RP-HPLC法同时检测香青兰乙酸乙酯提取物中3种成分的含量

目的:建立反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatogra,RP-HPLC)法测定香青兰乙酸乙酯提取物中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸和田蓟苷的含量。方法:采用Inertsil ODS-SP(4.6×150 nm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长254 nm,柱温35℃,进样体积10μL。结果:木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸与田蓟苷分离效果良好,分别在10.6~106.0μg/mL(r=0.9987)、11.5~115.2μg/mL(r=0.9994)、8.1~81.2μg/mL(r=0.9996)呈良好的线性关系;平均回收率为97.83%、99.07%、98.63%;RSD值为1.03%、1.44%以及0.69%。结论:该方法重复性好,结果准确可靠,为香青兰提取物中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸和田蓟苷成分的含量测定提供科学依据。

香青兰总黄酮通过调控TGF-β/BMP信号通路对肺动脉高压大鼠的保护作用

目的 通过野百合碱诱导的肺动脉高压(PH)大鼠模型,探讨香青兰总黄酮(DMTF)对PH大鼠的保护作用及作用机制。方法 建立野百合碱诱导的PH大鼠模型,采用超声法检测大鼠心脏功能,观察肺的病理变化并评估PH的发展状态以及肺血管重构程度。使用ELISA法检测血清相关指标,评价DMTF抗炎、抗氧化应激能力;使用Western blot法检测BMPR2、TGF-β1、Smad1/5/8、p-Smad1/5/8、Smad2/3和p-Smad2/3的蛋白表达。通过低氧诱导肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖模型,并用CCK-8法检测细胞增殖能力;使用流式细胞术检测细胞周期及凋亡,并采用Western blot法检测BMPR2、TGF-β1、Smad1/5/8、p-Smad1/5/8、Smad2/3和p-Smad2/3的蛋白表达。结果 心脏超声和病理检查结果显示,PH大鼠平均肺动脉压力(mPAP)显著升高,血管壁增厚,α-SMA表达增加,血清中ET-1、IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA含量升高,SOD、GSH-Px和NO含量降低(P <0.05)。DMTF药物干预后降低mPAP,并减轻或延缓肺动脉血管重构;升高血清SOD、GSH-Px和NO含量,降低ET-1、IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA含量;下调PH大鼠肺组织中TGF-β1、p-Smad2/3蛋白的表达,并上调BMPR2、p-Smad1/5/8蛋白的表达(P <0.05)。CCK-8和流式细胞术结果显示DMTF抑制了低氧诱导的PASMCs过度增殖,并下调TGF-β1、p-Smad2/3蛋白的表达,上调BMPR2、p-Smad1/5/8蛋白的表达(P <0.05)。结论 DMTF可降低肺动脉压,改善肺血管重构,对PH大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与抑制炎症反应、减轻氧化应激反应和调节TGF-β/BMP信号通路有关。

基于网络药理学和分子对接探究香青兰保护脑卒中的作用机制

目的:基于网络药理学研究香青兰(Dracocephalum moldavica L.)对于脑卒中的保护作用机制。方法:通过NCBI、CNKI找出香青兰有效成分,使用Pubchem、swiss target prediction数据库预测香青兰的有效靶点,运用GeneCards、Omim数据库搜索与脑卒中(cerebral stroke)相关靶基因,构建维恩图筛选交集基因,利用cytoscape建立药物、成分、靶点、疾病关系网络图并可视化,利用String软件构建蛋白网络互作图,利用DAVID数据库进行GO富集和KEGG分析。结果:通过查找文献共找出香青兰有效成分23个,对应的靶点有1682个,主要分子有NADPH氧化酶4(NOX4)、黄嘌呤氧化脱氢酶(XDH)、髓过氧化物酶(MPO)等;通过PPI拓扑分析得到核心靶点57个;GO富集分析显示涉及生物过程(biological process,BP)443个、分子功能(molecular function,MF)104个、细胞组成(cellular component,CC)66个;KEGG结果显示共涉及信号通路有143个,其中主要有癌症通路(hsa05200:pathways in cancer)、PI3K-Akt信号通路(hsa04151:PI3K-Aktsignaling pathway)、神经活性配体-受体相互作用(hsa05022:neuroactive ligand-receptor interaction)等。结论:本研究初步揭示了香青兰可通过多种靶点、通路等治疗脑卒中,为进一步科学实验提供理论基础。

