基于Thiol-Click-COOH固相萃取的蟾蜍二烯内酯的类分离研究

本文建立了蟾蜍二烯内酯类化合物类分离的固相萃取（SPE）新方法,通过新型材料Thiol-Click-COOH将蟾皮总样中的蟾蜍二烯内酯类化合物分成蟾毒配基类（AAUBs）和蟾蜍毒素类（AACBs）.首先,通过高效液相色谱（HPLC）以台阶等度洗脱方式对SPE方法的可行性进行评估,结果证明该方法可行;其次,通过200 mg的SPE小柱考察了添加剂、最大上样量及回收率.结果发现,添加少量醋酸有利于AACBs类化合物的保留,最大上样量为3%,回收率在96.6%~99.6%之间,相对标准偏差为1.6%.最后,运用该方法对蟾皮中的蟾蜍二烯内酯总样进行了类分离.淋洗液经高效液相色谱-质谱（HPLC-MS）分析,两类化合物被完全分离,共得到组分AAUBs色谱峰24个,组分AACBs色谱峰20个,比总样色谱峰多出17个,解决了两类成分在反相色谱上共流出的问题.该方法淋洗液为乙醇-甲酸体系,不含水和盐,后处理方便.