益气温阳护卫汤对哮喘大鼠Thl7/Treg细胞及细胞因子的影响

目的研究益气温阳护卫汤对哮喘大鼠Thl7/Treg细胞及其细胞因子的影响。方法将144只SPF级雌性SD大鼠随机分为正常对照组(A组),模型组(B组),益气温阳护卫汤低、中、高剂量组(C、D、E组),地塞米松组(F组)。除A组外其他组卵蛋白(OVA)氢氧化铝溶液腹腔致敏,并每天雾化吸入OVA激发,致敏后第16天开始,每天雾化吸入OVA前1h,按照1mg/kg剂量的地塞米松灌服F组,1g/ml、2g/ml、4g/ml剂量的益气温阳护卫汤分别灌服C、D、E组,A组雾化予0.9%氯化钠溶液代替,各组分别持续1、2、4周3个时间段,各时间段结束时,每组分别处死大鼠8只,检测BALF中Thl7、Treg细胞比例、Thl7/Treg比值及肺组织IL-17、IL-17A和IL-10表达情况。结果与正常对照组比较,各时间点模型组Thl7细胞比例、IL-17蛋白表达、IL-17A mRNA表达水平均上调,Treg细胞比例、IL-10蛋白表达、IL-10 mRNA表达水平均下调,Th17/Treg比值明显升高(P<0.05);与模型组比较,各时间点地塞米松组、中高剂量组Thl7细胞比例、IL-17蛋白表达、IL-17A mRNA表达水平明显下降(P<0.05),Treg细胞比例、IL-10蛋白表达、IL-10mRNA表达水平明显升高(P<0.05),Th17/Treg比值明显下降(P<0.05),高剂量组比中剂量组更明显(P<0.05)。Thl7细胞比例与IL-17A mRNA相对表达水平呈正相关,Treg细胞比例与IL-10 mRNA相对表达水平呈正相关。结论益气温阳护卫汤可能通过干预Thl7/Treg细胞失衡及细胞因子IL-17、IL-17A和IL-10表达,使Thl7/Treg细胞趋于平衡而达到控制哮喘气道炎症的目的。

检测外周血T淋巴细胞亚群、Th17和Treg细胞在初诊多发性骨髓瘤患者中的临床意义研究

目的探讨初诊多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中T淋巴细胞亚群表达特点,以及辅助性T细胞17(Thl7)和CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞(Treg细胞)比率的平衡关系,分析其在MM发病中的临床意义。方法检测30例初诊的MM患者(病例组)及20例健康志愿者(对照组)外周血中总T细胞(CD3^+)、辅助性T细胞/诱导T细胞(CD3^+CD4^+)、抑制性T细胞/细胞毒性T细胞(CD3^+CD8^+)、(CD3^+CD4^+)/(CD3^+CD8^+)的比值;以及Thl7和Treg细胞各占的比率、Th17细胞/Treg比值,比较分析MM患者与对照组的差异。结果与对照组相比,病例组患者的抑制性T细胞/细胞毒性T细胞(CD3^+CD8^+)比例较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05);病例组患者的(CD3^+CD4^+)/(CD3^+CD8^+)比值较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);病例组患者外周血Th17细胞的比率为(5.9±1.9)%,与对照组(4.0±0.9)%相比增高,差异有统计学意义(P<0.05);病例组Treg细胞比率为(1.2±0.3)%,与对照组(2.1±0.4)%相比,比值降低,差异有统计学意义(P<0.05);病例组Th17/Treg细胞比值较对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MM患者体内存在外周血T细胞亚群的紊乱,Thl7细胞比率升高和Treg细胞比率降低所致的Thl7/Treg细胞比例失衡,该免疫失衡可能在MM的发生、发展中发挥一定作用,并对预后的判断有一定的指导价值。