环杷明与香青兰总黄酮联合用药对肺纤维化小鼠的影响

研究环杷明(Cyc)和香青兰总黄酮(TFDM)联合用药对肺纤维化(PF)小鼠的影响及作用机制。将C57BL/6小鼠随机分成5组,每组10只,即正常对照组、模型组、TFDM组(360 mg/kg)、Cyc组(5 mg/kg)和TFDM组(360 mg/kg)+Cyc组(5 mg/kg)。采用气管内滴注博来霉素(4 mg/kg)构建小鼠PF模型,正常对照组给予等量蒸馏水,建模第二天,给予相应药物干预,连续给药28 d。肺功能检测采用AniRes2005动物肺功能分析系统进行。肺组织进行冰冻切片的制作,使用HE染色和Masson染色观察肺组织病理情况;水解法测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量;采用Western blot检测各组小鼠1型胶原蛋白(Col-1)、纤维连接蛋白(FN1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、SHH、Ptch1、SMO、Gli1和SUFU蛋白表达。结果显示与正常对照组比较,HE染色中模型组肺组织结构异常,出现炎性细胞浸润;Masson染色中出现较多被染成蓝色的胶原纤维化组织,肺组织被严重损伤;HYP含量显著升高(P<0.01);肺功能检测显示吸气相气道阻力(RL)、呼气相气道阻力(RE)和FEV0.1/FVC显著升高,肺动态顺应性(Cdyn)、用力肺活量(FVC)和呼气峰流速(PEF)显著降低(P<0.01);Western blot的结果可得知模型组肺组织中Col-1、FN1、α-SMA、SHH、Ptch1、SMO和Gli1蛋白表达水平显著升高,SUFU蛋白表达水平显著减低(P<0.01)。与模型组相比,Cyc组和TFDM组肺组织结构正常,几乎无炎性细胞浸润;Masson染色可以看出,蓝色纤维组织较少,肺组织纤维化程度得到缓解;HYP含量上调(P<0.01);肺功能检测显示RL、RE和FEV0.1/FVC显著下降,Cdyn和FVC和PEF显著升高(P<0.01);Western blot显示PF小鼠肺组织中Col-1、FN1、α-SMA、SHH、Ptch1、SMO和Gli1蛋白表达水平显著下调,SUFU蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。TFDM可以在一定程度上改善小鼠PF,进一步得出结论Cyc和TFDM联合用药能更好地发挥作用。

高效液相色谱法同时测定维药香青兰有效部位中10个化学成分的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定维药香青兰有效部位中10个成分含量。方法采用Shim-pack ODS(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.5%甲酸溶液(B),梯度洗脱(0—30 min,17%A;30—60 min,17%→28%A;60—78 min,28%A),流速为1.0 mL·min-1;检测波长为330 nm,柱温为35℃。结果咖啡酸、4-香豆酸、木犀草苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、丹酚酸A、田蓟苷、香叶木素在该色谱条件下分离度良好,在考察的浓度范围内线性关系良好(r>0.9992)。加样回收率和相对标准偏差(RSD)分别为91.83%~106.43%和0.38%~2.22%内。结论建立的含量测定方法准确性高、重复性好,适用于香青兰有效部位的分析与质量控制研究。

香青兰药材HPLC指纹图谱的研究

目的:建立香青兰药材反相高效液相色谱(RP-HPLC)指纹图谱分析方法,为有效控制香青兰药材的质量奠定基础。方法:采用RP-HPLC,色谱柱为Dikma-C_(18),甲醇-0.2%磷酸水梯度洗脱,紫外检测波长为328nm,流速为0.8～0.5ml/min,分析时间为50min,分析了11批香青兰药材的HPLC指纹图谱。结果:在选定的色谱条件下以田蓟苷为参照峰,通过相似度分析确定11个色谱峰构成香青兰药材指纹图谱的特征峰。结论:采用RP-HPLC所建立的指纹图谱具有稳定、重复性好的特点,可用于香青兰药材的质量控制。

