相应时相点CD4 + T淋巴细胞总数的百分比在一过性增高后进行性减少 ,CD4 + T细胞中Th1细胞构成比呈先增加后减少趋势 ,而Th2细胞构成比则持续增高 ,提示LPS使CD4 + T细胞构成比由Th1向Th2偏移。DEX组IFN γ阳性细胞、IL 4阳性细胞数目均减少 ,Th1/Th2比例趋于接近正常。Th1/Th2偏移可能部分参与内毒素肺损伤的发生 ,DEX通过调节炎症反应 ,使Th1/Th2比例趋于正常 。

苏木水提取物的抗急性排斥与Th1/Th2免疫偏移作用

目的探讨苏木水提取物在心脏移植中的免疫抑制作用及其机制。方法以W istar大鼠为供者、SD大鼠为受者,建立异位(腹腔)心脏移植模型。96只SD大鼠随机分为4组,每组24只。对照组:术前给橄榄油(8m l/kg.d);A组:给环孢菌素A(5m g/kg.d);B组:给苏木水提取物(37.5g/kg.d);C组:给苏木水提取物(25g/kg.d)+半量环孢菌素A(2.5m g/kg.d)。术后观察移植心的存活时间,心肌组织学和超微结构改变,术后3d和7d用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测移植心脏白细胞介素-2(IL-2)信使核糖核酸(mRNA)、白细胞介素-10(IL-10)mRNA的表达,用酶联免疫吸附测定法(EL ISA)检测血清IL-2和IL-10的含量。结果与对照组比较,A组、B组、C组移植心存活时间延长(P<0.01),淋巴细胞浸润和心肌坏死程度较对照组轻,心肌IL-2mRNA表达较对照组减弱(P<0.01),IL-10mRNA表达较对照组增强(P<0.01)。A组术后3d和7d,B组、C组术后3d血清IL-2水平较对照组明显降低(P<0.01),A组术后7d,B组术后3d血清IL-10较对照组增高(P<0.05)。结论苏木水提取物在心脏移植后具有免疫抑制作用,可引起T h1向T h2免疫偏移。

小鼠肝癌微波消融对宿主Th2/Th1免疫应答的影响

目的探讨小鼠肝癌微波消融(microwaveablation,MA)对宿主Th2/Th1免疫应答的影响。方法建立C57BL/6J小鼠Hepa1-6细胞移植肝癌模型,对肿瘤微波消融或手术切除,取正常、荷瘤、手术后及MA后四组小鼠,每组6只,用ELISA法检测各组周围血血浆Th1(IL-12I、FN-γ)和Th2(IL-4I、L-10)细胞因子水平(pg/ml)。结果荷瘤组比正常组,细胞因子IL-10增加,IL-4I、L-12和IFN-γ下降(均P>0.05)。MA组较荷瘤组,IL-12、IFN-γ显著上升(均P<0.01),IL-4明显降低(P<0.05),IL-10有所下降(P>0.05)。手术组比荷瘤组,IL-12I、FN-γ上升,IL-4I、L-10下降(均P>0.05)。MA组比手术组,IL-12明显上升(P<0.05),IFN-γ升高,IL-4和IL-10下降(均P>0.05)。结论MA原位灭活小鼠肝癌可促进宿主免疫应答的Th2/Th1偏移,并且MA较手术切除具有较强的免疫刺激效应。

自血穴注疗法对痤疮小鼠Th1/Th2免疫偏移的调节作用

【目的】观察自血穴注疗法对痤疮小鼠皮损与Th1/Th2免疫偏移的影响。【方法】将30只小鼠随机分为5组,即正常组、模型组、自血穴注组、针刺组、阿奇霉素组,每组6只。除正常组外,其他4组小鼠均采用痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes,P.acnes)诱导的方法构建痤疮模型。造模成功后,各治疗组分别对应接受连续10 d的自血穴注、针刺、灌胃阿奇霉素治疗,隔天1次。治疗结束后,比较各组小鼠皮损评分、皮损组织病理改变及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)水平变化。【结果】治疗后,自血穴注组小鼠皮损评分较治疗前明显降低;与正常组比较,自血穴注组小鼠皮损减轻,表皮厚度减小,真皮厚度增加,TNF-α水平上升,TNF-α/IL-4比值趋于正常(P <0.05),与阿奇霉素组疗效相当。【结论】自血穴注疗法可能是通过调节Th1/Th2免疫偏移发挥改善痤疮炎性皮损的作用。

