通气对几种水培观赏植物生长的影响

采用通气泵对营养液通气以提高营养液中溶解氧量,研究通气对水培小天使、芦荟、金琥、山海带4种植物生长的影响。结果表明:通气会改变植物不同范围直径根在根系中所占的比例,进而增大根总长、根表面积,促进植物对养分和水分的吸收。

海南龙血树抗肿瘤新用途研究

目的:筛选海南龙血树的抗肿瘤活性部位。方法:分别用溶剂萃取法和大孔吸附树脂柱层析法对海南龙血树的95%乙醇提取物进行分段处理,利用MTT法测定各提取部位体外抗肿瘤活性。结果:氯仿提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对体外肿瘤细胞表现出较强的抑制活性,甲醇洗脱物显示了弱活性,水提取、水洗脱物和50%甲醇-水洗脱物则没有活性。在各提取物中氯仿提取物活性最强。结论:氯仿提取部位是海南龙血树主要的体外抗肿瘤活性部位。

海南龙血树组织培养过程中血竭形成的诱导

以海南龙血树组培苗为材料,研究组织培养过程中不同植物激素和浓度、不同龙血树组织、不同光照条件对血竭形成诱导的影响。结果表明:植物细胞分裂素(6-Benzylamino purine,6-BA)可以诱导龙血树组培苗产生血竭,其诱导的效果与6-BA的浓度无关,而与光照条件有关,并且在一定的范围内其诱导效率与光照强度成正相关;血竭的形成与组培苗的木栓化程度有关,木栓化程度越高,越容易诱导血竭的形成。

海南龙血树基因组DNA提取方法比较

为选择一种简单、快速、有效的海南龙血树总DNA的提取方法,分别采用CTAB法、SDS法、SDS-CTAB法和改良CTAB法提取海南龙血树嫩叶片的总DNA,用琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计和ISSR对所提取的总DNA进行检测。结果表明,改良CTAB法提取的DNAA260/A280在1.7～1.9之间,纯度高、杂质少、DNA完整性好。以该方法提取的总DNA为模板进行ISSR扩增,谱带清晰,多态性、稳定性、重复性好。该法提取的总DNA适用于PCR扩增和其他分子生物学研究是有效提取海南龙血树基因组的方法。

龙血树血竭生物合成相关基因分离与分析

龙血树是热带、亚热带地区所特有的珍稀植物,是著名民间药物"血竭"的重要原料。该药在我国中药材市场中占有重要的地位。目前血竭的生产是从多年生的龙血树上取其带脂茎杆提炼而成,该法需要大量的原材料,不断的砍伐已使其资源面临枯竭的威胁,现其已被列为国家三级保护的濒危植物。如何有效地开发和利用龙血树这一宝贵的资源,使其得到可持续和高效的利用是目前研究的一个重要方向。本研究以经诱导物诱导处理刚产生血竭和未经诱导物处理的海南龙血树(Dracaena cambodiana Pierre ex Gagnep)组培苗为材料,利用抑制消减杂交(supression subtractive hybridization,SSH)技术构建了龙血树血竭生物合成相关基因的差减cDNA文库,采用PCR方法筛选差减文库获得431个重组子。随机挑取200个克隆经Reverse Northern Blot筛选剔除假阳性后,共获得59个差异较明显的阳性克隆,测序后得51条差异片段,通过BLASTn和BLASTx进行比较分析,结果表明:分离到与信号转导相关的cDNA片段5个,转录翻译相关蛋白cDNA片段5个,物质能量代谢酶类cDNA片段12个,另外有23个克隆在GenBank中均未发现显著相关的同源序列,推测它们可能是功能未知的新基因或是靠近3'-末端的基因片段,因保守性较低,难以通过同源比较推测其功能。

海南龙血树的核型分析

采用染色体压片技术研究了海南龙血树的染色体数目和核型。结果表明:在饱和对二氯苯和0.002 mol/L8-羟基喹啉预处理中,后者预处理2 h效果最好;海南龙血树染色体数为2n=42,核型类型为"2B"型。核型公式为:2n=2x=42=22 m+20 sm,核型不对称系数为62.67%。海南龙血树主要由中部着丝粒染色体和近中部着丝粒染色体组成,未观察到随体染色体。

海南龙血树的组织培养与快速繁殖

用种子作外植体,建立了海南龙血树(DracaenacambodianaPierreexGagnepain)的组织培养和再生体系。结果表明:海南龙血树种子诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA3mg/L+NAA0.3mg/L,诱导率达80%;附加6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L的MS培养基有利于芽的分化和增殖,培养60d左右,每个外植体分化形成的再生小植株数达8～20个;在1/2MS+NAA0.5mg/L的培养基中诱导生根效果最好。

酶解法提取海南龙血树叶总皂苷的工艺研究

研究了酶解法提取海南龙血树叶总皂苷的工艺.采用酶解-乙醇浸提,以龙血树叶总皂苷的提取率作为评价指标,通过单因素试验和正交试验,确定提取海南龙血树叶总皂苷的最佳工艺.结果表明:最佳工艺条件是,酶质量浓度0.20 mg/mL,酶解温度50℃,pH=5.0,酶解时间为1.5 h,料液比1∶12.在此条件下,海南龙血树叶总皂苷提取率为4.13%.

