酸枣仁皂苷A对缺血缺氧再灌注的H9C2细胞CD38/NAD^(+)信号通路相关因子表达的影响

目的观察酸枣仁皂苷A对缺血缺氧再灌注的H9C2细胞CD38/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+))信号通路相关因子表达的影响。方法建立H9C2细胞缺血缺氧再灌注模型,将H9C2细胞分为正常组、模型组、CD38抑制剂+中药单体组和中药单体组,使用CCK-8法筛选中药单体干预的最佳浓度并检测细胞活力;生化法检测三磷酸腺苷(ATP)含量、活性氧(ROS)水平、NAD^(+)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)含量和NAD^(+)/NADH比值;酶联免疫法吸附试验(ELISA)检测炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;Western印迹检测CD38、沉默信息调节因子2同源蛋白(SIRT)3和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白(NLRP)3蛋白表达。结果与正常组相比,模型组细胞活力明显下降,ATP含量明显下降,ROS水平及炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量明显增加,NAD^(+)含量及NAD^(+)/NADH比值明显下降,CD38和NLRP3蛋白表达明显增加,SIRT3蛋白表达明显下降(均P<0.05);与模型组相比,中药单体组细胞活力明显上升,ATP含量明显增加,ROS水平明显下降,炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量明显减少,NAD^(+)含量及NAD^(+)/NADH比值明显增高,CD38和NLRP3蛋白表达下降,SIRT3蛋白表达明显增加(均P<0.05);与中药单体组相比,CD38抑制剂+中药单体组细胞活力明显上升,ATP含量明显增加,ROS水平明显下降,炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量明显减少,NAD^(+)含量及NAD^(+)/NADH比值明显增高,NLRP3蛋白表达明显下降,SIRT3蛋白表达明显增加(均P<0.05)。结论酸枣仁皂苷A能够改善H9C2细胞的缺血缺氧再灌注损伤,其机制可能与抑制CD38表达,改善能量代谢障碍和线粒体功能,减缓炎症反应有关。

奇迹女侠NAD^(+)——烟酰胺腺嘌呤二核苷酸

NAD^(+)(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)是一种重要的生物分子,它在细胞内起着关键的能量传递和代谢调控作用。近年来,NAD^(+)在医学和健康领域的研究备受关注,尤其是在衰老、代谢疾病和癌症治疗方面,与它相关的食物也逐渐变成了当代人们餐桌上的新宠。本文用拟人化的口吻介绍了NAD^(+)的化学结构、生物功能以及与健康相关的最新研究发展,分析了它从抗衰老领域转型临床运用的潜力。

高效液相色谱法测定骨骼肌ATP、ADP、AMP、NAD^+、NADH含量

采用高效液相色谱法测定骨骼肌腺嘌呤核苷酸和辅酶Ⅰ含量。高压液相系 统包括：惠普公司ＺＯＢＡＸ－Ｃ１８反相柱５ｍｍ×１２ｃｍ，５９０ＵＶ检测器。流动相为２２０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸钾缓冲液，内含１０％甲醇，用四丁基氢氧化胺ＴＢＡＨ调ｐＨ至６５。等比洗脱，流速为０８ｍｌ／ｍｉｎ。检测波长为２５４ｎｍ。所有样品和标准品在进样前均用０４５μｍ孔径的虑膜过滤后进样５μｌ作色谱分析。结果表明：ＨＰＬＣ可以同时测定ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、ＮＡＤ＋、ＮＡＤＨ，分离效率高，操作简便，快速每个样品仅需１５分钟，而且，重现性好，定性可靠，定量准确。

电位扫描过程中NAD^+在银电极上的原位表面增强拉曼光谱

利用共焦激光拉曼系统 ,原位测定了电位扫描过程中NAD+ 分子在银电极上的表面增强拉曼光谱的变化 .通过分析0 .4 -0 .2 0 .4V电位区间的拉曼光谱的变化 ,推断由于NAD+ 分子中存在着具有空间旋转自由度的磷酸二酯键 。