RP-HPLC法测定香青兰有效部位中7种成分的含量

目的:建立RP-HPLC法测定香青兰有效部位中田蓟苷、金合欢素、木犀草素-7-O-β-葡萄糖醛酸苷等7种成分含量的方法。方法:Sunfire-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~5min,16%A;5~45min,16%→28%A;45~65min,28%→80%A);流速1.0m L·min^(-1);柱温35℃;检测波长330 nm。结果:木犀草素-7-O-β-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-β-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸、香叶木素-7-O-β-葡萄糖醛酸苷、田蓟苷、金合欢素-7-O-β-葡萄糖醛酸苷和金合欢素分离均良好,分别在1.20~60.00μg·m L^(-1)(r=0.9999)、0.48~24.00μg·m L^(-1)(r=0.9997)、0.88~44.00μg·m L^(-1)(r=0.9999)、0.88~44.00μg·m L^(-1)(r=0.9999)、3.84~192.00μg·m L^(-1)(r=0.9999)、0.72~36.00μg·m L^(-1)(r=0.9999)和0.72~36.00μg·m L^(-1)(r=0.9997)范围内呈良好线性关系;平均回收率分别为99.29%,97.04%,99.56%,98.29%,101.18%,99.34%和95.50%,RSD值分别为0.52%,1.13%,0.55%,0.42%,0.58%,0.97%和0.60%。结论:该色谱方法灵敏、稳定、简单、准确,可用于香青兰有效部位及制剂的质量控制。

香青兰总黄酮通过调控lncRNA FOXD3-AS1对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响

目的探讨香青兰总黄酮对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的影响及可能机制。方法不同浓度(25、50、100μg/mL)的香青兰总黄酮作用于ox-LDL诱导的HUVEC、ox-LDL诱导转染FOXD3-AS1小干扰RNA的HUVEC或香青兰总黄酮作用于ox-LDL诱导的转染FOXD3-AS1过表达载体的HUVEC后,检测细胞中MDA、SOD和GSH-Px水平,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western Blot检测细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达水平,RT-qPCR检测FOXD3-AS1表达水平。结果ox-LDL诱导HUVEC细胞后,细胞中MDA水平、细胞凋亡率、Bax蛋白和FOXD3-AS1表达升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);而香青兰总黄酮干预后,ox-LDL诱导的HUVEC细胞中MDA水平、细胞凋亡率、Bax蛋白和FOXD3-AS1表达降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。干扰FOXD3-AS1表达后,ox-LDL诱导的HUVEC细胞中MDA水平、细胞凋亡率和Bax蛋白表达降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。过表达FOXD3-AS1后,香青兰总黄酮处理的ox-LDL诱导的HUVEC细胞中MDA水平、细胞凋亡率和Bax蛋白表达升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。结论香青兰总黄酮可能通过下调FOXD3-AS1表达减轻ox-LDL诱导的HUVEC氧化应激和凋亡,保护细胞免受ox-LDL损伤。

内蒙古香青兰提取物的抑菌作用及机制研究

目的:探究内蒙古香青兰提取物的抑菌作用及其初步的抑菌机制。方法:分别采用纸片法、二倍稀释法测定香青兰提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、副溶血性弧菌的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC),并分析各菌株的生长曲线和碱性磷酸酶(AKP)的变化,讨论其抑菌机制。结果:香青兰提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和副溶血性弧菌4种试验菌均有抑菌活性,最小抑菌浓度均为2.0 mg/mL,而且对金黄色葡萄球菌具有显著的抑制作用。各菌株AKP含量随着香青兰提取物作用浓度不同而不同,均显示了对菌株细胞壁不同程度的破坏作用。结论:香青兰提取物的抑菌机制与细菌细胞壁的破坏有关。

