血清Trx1、VILIP-1对急性分水岭脑梗死患者预后不良的预测价值

目的探究血清硫氧还蛋白1(Trx1)、视锥蛋白样蛋白-1(VILIP-1)对急性分水岭脑梗死(ACWI)患者预后不良的预测价值。方法选取2019年12月至2022年12月在河北省邯郸市第一医院就诊的126例ACWI患者作为研究对象。收集所有患者的临床资料。检测所有患者甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇(TC)水平。根据随访90 d的改良Rankin量表评分将患者分为预后良好组和预后不良组。采用酶联免疫吸附试验检测ACWI患者血清Trx1、VILIP-1水平。采用多因素Logistic回归分析ACWI患者预后不良的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析Trx1、VILIP-1单独及2项指标联合检测对ACWI患者预后不良的预测价值。结果随访90 d结果显示,预后良好组患者85例,预后不良组患者41例。预后不良组大面积脑梗死患者比例,美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分,血清TG、TC、LDL-C水平均明显高于预后良好组,血清HDL-C水平明显低于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。预后不良组血清Trx1水平明显低于预后良好组,血清VILIP-1水平明显高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,NIHSS评分升高、VILIP-1水平升高是ACWI患者预后不良的危险因素(P<0.05),Trx1水平升高是ACWI患者预后不良的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清Trx1、VILIP-1单独检测预测ACWI患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.782、0.814,均低于2项指标联合检测预测ACWI患者预后不良的0.905(Z=2.487、2.350,P<0.05)。结论血清Trx1水平降低和VILIP-1水平升高与ACWI患者预后不良有关,二者均可辅助判断患者预后情况,且二者联合检测对ACWI患者预后不良的预测价值更高。

血清TSP-1、Trx1水平与脑梗死后认知功能障碍的关系

目的探讨血清血小板反应蛋白-1(TSP-1)、硫氧还蛋白1(Trx1)水平与脑梗死后认知功能障碍的关系。方法选取2021年6月至2022年12月该院收治的155例脑梗死患者(研究组)为研究对象,根据患者病情稳定后蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分分为认知功能正常组(97例)和认知功能障碍组(58例)。另选取该院同期150例体检健康者为对照组。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清TSP-1和Trx1水平。Spearman分析法分析血清TSP-1和Trx1水平与脑梗死患者美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分和MoCA评分的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清TSP-1和Trx1水平对脑梗死后认知功能障碍的预测价值。结果与对照组比较,研究组血清TSP-1和Trx1水平明显较高,差异有统计学意义(P<0.05)。与认知功能正常组比较,认知功能障碍组血清TSP-1和Trx1水平明显较高,差异有统计学意义(P<0.05)。与认知功能正常组比较,认知功能障碍组NIHSS评分明显较高,MoCA评分明显较低,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,脑梗死患者血清TSP-1和Trx1水平与NIHSS评分呈正相关(P<0.05),与MoCA评分呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清TSP-1水平单独预测脑梗死后认知功能障碍的曲线下面积(AUC)为0.834,灵敏度、特异度分别为72.41%、86.60%;血清Trx1水平单独预测脑梗死后认知功能障碍的AUC为0.851,其灵敏度、特异度分别为70.69%、85.57%;二者联合预测脑梗死后认知功能障碍的AUC为0.926,显著大于血清TSP-1单独预测的AUC(Z=3.050,P=0.002)和Trx1水平单独预测的AUC(Z=2.846,P=0.004)。结论血清TSP-1和Trx1水平在脑梗死患者中升高,且二者水平对脑梗死后认知功能障碍具有一定的预测价值。

脓毒症患者连续性血液净化治疗前后PCT Trx-1D-Lac表达及意义

目的:探讨脓毒症患者连续性血液净化(CBP)治疗前后血清降钙素原(PCT)、硫氧还蛋白-1(Trx-1)、D-乳酸(D-Lac)水平变化,分析其对CBP疗效的预测价值及临床意义。方法:选取2021年1月至2022年12月本院100例脓毒症患者作为观察组,另遵循1∶1配对原则,选取100例健康体检者作为对照组。统计两组血清PCT、Trx-1、D-Lac水平。观察组接受CBP治疗,依据治疗效果分为存活亚组、死亡亚组。比较不同亚组血清PCT、Trx-1、D-Lac水平、急性生理学与慢性健康状况Ⅱ评分(APACHEⅡ)及治疗前后其变化差值。Pearson分析各血清指标水平变化差值与APACHEⅡ评分相关性。采用受试者工作特征曲线(ROC)及曲线下面积(AUC)分析各血清指标水平变化差值对疗效的预测价值。采用卡普兰-迈耶(Kaplan-Meier)分析不同血清表达者28d内生存状况。结果:观察组血清PCT、Trx-1、D-Lac水平高于对照组(P<0.05);治疗1周后,死亡亚组血清PCT、Trx-1、D-Lac水平及APACHEⅡ评分高于存活亚组,且变化差值小于存活亚组(P<0.05);各血清指标水平变化差值与APACHEⅡ评分呈正相关(P<0.05);各血清指标水平变化差值联合预测CBP疗效的AUC分别大于单一指标预测、各血清指标联合预测(P<0.05);PCT、Trx-1、D-Lac水平变化差值高表达者死亡风险分别是低表达的4.828、3.600、2.318倍,且生存率高于低表达者(P<0.05)。结论:脓毒症患者CBP治疗前后血清PCT、Trx-1、D-Lac水平变化可反映病情严重程度,且与28d内生存情况密切相关,联合检测其变化差值对CBP疗效具有一定预测价值。