NAD^+-依赖型异柠檬酸脱氢酶的结构和功能研究进展

NAD+-依赖型异柠檬酸脱氢酶是一个核编码线粒体酶,参与三羧酸循环,负责催化异柠檬酸氧化脱羧成α-酮戊二酸,是循环路径中的限速酶。目前在酶学性质、亚基组成、基因克隆、蛋白组装与转运,以及功能等方面开展了许多研究。本文就这些方面的新进展进行综述。

从头算分析NAD^+及NADP^+的电子传递

用HF从头算计算NAD+及NADP+及其还原产物NADH及NADPH分子的绝对能量、电荷分布、前线轨道能量、偶级距、键长、电子自旋伸展空间,并讨论了空间构形与电子传递的关系,提出了NAD+及NADP+在电极和生物氧化过程中传递电子的机理.

NAD^(+)代谢机制及其对衰老相关疾病影响研究进展

综述NAD^(+)代谢机制及其对衰老相关疾病的影响研究进展。重点从NAD^(+)的生物合成途径、消耗途径及其调控机制等方面阐述NAD^(+)参与的信号通路和细胞过程,以及它在健康与疾病中的作用,并且以NAD^(+)代谢网络中前体物质和关键酶的作用机理为依据,探讨NAD^(+)代谢调控在衰老相关疾病中的潜在治疗方法,为理解NAD^(+)水平下降和衰老相关疾病之间复杂的因果关系提供新的视角;同时从NAD^(+)及其前体的分布和运输、有毒代谢物的产生和修复、NAD^(+)代谢动态的监测和测量等方面阐述NAD^(+)研究发展过程中存在的瓶颈。最后展望以NAD^(+)为靶点进行疾病治疗和药物开发的广阔前景。

NAD^+在纳米金胶上的组装、表征及其应用研究

将NAD+ 固定在纳米金胶 半胱胺修饰的金电极表面构建一种新型的纳米仿生功能界面 ,用电化学交流阻抗、反射紫外 可见光谱和电化学分析法对其组装过程以及活性进行了表征 .基于这种功能界面构建的新型酶生物传感器对乳酸的电催化响应呈现良好的线性 ,米氏常数为 8.8μmol/L ,检测限为 6.0× 1 0 -8mol/L (S/N =3) ,且对NAD+

NAD^(+)代谢与衰老及其运动适应研究进展

目的:总结NAD^(+)代谢与衰老及其运动适应领域的研究进展,旨在深入理解衰老过程中的NAD^(+)代谢以及运动干预对NAD^(+)代谢的调控作用与机制,为通过科学手段促进老年人健康提供思路。方法:以"NAD^(+)""衰老""运动"为关键词,通过检索PubMed、Web of Science等数据库收集文献资料,分析总结NAD^(+)代谢与衰老及其运动适应。结果:(1)在衰老过程中,多个组织器官NAD^(+)水平下降,引起线粒体功能障碍,是许多衰老相关疾病如帕金森病、阿尔茨海默病等的内在发病原因之一;(2)NAD^(+)可能是抗衰老的潜在靶标;(3)NAD^(+)及其前体物质通过促进DNA修复、改善线粒体功能、诱导自噬等机制发挥抗衰老作用;(4)细胞内NAD^(+)水平及其信号通路显著受到运动的调控;(5)NAD^(+)不足可引起能量代谢障碍,导致运动表现欠佳,有研究认为补充NAD^(+)前体物质可提高运动能力,然而目前研究尚未取得一致的结果。结论:NAD^(+)代谢与衰老及相关疾病的发生发展关系密切;通过药物、营养、运动干预等措施调控体内NAD^(+)水平可能是延缓衰老、促进老年人健康、提高运动能力的潜在策略。

