基于特异性引物高效构建TALE文库

人工构建的转录激活因子样效应物(TALE)已广泛应用于基因转录调控和基因组编辑领域,针对TALE构建过程非常复杂,研发了一种构建TALE文库的新方法。首先,基于金门酶切连接方法,设计3种用于识别碱基G的TALE骨架质粒;其次,使用4种特异性引物扩增3种骨架质粒得到质粒突变体;最后,使用金门酶切连接方法连接3种质粒突变体,成功构建最终的TALE文库。基因测序结果表明该文库包含所有可能确定TALE-DNA结合特异性的核苷酸组。由于TALE的高靶向性和多功能性,该TALE文库将广泛用于生命科学领域。

基于三联体和金门克隆的快速TALE模块组装技术

目的:通过降低转录激活因子样效应物(Transcription Activator-Like Effector,TALE)重复,建立新型简单快速的组装方法。方法:利用密码子的简并性,建立含64种组合的三联体非重复序列库。设计一系列PCR引物,其5’端带有Ⅱ型限制性内切酶识别序列。通过PCR扩增TALE三联体,Esp3I酶切获得DNA突出末端按顺序互补配对。所有三联体片段与TALE骨架载体混合后,用金门(Golden Gate)克隆技术进行有序组装,构建获得具有特定DNA靶向能力的TALE表达载体。结果:利用三联体,可通过一步反应实现简单快速TALE的构建,正确组装的效率高。将TALE与脱氨酶融合,再与CRISPR/Cas9系统组合成Ta C9-BE系统,在293T细胞中5个位点实现了高效的单碱基编辑。结论:结合TALE三联体库和金门克隆技术建立了一种新的TALE构建技术——Tri-GG,这种方法具有易操作、成本低、时间短的优势,为TALE在基因编辑的应用提供了一个新的技术途径。

“仙女化”与“妖魔化”——《金瓶梅词话》与泰国《昆昌昆平唱本》女性形象比较解析

《金瓶梅词话》与《昆昌昆平唱本》是中泰两国古代文学中的杰出之作,两部作品成功塑造了一系列高度真实、典型的人物形象,尤其是女性形象,包括被压抑与被束缚的贤德淑妇形象、被异化与被污名的“失节”淫妇形象和被无视与被损害的无宠小妇形象等。以类同性为立足点,采用比较文学平行研究的方法对这些女性形象进行全面细致的对比分析,对于我们更为深入地了解古代中泰两国女性的生存状态及与之相应的深层文化原因大有裨益。同时,有利于我们总结东方国家相似的文学作品所蕴含的美学价值及其文学创作规律,展示东方文学的独具魅力和丰厚意蕴,从而揭示出人类文化知识体系中的共通性及文学的独特性。

自主可控EDA金光SPICE的技术特点及应用方法研究

作为集成电路EDA工具,金光SPICE能够有效解决我国缺乏自主知识产权集成电路EDA工具的问题,能助力提升我国集成电路教育水平和设计水平。通过详细分析金光SPICE的技术特点,结合国产工艺及器件模型库,利用金光SPICE软件的高性能、高精度、高兼容性等优点,提出了从电路图绘制到SPICE仿真的完整设计流程。基于上述流程,讨论分析了反相器链和施密特触发器电路的原理,并利用金光SPICE完成了电路的设计与验证,证明基于金光SPICE的集成电路设计方法能够有效地提高集成电路设计的质量和效率,降低设计的成本和风险,具有较强的实用价值和推广意义。

《画壁》文化密码解读三则

《聊斋志异》中的《画壁》是一篇经典之作,它吸取了前代《高僧传》中《释宝志》及《广异记》中《朱敖》里的文化密码,点化在自己的作品中,让朱孝廉、挂搭老僧和志公产生有机联系,让散花天女、观音菩萨和黄金锁子骨菩萨发生相关联想。这样一来,一篇短短的小说就意蕴丰厚、情味浓郁起来,具有了更高的可读性和耐读性,甚至还引起了纪晓岚兴趣浓厚的“反模仿”。

伦勃朗的金链意象探究

伦勃朗在肖像画中经常使用金链这一元素,其晚期肖像画《亚里士多德与荷马半身像》中亚里士多德引人注目的金链曾不仅被视为宇宙与秩序的象征,还被看做世俗荣誉及愿望的投射。金链代表世俗荣誉的同时也意味着束缚,结合伦勃朗的生活态度、艺术风格和艺术道路可知,其既不接受获得金链赏赐所表达的社会地位与艺术成就,也不接受获得金链所必须接受的束缚,并借亚里士多德表达对此不屑。