颅脑外伤患者围手术期Trx1、NGF、hs-CRP动态变化对预后的预测效能探讨

目的 探讨颅脑外伤患者围手术期硫氧还蛋白1(Trx1)、神经生长因子(NGF)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)动态变化对预后的预测效能。方法 选取2019年3月—2021年5月空军军医大学第二附属医院收治的105例颅脑外伤患者,根据预后不同分为预后不良组(28例)、良好组(77例),比较两组临床资料、术前、术后3 d、术后7 d Trx1、NGF、hs-CRP水平,应用Pearson及偏相关性分析各指标与格拉斯哥预后量表(GOS)评分关系,采用受试者工作特征曲线(ROC)及ROC下面积(AUC)分析术后7 d Trx1、NGF、hs-CRP预测预后效能。结果 不良组入院时APACHEⅡ评分与良好组比较,差异有统计学意义(P<0.05);不良组术后3 d、术后7 d Trx1、NGF低于良好组,hs-CRP高于良好组(P<0.05);术后3 d、术后7 d Trx1、NGF与GOS评分呈正相关,术后3 d、术后7 d hs-CRP与GOS评分呈负相关(P<0.05);将混杂因素控制后,术后7 d Trx1、NGF、hs-CRP仍与GOS评分相关(P<0.05);术后7 d Trx1、NGF联合hs-CRP预测预后的AUC为0.890,大于Trx1的0.771、NGF的0.753,hs-CRP的0.858,预测敏感度为71.43%,特异度为90.91%。结论 颅脑外伤患者术后Trx1、NGF降低及hs-CRP升高与预后不良有关,联合检测三者水平有望成为预测预后的一个可靠方案,为临床干预、决策、监护等提供参考。

Gly33的缺失和突变对hTrx-1抗氧化活性的影响

为探讨人硫氧还蛋白hTrx-1活性位点保守序列中Gly33残基在还原氧化性蛋白过程中是否必不可少,通过合成突变基因对hTrx-1的Gly33残基进行缺失和替换(G→A)。合成的突变基因随后在原核细胞中表达并进一步纯化及检测抗氧化活性,结果表明,无论是Gly33残基的缺失还是突变为Ala,突变的hTrx-1均能在原核细胞中高效表达,暗示2种突变型hTrx-1均能形成“Trx折叠”结构。抗氧化活性检测表明Gly33残基缺失的情况下,其抗氧化能力有所下降,当Gly33突变为Ala时,其抗氧化能力大幅下降到接近失去抗氧化能力。推测Trx-1活性中心保守氨基酸残基的改变影响了活性中心区域的几何构象,从而导致底物蛋白难以从空间上靠近。参与形成二硫键巯基的含量检测结果表明,突变型hTrx-1中形成二硫键巯基的含量明显低于野生型hTrx-1中形成二硫键巯基的含量,推测突变型hTrx-1的Cys32与Cys35形成二硫键的能力受到影响。