NAD^+在心脏缺血及再灌注损伤中的作用

目的通过建立大鼠心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模型,探索药物烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^+)在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的保护作用。方法采用手术结扎前降支建立大鼠心肌I/R模型,20只Sprague-Daw ley(SD)大鼠随机分入I/R+NAD^+组(n=10)和I/R+NS组(n=10),通过血清肌钙蛋白(c Tn-I),TTC染色检测心肌损伤程度,TUNEL染色用于检测缺血区域凋亡信号。结果成功建立大鼠I/R模型,I/R+NAD^+组大鼠血清c Tn-I水平显著低于I/R+NS组[(10.01±3.26)ng/ml vs.(57.17±14.83)ng/ml,P<0.01]。TTC染色结果显示:I/R+NAD^+组大鼠心脏梗死体积显著低于I/R+NS组[(68.06±16.04)mm^3vs.(11.42±9.65)mm^3,p=0.02]。TUNEL染色结果显示:I/R+NAD^+组大鼠心脏梗死区域凋亡信号显著低于I/R+NS组。结论 NAD^+在大鼠心肌缺血再灌注损伤具有显著保护作用,而其具体保护机制需进一步研究。

核糖核酸5'端NAD^(+)帽子修饰研究进展

m7G帽子具有保护RNA不被降解以及招募相关蛋白参与内含子剪切、poly(A)加尾、出核和翻译等功能。一直以来,它被认为是真核生物mRNA所特有的修饰类型。然而近年来,在包括原核生物在内的多个物种中均检测到一种新的RNA 5’端修饰,即核酸代谢物烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD^(+))帽子。目前NAD^(+)修饰RNA(NAD-RNA)的生物学功能研究仍处于起始阶段。本文概述了NAD-RNA的发现及其检测和鉴定技术的发展;探讨了NAD^(+)帽子对RNA的调控功能,以及NAD-RNA脱帽和加帽的影响因素;并进一步推测NAD-RNA在生物的生长、发育和环境响应中发挥的潜在功能。最后,展望了未来NAD-RNA的研究方向和主题。

Photocatalytic oxidation of primary and secondary benzyl alcohol catalyzed by two coenzyme NAD^+ models

Photocatalytic oxidation of primary and secondary benzyl alcohol to corresponding benzaldehyde or acetophenone using Acr＋Cl04- or PhAcr＋Cl04- as photocatalysts under visible light irradiation at room temperature.

NAD^+的电子结构及其在呼吸链中的作用

将量子化学的分子结构理论,应用干NAD^+的外层电子结构计算;先计算出由碳原子为骨架的分子结构,再用微扰理论的方法去处理杂原子取代碳原子的NAD^+的电子结构及电荷密度;从而得出亲核反应的重要部位应在NAD^+分子的第4位碳原子上。

基于NAD^+/NADH比率荧光探针的乳酸检测法

结合氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+/NADH)比率荧光探针SoNar与酶法分析技术,建立了一种灵敏的乳酸检测方法,并进一步对影响检测性能的几个因素,如pH、温度、底物浓度、SoNar浓度等进行了优化.结果显示,该方法的检测限(LOD)为2.60μmol/L,定量限(LOQ)为8.67μmol/L,不同时间重复测定的标准偏差(RSD)为2.37%,乳酸质量浓度0~1000μmol/L范围内的Z因子值为0.82,表明该方法具备很好的稳定性和重复性.与目前常用的基于MTT-PMS的酶偶联分析法相比,本文所建立的乳酸检测法灵敏度更高,特异性更好,且生物兼容性更强.