调和阴阳,以平为期——基于Th1/Th2免疫平衡的自血穴位注射效应机制探索

目的:在自血穴位注射疗法前期临床及基础研究的基础上,探讨其效应机制研究思路。方法:以"自血穴位注射"为检索词,检索Pubmed、CNKI、万方、维普等数据库1990-2017年文献,结合本课题组前期临床及实验研究,分析自血穴位注射疗法干预痤疮的效应机制。结果:自血穴位注射通过调节Th1/Th2免疫偏移与皮损局部微生态环境失衡发挥治疗寻常痤疮的作用,这可能是自血穴位注射治疗寻常痤疮的重要途径之一,也是其"调和阴阳,以平为期"作用的体现。结论:在今后的研究工作中,以自血穴位注射对Th1/Th2免疫偏移及皮损局部微生态失衡的影响为切入点,可为本法"调和阴阳,以平为期"的作用提供实验依据,为其临床应用提供一定的科学依据。

胎膜早破外周血单个核细胞Th1/Th2免疫偏移的临床研究

目的检测胎膜早破(PROM)外周血单个核细胞(PBMC)产生Th1/Th2细胞因子水平差异,探讨PROM的Th1/Th2免疫偏移。方法对足月胎膜早破(PROM)组39例、未足月胎膜早破(PPROM)组34例和正常足月妊娠组(对照组)38例3组的PBMC经植物血凝素(PHA)诱导后,用ELISA法测定上清液中的γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平,同步检查绒毛羊膜炎病理改变,用PV-9000免疫组化两步法检测IFN-γ和IL-4在胎盘局部的表达。结果 3组PBMC分泌IFN-γ水平总体差异有统计学意义(F=36.313,P<0.01);其中PROM组IFN-γ为(158.6±38.9)ng/L,对照组为(105.3±33.6)ng/L,PPROM组为(201.4±29.2)ng/L,PROM组较对照组升高(q=6.438,P<0.05),但低于PPROM组(q=4.033,P<0.05);3组PBMC分泌IL-4水平总体差异有统计学意义(F=23.291,P<0.05);其中PROM组IL-4水平较对照组降低(q=2.051,P<0.05),但高于PPROM组(q=2.842,P<0.05);3组IFN-γ/IL-4比值总体差异有统计学意义(F=15.262,P<0.05);PPROM组绒毛羊膜炎病理改变明显,PROM组绒毛羊膜炎改变较轻;3组间IFN-γ在胎盘局部表达的总体差异有统计学意义(F=7.382,P<0.05),PPROM组最高;3组间IL-4表达的总体差异有统计学意义(F=5.878,P<0.05),PPROM组最低。结论胎膜早破的免疫偏移状态表现为Th1型增强和Th2型减弱,Th1/Th2型免疫平衡指数IFN-γ/IL-4比值明显增高。