精胺氧化酶靶向调控硫氧还蛋白还原酶1促进结肠癌恶性进展

目的探讨精胺氧化酶(spermine oxidase,SMOX)靶向调控硫氧还蛋白还原酶1(thioredoxin reductase 1,TR1)对结肠癌恶性进展的影响。方法收集2018年9月至2019年6月就诊于南京市第一医院的30例结肠癌患者的结肠癌组织及其癌旁组织。采用免疫组织化学染色检测组织中的SMOX表达。采用Western blot实验检测结肠癌细胞株(HCT116、SW480、DLD-1、SW620、Caco-2、HCT-15、T84和LS123)和正常结肠细胞株NCM460的SMOX表达。利用基因表达谱互作分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)网站查询SMOX在结肠癌组织与癌旁组织中的表达情况和SMOX表达水平与患者总生存的关系。采用Western blot实验检测上述细胞和组织中代谢产物亚精胺合成酶的水平。利用2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)结合流式细胞术和组织免疫荧光实验分别检测结肠细胞和组织中代谢副产物活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。选取SMOX表达水平最高的结肠癌细胞株HCT116和SW480为实验对象,构建慢病毒载体,用PLKO.1-puro-shCtrl、PLKO.1-puro-shSMOX、PLKO.1-puro-shSMOX+pcDNA3.1和PLKO.1-puro-shSMOX+pcDNA3.1-TR1分别转染细胞,分别为shCtrl组、shSMOX组、shSMOX+pcDNA3.1组和shSMOX+TR1组。Western blot实验检测HCT116和SW480细胞shCtrl组和shSMOX组SMOX与TR1的表达情况,以及HCT116细胞shSMOX+pcDNA3.1组和shSMOX+TR1组的TR1表达水平。利用细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测细胞增殖活力。碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染结合流式细胞术检测肿瘤细胞周期变化。PI/异硫氰酸荧光素-膜连蛋白(PI/fluorescein isothiocyanate-Annexin V,PI/FITC-Annexin V)双染结合流式细胞术检测细胞凋亡/坏死情况。Transwell体外侵袭实验分析细胞侵袭能力。shCtrl组、shSMOX组、shSMOX+pcDNA3.1组和shSMOX+TR1组的HCT116细胞稀释至浓度为1×107个/mL的细胞悬液分别向裸鼠右侧腋窝皮下注射0.2 mL细胞悬液,建立裸鼠结肠癌移植瘤模型。4周后处死裸鼠,分离组织,剥取肿瘤称重。运用免疫组织化学染色检测裸鼠结肠肿瘤组织中Ki-67阳性细胞数。结果SMOX在8种结肠癌细胞株和结肠癌组织中的表达水平均高于正常结肠细胞株和癌旁组织,且与不良预后有关(均P<0.05)。与正常结肠细胞和癌旁组织比较,8种结肠癌细胞和结肠癌组织中的代谢产物亚精胺合成酶和ROS水平随SMOX的高表达同步升高(均P<0.05)。与shCtrl组比较,shSMOX组G_(0)/G_(1)期细胞数目增多,PI/Annexin V双阳性细胞数目增加,细胞增殖活性降低,侵袭数量减少,SMOX和TR1表达水平降低(均P<0.05)。与shSMOX组和shSMOX+pcDNA3.1组比较,shSMOX+TR1组TR1表达水平升高,S期细胞数目增多,PI/Annexin V双阳性细胞数目减少,细胞增殖活性升高(均P<0.05)。裸鼠结肠癌移植瘤模型显示,注射后14 d,与shCtrl组比较,shSMOX组和shSMOX+pcDNA3.1组肿瘤体积和重量均降低,结肠肿瘤组织中Ki-67阳性细胞数减少,而shSMOX+TR1组肿瘤体积、重量和结肠肿瘤组织中Ki-67阳性细胞数则较shSMOX+pcDNA3.1组增加(均P<0.05)。结论SMOX在结肠癌细胞和组织中表达上调,可能通过靶向提高TR1的表达促进细胞周期运转,抑制细胞凋亡,促进细胞增殖和侵袭能力及肿瘤生长,进而促进结肠癌恶性进展。

血清TXNIP、NRP1水平对脓毒症患者发生急性肾损伤的预测价值

目的:探讨硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)、神经纤毛蛋白-1(NRP1)对脓毒症患者发生急性肾损伤(AKI)的预测价值。方法:选取2019年4月-2021年4月在本院住院的160例脓毒症患者为研究对象,以患者7 d内是否发生AKI将患者分为AKI组56例和非AKI组104例,再对AKI患者进行分组,分为AKIⅠ期、AKIⅡ期、AKIⅢ期。酶联免疫吸附法血清TXNIP、NRP1水平;多因素Logistic回归分析脓毒症患者发生AKI的可能影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线评估血清TXNIP、NRP1水平检测对脓毒症患者发生AKI的预测价值。结果:AKI组SOFA评分、Scr水平、APACHEⅡ评分及PCT水平均显著高于非AKI组,eGFR水平显著低于非AKI组(P<0.05)。AKI组TXNIP水平显著高于非AKI组,且随AKI分期增加而显著增加(P<0.05);NRP1水平显著低于非AKI组,且随AKI分期增加而显著降低(P<0.05)。AKI患者血清TXNIP水平与SOFA评分、Scr、APACHEⅡ评分均呈正相关(r=0.342、0.361、0.335,P<0.05),与eGFR呈负相关(r=-0.495,P<0.05);血清NRP1水平与SOFA评分、Scr、APACHEⅡ评分均呈负相关(r=-0.310、-0.327、-0.306,P<0.05),与eGFR呈正相关(r=0.561,P<0.05)。Logistic回归分析显示,高水平TXNIP、Scr、SOFA评分是脓毒症患者并发AKI的危险因素(P<0.05),高水平NRP1是脓毒症患者并发AKI的保护因素(P<0.05)。ROC曲线显示,TXNIP、NRP1预测AKI的AUC为0.737、0.720,二者联合预测AKI的AUC为0.929,显著高于二者单独预测(Z_(联合VSTXNIP)=4.642、P=0.004;Z联合VS NRP1=4.929、P=0.025),其敏感度、特异度分别为90.79%、85.29%。结论:脓毒症并发AKI患者血清中TXNIP高表达,NRP1低表达,与AKI严重程度有关,且二者联合对脓毒症并发AKI具有一定的预测价值。