一种Montgomery型椭圆曲线的高效标量乘算法

椭圆曲线标量乘法是椭圆曲线密码系统的基本运算,安全高效的标量乘法将直接提高椭圆曲线密码系统的效率和安全性.本文将Fibonacci数列的概念进行了扩展,提出了Fibonacci型数列的概念,并用Fibonacci型数列将Montgomery型曲线上点的加法运算公式进行了简化,得到了新的点加公式fibAdd.利用黄金比率加法链方法计算任意整数k的Fibonacci型数列.将二种方法结合,构造了Montgomery型曲线上任意整数k的标量乘算法.本文提出的算法比GRAC-258快23%,在最优情况下比EAC-320快39%,同时,由于本算法只需要进行点的加法运算,不需要进行倍点运算,因而本算法天然地具有对抗边信道攻击的特性.

异化翻译与文化尊重:藏族民间故事《尸语故事》英译本特点分析

《尸语故事》是一部流传很久的藏族古代故事集,藏族人民通过其中的故事来向下一代传授这个民族纯朴的道德观念、传统美德、生活经验等。《尸语故事》的思想和精神内容是正面的、积极的,因此受到了国内外很多学者的关注,并翻译成多种语言。《尸语故事》中出现了大量的藏文化特色浓郁的词汇、格言、习语,特别是谚语和俗语等。它们通俗易懂、言简意赅、形象生动、妙趣横生,是藏语言的精华之一。美国学者Sandra Benson通过采用异化翻译法最大程度地展现了原著的魅力,而不是一味地去迎合读者。这既是对原作的忠实,也是对弱小民族文化的尊重。

佛典譬喻与西藏民间故事比较研究——以《金玉凤凰》为中心

西藏民间故事集《金玉凤凰》所收58则故事中,有25则源于佛教相应故事,且其中17则源于佛典譬喻故事。文章在考察其佛典渊源的基础上,从构成要素、文体功能诸方面,揭示出由佛典譬喻到西藏民间故事间的变异。

“中国白酒金三角”产业链垂直专业化的治理优化研究

"中国白酒金三角"产业链垂直专业化的治理中,产业集群内企业之间的关系主要是企业网络化组织和契约关系,包括显性契约关系和隐性契约关系。核心企业和配套企业关系的治理机制主要是一种显性契约关系,包括促进产业链稳定运行的治理机制和促进产业链高效运行的治理机制。集群内地方网络治理机制主要是一种隐性契约关系。在治理机制优化的前提下,再通过大型核心白酒酿造企业"归核化"等手段进行垂直专业化治理优化。

从长江黄金水道到长江经济带——关于建设长江经济带的思考

本文从长江干流9省市的经济分析入手,从生态长江、现代物流视角,探讨了长江经济带的建设问题。文章利用智猪博弈理论,针对长江经济带难以真正形成经济体的症结,提出以国家战略管理长江,呼吁"大猪"(下游省市)先动,以此推进和完善长江供应链体系并建立上下游资源与生态的补偿机制。

张爱玲《金锁记》中曹七巧变态心理原因分析——从精神分析角度透视

张爱玲在《金锁记》中着力刻划了一个在现代文学史上争议颇多的人物形象——曹七巧。作者以女性特有的敏感、细腻的笔触,描述了七巧的可怜可恨。本文力求从精神分析的角度还原七巧心理变态的深层原因:情感的缺失、婚姻的不幸、欲望的压抑、生存的恐惧等。人都是需要宣泄的,七巧只能以另类的方式排遣自己的愤懑,实际就不是常态,让人不得不哀其不幸,恨其不争,怒其不仁。人格的缺陷、环境的逼迫、爱情的破灭最终导致人性的裂变,这不能不说是一种苍凉与震撼。