射干麻黄汤对哮喘小鼠气道重塑及Th17/CD4^+CD25^+ Treg细胞的影响及机制研究

目的探讨射干麻黄汤干预哮喘小鼠后Th17/CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+Treg),TGF-β1蛋白表达的变化及其与气道重塑之间的关系。方法 24只Balb/c小鼠随机分为3组,空白组(A组)、模型组(B组)、射干麻黄汤组(C组),每组8只。建立慢性哮喘小鼠模型后,分别给予不同干预方式,观察雾化8周后肺组织气道重塑程度并检测TGF-β1蛋白表达、Th17细胞及CD4^+CD25^+Treg细胞占CD4^+T细胞百分比。结果B、C组激发8周小鼠支气管管壁厚度、平滑肌厚度均较A组厚(P<0.05),但C组较B组薄(P<0.05)。B、C组相较于A组,Th17细胞占CD4^+T细胞的百分比增高,CD4^+CD25^+Treg细胞占CD4^+T细胞的百分比降低(P<0.05);C组较B组Th17细胞占CD4^+T细胞的百分比增高程度减少(P<0.05),CD4^+CD25^+Treg细胞占CD4^+T细胞百分比降低程度减小(P<0.05)。B组TGF-β1蛋白表达与A组比较均增加(P<0.05),而C组TGF-β1蛋白表达与A组比较差别无统计学意义(P>0.05)。C组TGF-β1蛋白表达较B组TGF-β1蛋白降低(P<0.01)。结论射干麻黄汤可能通过抑制TGF-β1蛋白表达,减少哮喘小鼠Th17细胞数,增加CD4^+CD25^+Treg细胞数,进而调节Th17/CD4^+CD25^+Treg的免疫紊乱从而延缓气道重塑。

恩替卡韦对慢性乙型肝炎患者Th17/Treg型细胞因子影响的研究进展

世界卫生组织报告全球约有20亿人曾感染乙肝病毒(HBV),其中2.4亿人为慢性HBV感染者,每年约有65万人死于HBV感染所致的肝功能衰竭、肝硬化和肝细胞癌。在乙型肝炎患者中,HBV持续存在和复制与机体细胞免疫作用密切相关,其结果将导致肝组织炎症持续、反复或慢性化,甚至发展为肝硬化、肝癌。而CD4+T细胞在其细胞免疫作用机制中起到了核心作用,其中CD4+T细胞的两个重要细胞亚群,Th17/Treg型细胞所分泌的主要细胞因子IL-17、IL-21、IL-35、TGF-β、IL-10等在其炎症反应、抗感染免疫、组织细胞浸润等方面起到了重要作用。恩替卡韦作为慢性乙型肝炎抗病毒治疗的主要用药,它在抑制HBV复制,改善生化指标和组织学等方面有了较大进展,对慢性乙型肝炎治疗方面显示出了较大的潜力,但目前关于恩替卡韦对慢性乙型肝炎患者外周血清Th17/Treg型细胞因子影响的报道较少,本文就恩替卡韦在慢性乙型肝炎抗病毒治疗中对Th17/Treg型细胞因子影响的研究进展进行综述。

Th17/Treg相关细胞因子在肠白塞病发病机制中的作用

目的通过检测血清Th17/Treg相关细胞因子水平,探讨Th17/Treg在肠白塞病(Behcet′s disease,BD)发病机制中的作用。方法参照1987年日本学者制定的BD诊断标准和2009年韩国学者提出的肠BD诊断标准,共入选肠BD32例,同时选择21例性别、年龄匹配的健康志愿者作为对照。疾病活动度采用2011年韩国学者制定的肠BD活动性评分系统(DAIBD)。采用ELISA法检测血清IL-17、IL-23、IL-35和IL-10。应用SPSS 17.0软件统计分析。结果与健康人比较,肠BD组Th17细胞相关的IL-17[(581.77±260.37)pg/mL vs.(172.72±33.44)pg/mL,P=0.000]和IL-23[(588.31±192.14)pg/mL vs.(340.84±112.26)pg/mL,P=0.000]水平升高,Treg细胞相关的IL-35[(875.86±436.12)pg/mL vs.(183.19±60.84)pg/mL,P=0.000]和IL-10[(463.85±299.96)pg/mLvs.(84.47±51.06)pg/mL,P=0.000]水平升高。IL-17和IL-23水平与患者外周血白细胞计数及DAIBD评分呈正相关。结论 Th17/Treg细胞可能在肠BD的发生和发展过程中发挥一定作用。