姜黄素调控Trx-1/TXNIP复合体防治对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的研究

为了探讨姜黄素(CUR)对对乙酰氨基酚(APAP)诱导小鼠肝脏损伤的保护作用及机制,试验将60只ICR小鼠随机分成正常对照组、模型组、N-乙酰半胱氨酸组(按体重150 mg/kg灌胃N-乙酰半胱氨酸)、姜黄素低剂量组(按体重50 mg/kg灌胃CUR)、姜黄素中剂量组(按体重100 mg/kg灌胃CUR)和姜黄素高剂量组(按体重200 mg/kg灌胃CUR),对模型组、N-乙酰半胱氨酸组及姜黄素低、中、高剂量组连续灌胃10 d,然后一次性按体重300 mg/kg腹腔注射APAP诱导小鼠急性肝损伤,24 h后,摘眼球取血并处死各组小鼠,计算小鼠肝脏指数,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,以及肝脏组织中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,活性氧(ROS)水平;并取肝脏组织进行H.E.染色,观察小鼠肝脏病理组织学变化。通过RT-qPCR方法检测肝脏中Trx-1/TXNIP/NLRP3通路mRNA相对表达量。结果表明:与正常对照组比较,模型组小鼠的肝脏指数,血清ALT、AST、LDH活性,肝脏组织MDA含量、ROS水平显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),肝脏组织GSH含量和CAT、SOD活性显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),Trx-1 mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01),TXNIP、NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的mRNA相对表达量极显著增加(P<0.01)。与模型组相比,姜黄素低中高剂量组小鼠血清ALT、AST、LDH活性,肝脏指数和肝脏组织MDA、ROS含量极显著降低(P<0.01),肝脏组织CAT、SOD活性和GSH含量显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01),Trx-1的mRNA相对表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),TXNIP、NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的mRNA相对表达量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。模型组肝脏组织肝索紊乱,肝细胞大量坏死,核溶解,肝窦炎性浸润和充血;姜黄素各剂量组肝索结构基本正常,肝细胞坏死减少。说明姜黄素通过抗氧化和抗炎作用对APAP诱导的小鼠急性肝损伤发挥保护作用,其机制可能与Trx-1表达量增加和TXNIP表达量降低有关。

血清Pref-1、Trx1与2型糖尿病患者认知功能障碍的关系

目的 探讨血清前脂肪细胞因子1(preadipocyte 1,Pref-1)、硫氧还蛋白1(thioredoxin 1,Trx1)与2型糖尿病患者认知功能障碍的关系。方法 选取2019-08/2022-08月作者医院收治的116例2型糖尿病患者作为研究组,另外选取同时期来作者医院体检的150例健康人作为健康组。根据2型糖尿病患者是否合并认知功能障碍分为非认知障碍组(n=84)和认知障碍组(n=32)。采用酶联免疫吸附法检测血清Pref-1、Trx1水平;采用Pearson相关分析探讨Pref-1、Trx1与认知功能的相关性;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线评估血清Pref-1、Trx1对2型糖尿病患者认知功能障碍的预测价值;采用多因素Logistic回归分析探讨2型糖尿病患者认知功能障碍的影响因素。结果 健康组血清Pref-1水平高于研究组,Trx1水平低于研究组(P均<0.01)。单因素分析显示,非认知障碍组病程、空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)、糖化血红蛋白、空腹胰岛素、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C)与认知障碍组比较差异有统计学意义(P均<0.05)。非认知障碍组血清Pref-1水平高于认知障碍组,Trx1水平低于认知障碍组(P均<0.01)。相关分析显示,血清Pref-1与蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment, MoCA)评分呈正相关(r=0.416,P<0.001),血清Trx1与MoCA评分呈负相关(r=-0.325,P<0.001)。多因素回归分析显示,病程≥7年(OR=2.261,95%CI:1.552~3.295)、糖化血红蛋白≥7.32%(OR=2.092,95%CI:1.467~2.982)、Pref-1<1.43μg/L(OR=3.031,95%CI:1.943~4.730)、Trx1≥5.62 ng/ml(OR=2.568,95%CI:1.681~3.921)是2型糖尿病患者认知功能障碍的影响因素。血清Pref-1、Trx1预测2型糖尿病患者认知功能障碍的AUC为0.834(95%CI:0.783~0.885)、0.775(95%CI:0.724~0.826),二者联合检测的AUC最高为0.916(95%CI:0.855~0.957)。结论 血清Pref-1降低、Trx1升高与2型糖尿病患者认知功能障碍有关,二者可作为评估2型糖尿病患者认知功能障碍的生物学指标,有临床推广应用的价值。