抗衰老因子——NAD^+水解酶抑制因子78C

衰老（senescence）又称老化（aging）,指发育成熟个体随年龄增长结构与机能的退变过程;衰老常伴随运动机能下降、代谢紊乱、心功能下降等病理表现,与糖尿病、癌症等疾病发病密切相关。引发衰老的主要因素包括：自由基氧化应激、线粒体损伤、端粒缩短、基因组损伤、致瘤因素、衰老基因激活、理化损伤等。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide,NAD^＋）含量与衰老相关。

重组烟酰胺核糖激酶催化合成烟酰胺单核苷酸

烟酰胺单核苷酸广泛应用在食品、制药、美容等领域。它是NAD+的关键前体之一,其具有很大的抗衰老的潜力,受到科学界和工业界的广泛关注。本研究首先构建出表达烟酰胺核糖激酶的重组E.coli BL21(DE3)/pET28b-NRK,然后优化蛋白表达条件,再通过单因素实验优化酶催化反应条件。结果表明最佳催化反应条件为:30℃,pH 7.0,1 g/L粗酶液,6 g/L烟酰胺核糖,6 g/L ATP,4 g/L MgSO_(4),在10 mL的反应体系中振荡反应30 min,产物NMN可达6.384 g/L,收率为97.9%。本研究为酶法合成NMN的应用研究奠定了基础。

烟酰胺核糖对MPP^(+)诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护及机制研究

目的探究烟酰胺核糖(NR)对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP^(+))诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其潜在机制。方法取对数生长期的H-SY5Y细胞来完成实验,使用3 mmol/L MPP^(+)处理细胞构建帕金森病(PD)体外模型。细胞分为对照组(常规培养)、MPP^(+)组(MPP^(+)处理)、实验组(0.5 mmol/L NR和MPP^(+)处理)。细胞培养后检测细胞存活率、凋亡率,氧化应激水平[活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)],炎症水平[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)],烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+))水平等指标。结果与对照组比较,MPP^(+)组细胞凋亡率、ROS、MDA、TNF-α、IL-6水平均升高(P<0.05),细胞存活率、SOD、NAD^(+)水平均降低(P<0.05);与MPP^(+)组比较,实验组细胞凋亡率、ROS、MDA、TNF-α、IL-6水平均降低(P<0.05),细胞存活率、SOD、NAD^(+)水平均升高(P<0.05)。结论NR可以减轻MPP^(+)诱导的神经细胞损伤,其机制可能与补充NAD^(+)减轻细胞氧化应激和炎症反应有关。

荧光猝灭法研究NADH、Thio-NAD^+与3α-HSD的相互作用

采用荧光猝灭法研究了两种辅酶,还原型烟酰胺嘌呤二核苷酸(NADH)、氧化型硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Thio-NAD+)与3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD)的相互作用。研究结果表明,NADH和Thio-NAD+的加入均能使3α-HSD的内源性荧光发生猝灭,其猝灭机制均属于生成复合物的静态猝灭;25℃下NADH、Thio-NAD+与3α-HSD的结合常数分别为7.38×104、1.23×104L.mol-1;37℃下NADH、Thio-NAD+与3α-HSD的结合常数分别为4.69×104、9.74×103L.mol-1;NADH与3α-HSD的结合作用力为氢键和范德华力,Thio-NAD+与3α-HSD的结合作用力主要为静电引力和疏水作用力;NADH和Thio-NAD+均能使3α-HSD构象发生变化,导致色氨酸残基所处环境极性增大。

丁酸型发酵产氢的运行稳定性

着重对发酵法生物制氢反应系统的丁酸型发酵的运行稳定性进行了研究分析。结果表明,在有机负荷大于21kgCOD/m3·d的条件下,丁酸型发酵具有不稳定性,在负荷冲击下容易转变为丙酸含量较高的发酵类型,从而导致系统产氢能力的下降。分析认为,NADH/NAD+的平衡调节能力是影响系统运行稳定性的一个关键因素。在高负荷条件下,由于丁酸型发酵的产丁酸过程不能氧化过剩的NADH+H+,导致产乙酸过程生成的剩余NADH+H+在系统内大量积累,使反应系统难以达到氧化还原的平衡状态,最终影响了系统的稳定运行。