香青兰有效部位的成分鉴定、指纹图谱建立及含量测定

目的为香青兰有效部位(EPDM)的全面质量评价和控制提供依据。方法制备10批EPDM,利用高效液相色谱串联四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q-Exactive-MS)联用技术采集EPDM化学信息,结合文献检索、数据库比对、人工解析等手段进行成分鉴定。根据《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)》建立10批EPDM的HPLC指纹图谱,进行相似度评价和共有峰指认,并采用HPLC法测定5个指标成分的含量。结果从EPDM中共鉴定出11个化合物。10批EPDM的指纹图谱相似度均在0.96以上。从11个共有峰中指认出了木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(LG)、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷(APG)、迷迭香酸(RA)、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(DG)、田蓟苷(TL)5个色谱峰。定量分析结果显示,上述5个成分在检测质量浓度范围内均线性良好(R2≥0.999),平均加样回收率为95.12%~98.37%;各成分含量分别为21.2683~29.2439 mg/g(LG)、6.3654~7.7717 mg/g(APG)、37.3274~45.6712 mg/g(RA)、17.1699~21.9859 mg/g(DG)、66.9404~91.2063 mg/g(TL)。结论所建立的成分鉴定、指纹图谱和含量测定方法稳定可行、结果可靠,适用于EPDM的综合质量评价和控制。

民族药香青兰化学成分及药理作用研究进展

目的对民族药香青兰进行化学成分及药理活性的研究,为该药材的综合应用和深入研究奠定基础。方法通过查阅1995年至2022年知网、PubMed中的中英文文献与相关文献对香青兰进行综述。结果经过系统的研究,发现香青兰的组成主要包含总黄酮和黄酮苷类、挥发油、三萜类和蛋白质等。这些成分有着多种药理作用,如抗缺氧、抗血栓和降血压。结论香青兰对于治疗高血压、心脏病等有一定疗效。香青兰在蒙医临床中应用广泛。研究表明,香青兰的化学成分和药理作用已经取得了一定的进展,其作用范围广泛,对心血管疾病有显著的疗效。

香青兰多糖的提取、测定及其对活性氧自由基的清除作用

建立了热水提取、乙醇沉淀、Sevag法去蛋白、有机溶剂分离纯化提取香青兰多糖的方法,并用苯酚 硫酸比色法测定其含量;同时采用生物化学法测定了香青兰多糖对活性氧自由基O2 -·、·OH和H2 O2 的清除能力和还原能力,以枸杞多糖作为对照品。实验结果表明:香青兰中多糖含量为6 38% ,回收率为93 6 %～10 5 6 % ,RSD =2 3% (n =4 )。香青兰多糖对O2 -·、·OH和H2 O2 具有良好的清除能力,同时还有较强的还原能力,它们的活性大小与多糖的用量呈正相相关性,且均比枸杞多糖的活性强。

火焰原子吸收光谱法分析香青兰中微量元素的溶出特性及化学形态

结合香青兰的药用功效,对其铜、锌、锰、铁、镁、镍6种微量元素的含量和形态进行了分析.分别用0.45 μm滤膜、D101型大孔吸附树脂,将香青兰水煎液中铜、锌、锰、铁、镁、镍分为悬浮态和可溶态、有机态和无机态;并采取正辛醇-水分配体系模拟水煎液中铜、锌、锰、铁、镁、镍在人体胃肠中的分配情况,建立了上述6种元素的4种形态分离分析方法,用火焰原子吸收光谱法测定6种微量元素的含量、分布及其在不同溶剂中的溶出特性和化学形态.结果表明,方法的回收率在92%～106%范围内,相对标准偏差均在3.8%以下,铜、锌、锰、铁、镁、镍是各以某种形态为主的多种形态共存的混杂体系.

香青兰总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的观察香青兰总黄酮预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及可能的机制。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。记录心电图S-T段变化,观察心肌组织病理学改变,测定各组血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷草转氨酶(AST)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和髓过氧化物酶(MPO)的活性及血清中丙二醛(MDA)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。结果与模型组比较,香青兰总黄酮能抑制缺血再灌注时心电图S-T段的抬高及缺血心肌病理学改变,降低血清中LDH、CK、CK-MB、AST和MPO的活性及MDA、IL-1、IL-6和TNF-α的水平,并能够提高血清T-SOD和GSH-Px的活性。结论香青兰总黄酮对心肌缺血再灌注损伤心肌具有明显的保护作用,这种作用可能与抗氧化损伤和抑制炎症反应机制有关。