血清CHI3L1、TXNIP水平对多囊卵巢综合征患者妊娠结局的预测价值

目的探究血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)水平对多囊卵巢综合征(PCOS)患者妊娠结局的预测价值。方法选取2021年6月至2023年1月临清市人民医院诊治的112例PCOS患者作为PCOS组,另选取同时间段同院孕检的健康孕妇105例作为对照组。比较PCOS组与对照组、PCOS组不同妊娠结局患者的临床指标,采用Pearson检验分析血清CHI3L1、TXNIP表达与孕酮水平、新生儿体重的相关性,采用多因素Logistic回归分析PCOS患者妊娠结局的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CHI3L1、TXNIP表达对PCOS患者妊娠结局的预测价值。结果妊娠结局不良组(n=43)的孕妇剖宫产率及黄体生成素、CHI3L1、TXNIP、孕酮、空腹血糖、空腹胰岛素水平均高于妊娠结局良好组(n=69)和对照组(P<0.05),新生儿体重低于妊娠良好组和对照组(P<0.05)。PCOS患者血清CHI3L1、TXNIP表达水平与孕妇孕酮水平均呈正相关(P<0.05)。剖宫产率及新生儿体重、黄体生成素、CHI3L1、TXNIP、孕酮、空腹血糖、空腹胰岛素水平均为PCOS患者妊娠结局的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清CHI3L1、TXNIP单独和联合预测PCOS发生的曲线下面积(AUC)分别为0.822、0.844、0.915,联合诊断高于CHI3L1、TXNIP任意单独诊断(P<0.05)。结论PCOS患者CHI3L1、TXNIP水平升高,两者联合对PCOS患者妊娠结局的预测价值更高。

超声联合血清TXNIP和Sirt1水平对妊娠期高血压孕妇胎儿宫内缺氧预测价值

目的探讨超声联合血清硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)和沉默信息调节因子1(Sirt1)表达水平对妊娠期高血压(HDP)孕妇胎儿发生宫内缺氧的预测价值。方法将2021年5月至2023年6月北京市平谷区医院就诊的169例HDP孕妇纳入研究,其中发生宫内缺氧34例患者为宫内缺氧组,其他125例患者为正常组。采用皮尔逊法分析评估血清TXNIP、Sirt1表达水平与阻力指数(RI),搏动指数(PI)以及收缩期峰值血液流速比舒张末期血液流速(S/D)的相关性,使用受试者工作特征(ROC)曲线分析超声联合血清TXNIP、Sirt1表达水平对HDP孕妇胎儿宫内缺氧预测价值。结果宫内缺氧组Apgar评分低于正常组(t=8.961,P<0.001),宫内缺氧组RI、PI及S/D值较于正常组明显升高(t=5.694,6.525和7.678,P<0.001),两组血清TXNIP和Sirt1表达水平存在显著性差异(t=6.061和8.161,P<0.001),血清TXNIP表达水平与RI、PI及S/D值呈显著正相关(r=0.553,0.671和0.609,P<0.001),血清Sirt1表达水平与RI、PI及S/D值呈负相关(r=-0.546,-0.591和-0.761,P<0.001);RI、PI、S/D及血清TXNIP、Sirt1独立预测HDP孕妇胎儿宫内缺氧的曲线下面积(AUC)分别为0.790、0.750、0.836、0.768、0.873,联合预测的AUC为0.964,超声联合血清TXNIP、Sirt1预测优于各自单独预测(Z_(联合-RI)=3.610、Z_(联合-PI)=3.434,Z_(联合-TXNIP)=4.608,P均<0.001;Z_(联合-S/D)=2.528,Z_(联合-Sirt1)=2.514,P=0.011和0.012)。结论超声联合血清TXNIP、Sirt1表达对HDP孕妇胎儿宫内缺氧具有良好的预测价值。