张爱玲的小说观及其小说创作

雅俗两种文学的关系,呈现出多种情状。张爱玲的创作,突出、集中地显示了历史转变中雅俗汇通的错综情态。着眼于小说的多销、赚钱,强调小说的故事性,不避讳通俗性,也有一定的文化层次,且具有较多的洋化色彩,这些都是海派作家的作品常有的特征。张爱玲正是一个具有鲜明海派特征的小说家。在张爱玲身上,我们可以发现两个与时代主潮不同的变化:她遭受封建家庭的压迫,以至迫害,却没有走向五四式反封建的个性解放,而是在香港之战的刺激下,孳生出对于个体情欲的体验与感悟。她认识到大众的重要性,并非想融合进去,而是将大众看作是买杂志的衣食父母,她是为了求名求利才面向一个特定的读者群的。这两点都使得张爱玲在社会政治学模式兴起的现代小说史上的存在带有一种十分短暂的机遇性,并且也使她的创作取得了一种独特性。她的小说观及其创作具有由雅及俗,雅中见俗的特点。张爱玲小说中比较独特的主题,是对于人性之扭曲的描写。张爱玲小说在艺术上突过前人与同时代人的地方,在于她醒目地运用了一种幻丽的笔法。张爱玲善于具体地表现人物的心理,景物之写中融入心理感受是一种方法,意象连缀也是一个方法。但由于缺少正确的理性升华,加之生活范围狭窄,因此她势必难以对人性的扭曲作出更多的社会、文化的开掘。再加上在香港战争中所形成的对于人的生物性、兽性及缺点的认识,因此她极易走到对人的情欲作出过甚强调的地步,从而出现病态的表现。张爱玲小说所给予我们的最重要的启示,是必须坚持雅对于俗的提高作用,坚持丰博的精神力量对于感性材料的透入。

论戏曲“新编”的现代意识与古典精神——以新编京剧《金锁记》、《曙色紫禁城》为例

本文以台北国光剧团的新编京剧《金锁记》和中国京剧院的新编京剧《曙色紫禁城》为具体的个案,从两剧的编演艺术实践出发,拟就其题材选择、形象塑造及舞台处理来分析戏曲"新编"的艺术思维的模式与艺术表现的得失;并进而在此基础上探讨现代文化语境中"新编"戏曲所应体现出的现代意识的呈现与古典精神的坚守诸问题,思考戏曲"新编"者的文化立场的选择、艺术品格的追求及其审美价值的取向。

供应链管理环境下的晋陕豫黄河金三角民营中小企业物流管理研究

面对市场化带来的强烈影响,中小型民营企业也将会应对日益激烈的行业竞争。在民营企业现有的内部管理中,物流管理构成了其中不可或缺的核心性与关键性要素。建立在供应链前提下的新型物流管理体现出独特的管理优势,因此能够全面适用于晋陕豫黄河金三角地区的中小型民营企业。对于上述区域的中小民营企业来讲,应当更多关注物流管理以及供应链管理,依照因地制宜的宗旨与思路来健全现阶段的管理模式,确保其符合更高层次的物流实效性。

暖链管理强化措施对早产儿黄金小时体温的影响

目的:研究暖链管理对早产儿黄金小时体温的积极意义。方法:选取2017年5月-2018年7月使用车载暖箱转入笔者所在医院NICU的早产儿92例为研究对象,采用随机分配方式将早产儿分为对照组与观察组,各46例。对照组接受常规护理干预,观察组实施暖链管理强化措施。对比两组低体温发生率、体温水平及并发症发生率。结果:观察组低体温发生率及并发症发生率均明显低于对照组,体温水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:强化暖链管理对早产儿黄金小时体温管理效果显著,应在护理管理实践中推广应用。

迟子建小说中狐仙神话的跨文化探源

迟子建小说中的狐仙神话深受儒教、佛教、道教、中国古代先民的神性意识多元丈化的影响。根据比较故事学的理论,迟子建小说中的狐仙神话可以看作为母题链,能够从中提取出动物托梦、轮回果报、修炼成仙、白色动物和动物感恩五个母题,其中蕴含着丰富的中国传统文化内涵,折射出期望人与自然和谐发展的深层寓意。

《金锁记》改写的背后

《金锁记》是张爱玲作品中唯一一篇充满斗争激越、呼应“五四”主题的文章。改写后的《怨女》则成为超越时代局限 ,走向人性深处 ,带有普泛性和恒定性主题的文章。在张爱玲的文学趣味向传统复归的背后 ,是作者对“五四”文学的反思 ,以及对中国文艺的表现方式、表现题材的寻求。

新引入的园林绿化植物——金链树

金链树是山东省果树研究所于2000年从加拿大引进的园林绿化植物资源,突出特点是花期长,花量大,花色金黄色,适于作为行道树或庭院树栽植。

论叶宪祖的戏曲创作及其成就

叶宪祖是明代万历年间越中戏曲作家群中的重要成员,作有6种传奇和24种杂剧。在剧作内容上,描写男女爱情、抨击社会黑暗、宣扬佛法;在艺术形式上,严守音律,语言本色自然,对杂剧的艺术体制作了创新。叶宪祖的戏曲创作不仅对当时的戏曲作家产生了影响,而且其剧作在今天的戏曲舞台上仍有演出。