香青兰的离体保存研究

以香青兰为试材,研究不同养分水平培养基,不同浓度甘露醇、多效唑及琼脂对试管苗离体保存的影响。结果表明:1/4MS培养基中试管苗前期存活率较低,但保存时间延长了4个月以上;甘露醇对试管苗的生长有抑制作用,可延长试管苗存活时间4个月;多效唑能促进香青兰试管苗侧芽分化,但对试管苗茎的伸长有明显抑制作用,其中浓度为2.0 mg/L时试管苗存活率最高,保存时间可延长4个月,保存至9个月时,存活率达到50%;MS培养基中附加琼脂浓度8.5～10.5 g/L为香青兰最佳离体保存方法,该条件下香青兰试管苗保存时间明显延长,保存12个月时存活率仍高达85%～60%,且试管苗恢复生长后长势良好,其再生后代的形态特征与对照株无差异。

香青兰对缺血心肌保护作用的实验研究

采用异丙基肾上腺素（ＩＳＰ）诱发小白鼠急性心肌缺血损伤模型，以心肌肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、ＳＯＤ、Ｓｅ－ＧＳＨＰｘ、ＭＤＡ、ＣＰＫ及心肌超微结构为指标，观察香青兰对急性心肌缺血损伤的保护作用。结果显示，香青兰组较缺血组心肌肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、ＳＯＤ、Ｓｅ－ＧＳＨＰｘ酶活力明显增高，血清及心肌组织ＭＤＡ含量下降，血清ＣＰＫ酶活力降低，心肌超微结构改变减轻。初步表明香青兰可通过提高心肌组织中自由基清除酶活力，保护肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活力减轻钙超载，而发挥对缺血心肌的保护作用。

维吾尔药材香青兰DNA条形码鉴定方法的研究

目的:建立维吾尔药材香青兰的DNA条形码鉴别方法。方法:采用ITS2序列对香青兰Dracocephalum moldavica L.及其10种近缘种的25份样品进行PCR扩增并测序,比较种内和种间变异,采用K2P模型构建NJ系统树,并比较二级结构差异。结果:产自新疆的香青兰(KF041160、KF041163、KF041168、KF041169)种内无变异,来源于GenBank的香青兰(AY506659)种内存在2个变异位点;NJ树显示香青兰可以与其近缘种区分开;垂花青兰D.nutans L.、羽叶青兰D.bipinnatumRupr.、全叶青兰D.integrifolium Bge.等也可以与其他近缘种区分。结论:ITS2条形码序列可以鉴定香青兰及其近缘种植物,提供了维吾尔药材香青兰分子鉴定的有效途径。

香青兰酚酸性化学成分的研究

从香青兰(Dracocephalum moldavica L.)乙醇提取物乙酸乙酯部位中分离得到8个酚酸性化合物,经过理化性质、波谱分析及文献对照,分别鉴定为amburoside A(1)、阿魏酸(2)、咖啡酸(3)、迷迭香酸(4)、迷迭香酸甲酯(5)、木犀草素(6)、山奈酚(7)和β-胡萝卜苷(8)。其中化合物1～5为首次从该植物中分离得到。

香青兰种子萌发生理特性的研究

本试验研究了不同光照、温度及浸种时间对香青兰种子萌发的影响。结果表明：香青兰种子在光照或黑暗条件下均能萌发，但光照条件可缩短发芽时间，提高发芽势；香青兰种子的发芽温度范围为10-35℃，最适发芽温度为25℃；浸种可促进香青兰种子的萌发，6-12h为适宜浸种时间。其中，浸种6h发芽势最高，为70．0％；浸种12h，发芽率迭最高，为94．0％。

大孔吸附树脂-比色法测定维药香青兰中总三萜酸成分

目的测定香青兰全草中总三萜酸成分含量。方法以齐墩果酸为指标,采用香草醛-冰醋酸及高氯酸显色后用分光光度法测其含量。结果齐墩果酸的线性范围是8.48-42.4μg·ml^-1,测得香青兰中总三萜酸含量约为14.9 mg/g,RSD为1.23%。结论用大孔吸附树脂对香青兰除杂后富集利用显色法测定总三萜酸是可行的,该方法具有简便、快速、准确、重复性好等优点。