姜黄素通过抑制TXNIP/TRX-1/GPX4通路介导的铁死亡减轻脓毒症小鼠肺损伤

目的探究姜黄素(Cur)是否通过调控TXNIP/TRX-1/GPX4通路抑制铁死亡减轻脓毒症肺损伤。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为Sham组、脓毒症(盲肠结扎穿孔术,CLP)组、CLP+各浓度Cur(50、100和200 mg/kg)组、CLP+Cur(200 mg/kg)+TRX-1抑制剂PX-12(25 mg/kg)组,10只/组,检测各组小鼠肺组织炎症因子及铁死亡关键因子MDA、MPO、GSH水平。Beas-2B细胞分为Con组、脂多糖组(LPS,1μg/mL)、LPS+各浓度Cur(2.5、5、10μmol/L)及LPS+Cur(10μmol/L)+PX-12(5μmol/L)组,检测MDA和Fe^(2+)水平,DHE染色评估ROS变化。Western blotting检测肺组织和Beas-2B细胞TXNIP、TRX-1、GPX4和X-CT蛋白表达水平。结果与Sham组相比,CLP组小鼠肺损伤严重,IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA、MPO含量增加,GSH含量下降(P<0.01);与CON组相比,LPS组MDA、Fe^(2+)、ROS水平升高;CLP组肺组织和LPS组Beas-2B细胞TXNIP蛋白表达增加,TRX-1、GPX4及X-CT蛋白表达减低(P<0.01);与CLP组相比,CLP+Cur各浓度组肺损伤减轻,炎症因子和脂质过氧化因子含量降低,GSH水平升高;与LPS组相比,LPS+Cur各浓度组Fe^(2+)、MDA和ROS水平下降(P<0.05);TXNIP蛋白表达降低,TRX-1、GPX4及X-CT蛋白表达增加(P<0.01)。PX-12干预后,取消了Cur对脓毒症肺组织和Beas-2B细胞的保护作用(P<0.05)。结论姜黄素通过升高TRX-1、GPX4,降低TXNIP抑制铁死亡,减轻脓毒症肺损伤。

血清TRX-1、NLRP3表达水平与儿童功能性消化不良的相关性研究

目的探讨血清硫氧还蛋白1(TRX-1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)表达水平与儿童功能性消化不良(FD)的相关性。方法选取2022年5月至2023年6月就诊于石家庄市妇幼保健院的FD患儿45例为FD组;另选取健康儿童40例为对照组。采用实时荧光定量PCR测定血清TRX-1、NLRP3 mRNA表达水平,Spearman相关分析血清TRX-1 mRNA、NLRP3 mRNA表达水平与FD相关评分的相关性,多因素Logistic回归分析FD发生的影响因素。结果FD组血清TRX-1 mRNA、NLRP3 mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05)。轻度组、中度组FD患儿血清TRX-1 mRNA、NLRP3 mRNA表达水平均低于重度组,轻度组TRX-1 mRNA、NLRP3 mRNA水平均低于中度组(P<0.05)。血清TRX-1 mRNA、NLRP3 mRNA表达水平与上腹痛、腹胀或上腹不适、恶心呕吐均呈正相关(P<0.05),与早饱、食欲不振或食量减少、嗳气均无相关性(P>0.05)。血清NLRP3 mRNA表达水平与总分呈正相关(P<0.05),血清TRX-1 mRNA表达水平与总分无相关性(P>0.05)。血清TRX-1 mRNA、NLRP3 mRNA水平升高是FD发生的独立危险因素(P<0.05)。结论血清TRX-1、NLRP3表达水平可能在FD的发病过程中发挥着重要作用。

血清TXNIP、sTREM-1、BMP-7水平变化与原发性肾病综合征患者疾病转归的关系

目的 探讨血清硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)、可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)水平变化与原发性肾病综合征(PNS)患者疾病转归的相关性。方法 选取医院2019年4月至2022年4月收治的91例PNS患者为研究组,同期91例健康体检者为对照组,比较两组入院时血清TXNIP、sTREM-1、BMP-7、肾功能指标[尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿酸(UA)]水平,分析血清各指标水平与肾功能的相关性;比较复发和未复发患者(入院时、治疗3个月、6个月后)血清各指标水平;分析治疗后血清各指标水平联合预测PNS患者复发的价值,分析各指标不同水平患者复发危险度。结果 入院时研究组血清TXNIP、sTREM-1高于对照组,血清BMP-7低于对照组(P<0.05);入院时研究组血清BUN、Scr、UA高于对照组(P<0.05);入院时血清TXNIP、sTREM-1水平与BUN、Scr、UA水平均呈正相关,血清BMP-7水平与BUN、Scr、UA水平均呈负相关(P<0.05);入院时、治疗3个月、6个月后复发患者血清TXNIP、sTREM-1水平高于未复发患者,BMP-7水平低于未复发患者(P<0.05);治疗3、6个月后血清各指标联合预测PNS患者复发价值大于单独预测;治疗3、6个月后血清各指标高水平患者复发危险度是低水平的1.906、2.114、0.581倍/2.571、3.222、0.480倍。结论 血清TXNIP、sTREM-1、BMP-7水平与PNS患者病情程度密切相关,可作为评估PNS病情转归的有效指标。