小鼠肝癌微波消融对宿主免疫细胞和细胞因子的影响

目的探讨小鼠肝癌微波消融(microwave ablation,MA)对宿主免疫细胞组成和细胞因子分泌的影响。方法建立C57BL/6J小鼠Hepa1-6细胞移植肝癌模型,对肿瘤进行微波消融或手术切除,分别用流式细胞仪和ELISA法检测治疗前后宿主周围血中的CD4+、CD8+、NK1.1+细胞组成(%)及血浆细胞因子IL-2、IL-10、IL-12、IFN-γ水平(ng/L)。结果荷瘤2～3周组鼠与正常组鼠比较,免疫细胞和细胞因子区别不显著。MA组较荷瘤组CD8+、CD4+T细胞及IL-2、IL-10无明显差别,NK1.1+细胞明显升高(P<0.05,n=6),IL-12、IFN-γ显著上升(均P<0.01,n=6)。手术组比荷瘤组免疫细胞和细胞因子也无明显变化。MA组比手术组CD8+、CD4+T细胞及IL-2、IFN-γ、IL-10无明显区别,NK1.1+细胞、IL-12明显上升(分别P<0.01、P<0.05,n=6)。结论MA原位灭活小鼠肝癌可促进Th2/Th1偏移及NK细胞组成的显著升高。

雌激素对同种抗原刺激T细胞反应的影响

目的研究雌激素(E2)对同种抗原刺激T细胞反应的影响,及其与Th1/Th2细胞因子间的关系。方法利用单向混合淋巴细胞培养体系,以C57BL/6小鼠脾细胞作为反应细胞,分别用经丝裂霉素C处理的Balb/C小鼠脾细胞(实验组I)和ConA(实验组II)作为刺激原活化T细胞,未加刺激原为空白组,同时加入妊娠水平的E2进行共培养,未加E2为对照组。72h后,采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测各组细胞培养上清液中Th1型细胞因子(TNF-α)及Th2型细胞因子(IL-10)的表达水平。结果与空白组(1.49pg/mL)相比,实验组I与实验组II分泌IL-10均增高(27.69pg/mL和26.28pg/mL,P<0.01),实验组II分泌TNF-α浓度为28.82pg/mL,与空白组相比,TNF-α水平下降(P<0.05),提示T细胞反应向Th2偏移;在给予E2共培养后,IL-10水平均进一步显著增高(37.02pg/mL和39.58pg/mLP<0.01);而实验组I和实验组II中TNF-α浓度与对照组相比均进一步降低(23.55pg/mL和21.86pg/mL,P<0.05);在无刺激原存在条件下,E2亦可使T细胞分泌TNF-α水平明显降低(P<0.01),而且实验组I和实验组II相比,E2使T细胞分泌TNF-α水平的降低及IL-10水平的增高无显著差异(P>0.05)。结论雌激素体外刺激可使同种抗原活化的T细胞分泌IL-10增多,同时下调TNF-α,即导致T细胞反应向Th2偏移。而且雌激素对TNF-α的下调作用与T细胞活化无明显相关。

雌二醇和孕酮对去卵巢小鼠外周血T细胞反应的影响

目的通过对去卵巢小鼠补充雌二醇及黄体酮治疗，观察外周血Th1／Th2细胞因子水平变化，探讨雌二醇及孕酮对外周血Th1／Th2细胞因子水平的影响。方法将80只健康雌性小鼠随机分为4组，每组20只，假手术组不给药物，3组去卵巢小鼠分别接受苯甲酸雌二醇、黄体酮及注射油皮下注射治疗。每周2次，共注射25次。采用ELISA法检测4组血清雌二醇、孕酮、转化生长因子（TGF—β）、肿瘤坏死因子-CC（TNF—α）、白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素10（1L-10）、卵泡刺激素和黄体生成素水平。结果（1）与假手术组比较，术后12周非用药组血清TNF—α、IL-6水平明显升高（均P〈005），IL-10水平降低（P〈0．05），IL-2、TGF—β水平无明显改变（P〉0．05）。（2）雌二醇组与非用药组比较，血清TNF-α、IL-6水平明显降低（P〈005或0．01），而IL-10水平显著升高（P〈0．05）。（3）黄体酮组与非用药组比较，TNF—α水平降低，而IL-10水平升高，差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论小鼠去卵巢后机体免疫反应倾向Th1型，生理浓度雌二醇及孕酮均可推动机体免疫反应向Th2型转变。