蛇足石杉中石杉碱甲的酶法提取研究

[目的]筛选蛇足石杉中石杉碱甲的酶法提取的最佳提取条件。[方法]采用纤维素酶酶解细胞壁,从而溶出更多的蛇足石杉细胞中的物质,并设计正交试验选出酶法提取的最佳提取条件。[结果]蛇足石杉中石杉碱甲的酶法提取的最佳工艺条件为纤维素酶用量0.125 g,酶解pH4.5,酶解温度60℃,酶解时间2.5 h;在此条件下,蛇足石杉中石杉碱甲的提取率为0.589‰;各因素中温度对纤维素酶的酶解效果影响最大。与酸提法相比,酶法提取的石杉碱甲的提取率提高了40.3%。[结论]该方法简便快捷、提取率高,可用来提取蛇足石杉中石杉碱甲。

H_2O_2诱变蛇足石杉培养物的后代株系变化分析

目的:探索H_2O_2胁迫诱导提高蛇足石杉叶状体积累石杉碱甲(huperzine A,Hup A)含量的作用。方法:对经H_2O_2诱变建立的蛇足石杉叶状体中筛选的13个株系及出发株等14份材料进行了相对增长率和Hup A含量比较及ISSR DNA分子分析。结果:3%H_2O_2胁迫诱导处理16 min的叶状体后代相对增长率和积累Hup A的含量与出发株差异显著(P<0.05),变异叶状体株系SH042相对增长率和积累Hup A含量最大,分别为4 499.28%和(261.17±0.19)μg/g DW,比出发株分别提高2.35和2.43倍;20个ISSR随机引物中有9个对14份叶状体株系遗传分子显示了多态性,聚类分析可分为4大类,说明诱变后代叶状体株系的DNA分子存在显著差异。结论:该研究结果表明H_2O_2用于诱导蛇足石杉培养物能提高Hup A含量和建立丰富的遗传资源。

福建省不同居群长柄石杉石杉碱甲含量的研究

实地采集标本并用改进的HPLC法测定了福建省不同地区16个居群间长柄石杉的石杉碱甲(Hup A)含量。结果显示,石杉碱甲在长柄石杉福建省不同居群间均有分布,其中以梁野山和新罗区黄连盂两个居群含量较高,分别为0.047 7%和0.046 4%;从区域上看,龙岩地区含量最高,平均为0.041 6%,三明地区含量次之,平均为0.041 4%,宁德地区含量最低,平均为0.019 7%。结果表明,福建地区拥有良好的石杉碱甲植物资源。

蛇足石杉不同生长阶段植株中石杉碱甲含量的地区差异及生境影响的比较观察

目的:调研蛇足石杉不同生长阶段植株中石杉碱甲含量的区域差异,探讨生境因子对石杉碱甲含量的影响。方法:调查江西修水县、贵州岑巩县、广西那坡县和重庆石柱县等4个样地的生境因子,采集样地中不同生长阶段的野生蛇足石杉植株材料(简称:材料),并用HPLC法测定其中的石杉碱甲含量。结果:①不同生长阶段材料中的石杉碱甲含量比较:幼苗>幼株>成株(江西、重庆样地),幼株>幼苗>成株(贵州、广西样地)。②相同生长阶段不同样地材料中的石杉碱甲含量比较:幼苗期:4样地无明显差异;幼株期:贵州样地最高,其他3样地差异不显著;成株期:贵州样地最高,重庆其次,江西和广西样地差异不显著。③不同样地各生长阶段材料中石杉碱甲含量均值比较:贵州样地最高为6.6,重庆样地其次为5.42,广西和江西最低分别为4.83,4.47。④石杉碱甲含量与生境因子的关系:含量与年降雨量呈负相关关系,与海拔高度、年平均气温等无明显相关性。结论:①蛇足石杉幼苗和幼株中石杉碱甲平均含量均显著高于成株,不同样地之间平均含量存在显著差异。②生境因子严重影响蛇足石杉材料中石杉碱甲含量,其中较多的降雨不利于石杉碱甲的积累。

石杉碱甲药源植物研究进展

石杉碱甲(Huperzine A)从石杉科(Huperziaceae)石杉属(Huperzia)植物蛇足石杉(Huperzia ser-rata(Thunb.ex Murray)Trev.)中分离得到,其临床治疗阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)疗效显著。由于石杉碱甲的化学合成在短时间内难以克服合成步骤繁琐、成本高、活性低等特点,自然资源的挖掘和开发成为解决石杉碱甲短缺的有效途径之一。故对近年来石杉碱甲药源植物研究所取的成果和难点进行总结,以期为今后的研究提供一定参考。