TRX1与JAB1在急性髓系白血病中的表达及其相关性

目的探讨硫氧还蛋白1(TRX1)和c-Jun激活区结合蛋白1(JAB1)在白血病各组中的表达,及TRX1水平在急性髓系白血病(AML)各组中的表达及其临床意义。方法应用RT-PCR及Western blot的方法对白血病患者TRX1和JAB1的表达进行检测,比较各组之间的差异;进一步分析AML患者其基因表达阳性率与外周血白细胞计数的关系,并采用ELISA方法检测以上血清样本的TRX1水平。结果在白血病患者中TRX1和JAB1基因和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),相关分析显示AML初发和复发病例中TRX1和JAB1表达相关程度高,而且高表达的TRX1和JAB1与外周血白细胞计数有关(P<0.05);ELISA检测外周血TRX1在AML的复发组高于初发组和对照组,初发组高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 TRX1和JAB1之间呈正向关联,与AML的发生及病情进展有密切关系。

右美托咪定通过Trx1/AMPK通路减轻心肌缺血再灌注损伤中的氧化应激

目的探讨右美托咪定在心肌缺血再灌注损伤中抗氧化应激可能的分子机制。方法将30只大鼠随机分为3组,假手术组(Sham组),缺血再灌注组(I/R组),右美托咪定预处理组(Dex组),测定心肌组织活性氧(ROS)水平,TUNEL检测细胞凋亡,Western blot检测Trx1/AMPK信号分子表达。结果I/R组大鼠在再灌注期间平均动脉压(MAP)较假手术组降低,心肌ROS水平和细胞凋亡较假手术组显著增加,同时伴有硫氧还蛋白-1(Trx1)降解和AMP激活的蛋白激酶(AMPK)磷酸化增加。而右美托咪定预处理能够改善再灌注后MAP,减少了Trx1降解,并进一步增强了AMPK的磷酸化水平,降低ROS水平,显著减少细胞凋亡。结论右美托咪定可能通过Trx1/AMPK通路减轻心肌缺血再灌注中的氧化应激,改善心肌缺血再灌注损伤。

硫氧还蛋白-1(Trx1)氧化还原状态的检测

硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx1)是一种广泛存在于生物体内的氧化还原调节蛋白,其氧化还原状态的变化是细胞内发挥氧化还原调控作用的重要过程.本文建立了Trx1氧化还原状态的检测方法—氧化还原蛋白免疫印迹法(redox Western blot),即通过碘乙酸(IAA)标记Trx1,根据蛋白所带负电荷的不同,达到分离蛋白氧化与还原状态的目的,并根据能斯特方程计算出相应的氧化还原电势.本方法是在蛋白免疫印迹(Western blot)的基础上建立的,具有低成本、易操作的特点.实验中分别采用H2O2和DTT处理样本,利用此方法检测了细胞裂解液中、细胞内及过表达Trx1氧化还原电势的变化;并检测了HEK293细胞不同生长时期Trx1的氧化还原状态.

姜黄素通过调控Trx-1/TXNIP/NLRP3通路减轻对乙酰氨基酚诱导的大鼠急性肾损伤

目的探究姜黄素(curcumin,CUR)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的大鼠急性肾损伤的保护作用及机制。方法48只雄性SD大鼠随机均分为正常组、模型组、阳性药NAC组、CUR低(50 mg/kg)、中(100 mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量组。NAC及CUR灌胃给药10 d后,一次性灌胃给予2 g/kg APAP建立急性肾损伤模型,造模24 h后,取血并分离大鼠,计算肾指数;检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平;HE染色评价大鼠肾病理变化;检测大鼠肾组织谷胱甘肽(GSH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)水平;Western blot检测大鼠肾组织Trx-1、TXNIP、NLRP3炎症小体等蛋白的表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠肾指数显著增加(P<0.01),血清Cr、BUN水平显著升高(P<0.01),病理切片显示大鼠肾组织出现明显的损伤,大鼠肾组织中GSH、T-SOD、CAT的活性显著降低(P<0.01),MDA的含量显著升高(P<0.01),大鼠肾组织中Trx-1的表达明显下调(P<0.05),TXNIP、NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1、mature IL-1β蛋白的表达明显上调(P<0.01)。与模型组相比,CUR中、高剂量组肾指数显著降低(P<0.01),病理损伤改善,血清Cr、BUN水平显著降低(P<0.01),肾组织中GSH、T-SOD、CAT活性显著升高,MDA含量显著降低(P<0.05或P<0.01),Trx-1的表达明显上调(P<0.05或P<0.01)、TXNIP、NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1、mature IL-1β蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论姜黄素预防性给药通过调控Trx-1/TXNIP/NLRP3通路减轻APAP诱导的大鼠急性肾损伤。