海南龙血树DNA提取与ISSR反应体系的优化

目的:从海南龙血树叶片中提取出高质量的总DNA,建立与优化海南龙血树ISSR的反应体系。方法:采用4种DNA提取方法,提取海南龙血树叶片中的总DNA,并对DNA进行紫外和电泳检测。采用改良CTAB法提取了基因组DNA模板,对海南龙血树ISSR-PCR反应体系中各个主要影响因子进行了优化和筛选。结果:改良CTAB法提取的DNAA260/A280在1.7～1.9之间,纯度高、杂质少、DNA完整性好。根据PCR产物的琼脂糖凝胶检测结果,由试验得到的最佳反应体系为:60ng模板DNA,1.5mmol/LMg2+,0.25mmol/LdNTPs,1.0μmol/L引物,1UTaq酶,总体积为20μl。结论:改良CTAB法可以从海南龙血树叶片中提取高质量DNA,该反应体系适用于应用ISSR标记开展海南龙血树DNA指纹、遗传多样性等研究。

海南龙血树种质遗传多样性的ISSR分析

应用ISSR标记,对96份海南龙血树种质的遗传多样性进行研究。从100个ISSR引物中筛选出10个多态性明显、反应稳定的引物,共扩增出134条谱带,平均每个引物能扩增出13.4条带,多态性条带比率达99.25%。材料间遗传相似系数为0.589 6～0.985 1,POPGENE结果分析表明,平均Shannon信息指数(I)为0.370 2,平均Nei’s基因多样性(H)为0.232 1,每位点平均有效等位基因(NE)为1.369 2。用UPGMA法将96份海南龙血树种质分为4大类。

海南血竭的抗菌活性成分研究

目的研究海南龙血树血竭乙醇提取物的化学成分。方法采用硅胶柱色谱和凝胶柱色谱进行分离纯化,根据理化常数和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从海南血竭中分离得到8个化合物,分别鉴定为:1-羟基-6,8-二甲氧基-3-甲基蒽醌(1)、薯蓣皂苷元(2)、偏诺皂苷元(3)、芥子醛(4)、3,4,2',4'-四羟基-3'-甲氧基查耳酮(5)、2',4',4-三羟基-3-甲氧基查耳酮(6)、表松脂醇(7)和(3E)-2,3-dihydro-7-hydroxy-3-[(3-hydroxy-4-methoxy-phenyl)-methylene]-4H-1-benzopyran-4-one(8)。结论化合物1～8均为首次从海南血竭中分离得到。抗菌活性测试结果表明化合物2～7对金黄色葡萄球菌(Staphylococcu aureus)有抑制作用。

海南龙血树的形态组织学研究

采用植物解剖学、显微切片技术等,分别对海南龙血树含有树脂的茎、不含树脂的茎、幼根和叶片等进行了系统的组织学研究。结果表明:老茎主要由栓化层、皮层、形成层和基本组织4部分组成,树脂主要分布在基本组织内维管束的导管和纤维中。叶片为等面叶,气孔主要分布在下表皮上、具有明显的孔下室,上下表皮内侧分布着大量的纤维束。幼根由根被细胞、皮层和维管柱组成。根、茎、叶的部分薄壁细胞中均含有晶束。海南龙血树营养器官的结构特征与干旱、高温和贫瘠的生态环境相适应。这些结果可为海南龙血树的开发和利用提供基本的解剖学证据。

试析国产血竭研究近况

本文简介了国产血竭的植物来源、提取加工过程、化学成份和质量分析以及国内应用的近况。

云南柬埔寨龙血树资源保护与可持续利用对策

柬埔寨龙血树(Dracaena cambodiana Pierre ex Gagnep.)是重要的中药药用植物,为我国的濒危植物物种[1]。文章阐述云南野生柬埔寨龙血树资源的分布和资源量,大量利用导致野生资源的迅速减少已经成为云南血竭药物生产的"瓶颈";研究和提出了柬埔寨龙血树资源可持续利用的对策。

海南血竭的化学成分研究

目的研究海南血竭(Dragon′s blood from Dracaena cambodiana Pierreex Gagnep)的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和半制备HPLC等方法进行分离纯化,根据理化常数和波谱数据鉴定结构。结果从海南血竭中提取分离得到5个化合物,分别鉴定为cambodianin C(1)、cinnabarone(2)、7,4′-二羟基黄酮(3)、3,4-二羟基烯丙基苯(4)和紫檀茋(5)。结论化合物1为新天然产物,化合物2～5为首次从海南血竭中分离得到。抗菌活性测试结果表明:4和5对于金黄色葡萄球菌(SA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)有较弱的抑制作用。