南蛇藤素对哮喘小鼠TSLP介导的Th2优势免疫干预的研究

目的观察南蛇藤素对小鼠哮喘模型胸腺基质淋巴生成素(TSLP)介导的气道炎症的影响及机制。方法 24只SPF级BALB/c雌性小鼠随机分成4组。哮喘组、甲强龙组及南蛇藤素组分别予OVA致敏,然后腹腔注射等体积药物(分别为生理盐水、甲强龙及南蛇藤素),再予以雾化吸入1%OVA激发。对照组使用等剂量生理盐水。末次激发24h后,检测各组小鼠血清总Ig E及TSLP含量,支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-13水平,HE染色肺组织病理学检测炎症浸润。结果南蛇藤素组小鼠哮喘表现较哮喘组明显改善;其血清总Ig E、TSLP含量及BALF中IL-4、IL-13水平均低于哮喘组(P<0.05);且小鼠肺组织气道炎症明显减轻,但与甲强龙组无异(P>0.05)。结论南蛇藤素组可以通过抑制哮喘小鼠TSLP介导的Th2优势免疫改善其临床症状。

当归对阴虚哮喘BALB/c小鼠Th2优势免疫应答的影响

目的探讨当归对阴虚哮喘BALB/c小鼠Th2细胞优势免疫应答的影响。方法采用注射卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)致敏、吸入OVA激发的方法来复制BALB/c小鼠哮喘模型,实验后期给予甲状腺素以复制阴虚哮喘模型,通过观测哮喘行为学、血清及支气管肺泡灌洗液(broncho-alveolar lavage fluid,BALF)中IL-4、IL-13的水平、BALF及肺组织中炎性细胞的含量、肺组织中GATA-3蛋白表达水平,探讨当归的平喘作用及对Th2细胞优势免疫应答的影响。结果当归可明显减少阴虚哮喘小鼠哮喘发作的次数及其发作时的症状,改善肺组织病理学而减少肺组织及BALF中炎性细胞的数量,降低血清及BALF中IL-4、IL-13的水平,抑制肺组织中GATA-3蛋白的表达(P<0.05或0.01);同时,当归与地塞米松配伍后对嗜酸粒细胞、IL-4及GATA-3的抑制作用具有一定的协同作用(P<0.05或0.01)。结论当归具有平喘作用,抑制细胞因子IL-4、IL-13及转录因子GATA-3的表达而缓解Th2优势免疫应答可能是其作用机制之一。

呼吸道合胞病毒疫苗增强性疾病小鼠模型的建立与评价

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是导致婴幼儿严重下呼吸道感染的最重要病原体,但该病毒的灭活疫苗可引起RSV疫苗增强性疾病(RSV vaccine-enhanced disease,RVED),因此至今仍未研制出安全、有效的疫苗。RVED的发生机制目前仍不清楚。使用能有效模拟RVED的动物模型是探索RVED发生机制的主要手段,而本研究的目的就是建立能稳定模拟RVED表现的小鼠模型。将BALB/c小鼠分成3组,即甲醛灭活RSV疫苗接种组(FV组)、活RSV接种组(VV组)和对照组(BV组),并模拟自然感染对其攻毒。通过小鼠体重监测、肺组织苏木精-伊红染色、荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、流式细胞术等,观察FV组小鼠感染RSV后的病毒载量、肺部炎症和T细胞免疫状态。结果显示,与VV组和BV组相比,FV组小鼠RSV攻毒后的体重占初始体重百分比显著降低,肺部炎症最明显,且仅FV组出现支气管和毛细血管周围有大量淋巴细胞浸润及嗜酸性粒细胞浸润。荧光定量PCR显示,FV组小鼠的肺部RSV载量最低。流式细胞术显示,攻毒4d后FV组CD^(4+) T细胞数与其他两组相比显著增加,且CD^(4+) T细胞分泌的白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)及IL-4/γ干扰素(interferonγ,IFN-γ)比值显著高于其他两组,而CD^(8+) T细胞分泌的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和IFN-γ低于VV组。结果提示,RVED小鼠呈现出Th2优势型免疫应答及CD^(8+) T细胞功能不足,模型初步建立成功,为RVED发生机制的探索和RSV疫苗的研发奠定了良好基础。