颅脑损伤患者血清miR-122-5p、Trx1的水平变化及临床意义

目的探讨颅脑损伤患者血清微小RNA(miRNA)-122-5p、硫氧还蛋白1(Trx1)的水平变化及临床意义。方法选取盘锦市中心医院2019年1月至2021年1月收治的133例颅脑损伤患者为颅脑损伤组,根据拉斯哥昏迷量表(GCS)分为轻型组(n=59)、中型组(n=50)、重型组(n=24),另选取同期84例体检健康者为对照组,采用qRT-PCR检测血清miR-122-5p、采用酶联免疫吸附法检测血清Trx1水平。比较各组血清miR-122-5p、Trx1水平,Spearman相关性分析颅脑损伤患者血清miR-122-5p、Trx1水平与拉斯哥昏迷量表(GCS)评分的相关性,多因素Logistics回归分析颅脑损伤患者不良预后影响因素,ROC曲线分析血清miR-122-5p、Trx1水平对颅脑损伤患者不良预后的预测价值。结果颅脑损伤组血清miR-122-5p水平明显低于对照组,Trx1水平明显高于对照组(P<0.05)。轻型组、中型组、重型组随着昏迷程度加重,血清miR-122-5p水平逐渐降低,,Trx1水平逐渐提升(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,颅脑损伤患者GCS评分与血清miR-122-5p呈正相关,与Trx1水平呈负相关(P<0.05)。多因素Logistics回归分析显示,多发脑挫裂伤(OR=1.058,95%CI:0.897~2.128)、合并脑疝(OR=1.503,95%CI:0.237~2.554)、Trx1(OR=1.597,95%CI:1.063~2.399)为颅脑损伤患者预后不良独立危险因素,GCS评分(OR=0.496,95%CI:0.338~0.728)、miR-122-5p(OR=0.306,95%CI:0.211~0.507)为独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线显示,miR-122-5p+Trx1(AUC=0.932,95%CI:0.875~0.968)预测颅脑损伤患者预后不良的AUC明显大于miR-122-5p(AUC=0.827,95%CI:0.752~0.887)、Trx1(AUC=0.815,95%CI:0.739~0.877)预测。结论颅脑损伤患者血清miR-122-5p水平明显降低,Trx1水平明显提升,与病情严重程度和预后相关,联合检测能提升预后不良预测价值。

基于Trx2/ASK1信号通路探讨补骨颗粒对软骨细胞凋亡的调控机制

目的:观察补骨颗粒对软骨细胞凋亡及对Trx2/ASK1/Caspase-3表达的影响,从而探讨补骨颗粒对软骨细胞凋亡影响机制,为进一步研究补骨颗粒防治骨关节炎奠定实验基础。方法:将20只SD大鼠随机分为空白对照组,补骨颗粒低、中、高剂量组,每组5只。适应性喂养7 d,空白对照组给予蒸馏水2 m L·kg^(-1)灌胃,补骨颗粒低、中、高剂量组给予补骨颗粒1.54 g·kg^(-1)、3.08 g·kg^(-1)、6.16 g·kg^(-1)灌胃。干预14 d后,抽取血液经离心获得血清。通过酶联免疫吸附试验检测血清中Trx2、ASK1、Caspase-3表达量,采用MTT法检测血清干预后的细胞增殖活性,采用流式细胞仪检测血清干预后的软骨细胞凋亡率。结果:与空白对照组比较,补骨颗粒低、中、高剂量组Trx2、ASK1与Caspase-3含量明显减少,差异均有统计学意义(P <0.05);与补骨颗粒中剂量组比较,补骨颗粒低剂量组和高剂量组Trx2与ASK1含量明显增多,补骨颗粒低剂量组Caspase-3含量明显增多,差异均有统计学意义(P <0.05)。与空白对照组比较,补骨颗粒低、中、高剂量组OD值明显升高(P <0.05);补骨颗粒低、中、高剂量组组间比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。流式细胞仪检测发现,不加入硝普钠时(对照组1)软骨细胞的凋亡率最低为4.25%,加入硝普钠后(空白对照组1)软骨细胞的凋亡率变为46.86%,补骨颗粒低剂量组1软骨细胞的凋亡率(30.15%)高于补骨颗粒中剂量组1(27.77%)和高剂量组1(27.41%)。结论:补骨颗粒将会调控Trx2表达,并且不同剂量补骨颗粒将会通过Trx2-ASK1解离度调控Caspase-3活化程度而影响软骨细胞的凋亡,这将有助于进一步认识补骨颗粒对骨关节炎防治过程。