CCR6、Th9细胞、Th17/Treg细胞失衡在大鼠肺纤维化中的表达及意义

目的研究CCR6、Th9细胞、Th17/Treg失衡在大鼠肺纤维化中的表达及意义。方法采取随机分组原则将63只雄性SD大鼠分为三组:生理盐水对照组(N组)、肺纤维化模型组(F组)、地塞米松治疗组(D组),经气管内注入博来霉素制作大鼠肺纤维化模型,分别于第7d、第14d、第28d留取各组大鼠肺组织、肺泡灌洗液,应用HE染色观察大鼠模型肺组织病理改变;免疫组化法评价三组肺组织中CCR6、IL-9表达情况;荧光PCR法检测肺泡灌洗液PU.1mRNA水平,流式细胞术检测Th17、Treg的表达;并分析CCR6、Th9细胞与Th17/Treg的相互关系。结果1.F组、D组与N组相比,肺组织炎症程度、肺纤维化程度显著,肺部炎症以造模第7d最明显。2.对于CCR6、PU.1mRNA、IL-9、Th17,与N组相比较,F、D组大鼠不同时间点表达均明显增高(P<0.05),以造模第7d最明显;F、D组大鼠Treg细胞表达水平较对照组降低(P<0.05)。3.CCR6、Th9、PU.1mRNA表达水平与Th17有显著正相关性,与Treg有显著负相关(P均<0.01)。结论本研究大鼠肺纤维化模型CCR6、Th9细胞与Th17/Treg比值各时间点表达水平较对照组均升高;推断CCR6、Th9细胞可能参与Th17/Treg失衡在肺纤维化免疫炎症的发生过程,进而促进肺组织纤维细胞增殖,在肺纤维化的发生机制中起到重要作用。

Th17/Treg细胞平衡与类风湿关节炎的研究新进展

类风湿关节炎(RA)是一种常见慢性进行性多关节受累的免疫系统疾病,发病机制尚不明确。随着对该疾病研究的不断深入,已发现辅助性T细胞(Th)17细胞和调节性T细胞(Treg)在自身免疫调节中发挥重要作用。目前研究认为,RA是抗原呈递细胞和CD4+T细胞相互作用的结果。近年来,Th17细胞、Treg细胞及Th17细胞/Treg的细胞平衡在RA发病中受到越来越多的关注,并发现后两者才是RA发病机制的核心。

CD4^+CD25^+Treg细胞和Th17细胞与寻常型银屑病发病的相关性

CD4^+CD25^+Treg细胞和Th17细胞是CI4^+T细胞的新亚群,参与自身免疫病、感染和肿瘤等疾病的发生发展。研究表明CD4^+CD25^+Treg细胞和Th17细胞与寻常型银屑病的发病密切相关。通过对CD4^+CD25^+Treg细胞和Th17分化发育和功能发挥过程中的关键调节因子进行阻断或加强,可以上调或下调CD4^+CD25^+Treg细胞和Th17在寻常型银屑病中的表达,以用于寻常型银屑病的预防和诊治。

Th17细胞及Treg细胞在喉癌外周血中的表达

目的:检测喉鳞状细胞癌患者外周血Treg细胞和Thl7细胞比例,研究其变化与意义。方法:采用流式细胞技术检测10例健康对照者和42例喉鳞状细胞癌患者外周血Treg和Thl7细胞比例,并观察Th17/Treg在喉癌分期中的变化。结果:与健康对照组比较,喉癌患者外周血Treg细胞和Th17细胞比例明显升高(P<0.05);发生淋巴结转移者较无淋巴结转移者的Treg和Th17细胞比例增高(P<0.05);通过分析不同喉癌分期中Th17/Treg细胞的分布,结果发现Ⅲ+Ⅳ期组Th17细胞的比例和Ⅰ+Ⅱ期无明显差异,而Treg细胞在Ⅲ+Ⅳ期比Ⅰ+Ⅱ期明显增高(P<0.05)。结论:喉癌外周血中Th17和Treg细胞数量增多,二者比例增高,并随着疾病的进展而增加,表明二者均参与了喉癌的发生发展过程。

Thl7细胞及细胞因子与男性重症肌无力伴胸腺瘤患者相关性分析

目的:研究Thl7细胞及细胞因子与男性重症肌无力(MG)伴胸腺瘤患者相关性分析。方法:选择首都医科大学宣武医院神经内科收治男性重症肌无力伴胸腺瘤患者42例(A组)、单纯男性重症肌无力患者50例(B组)及健康男性患者52例(C组),检测三组间外周血单个核细胞(PBMCs)Thl7细胞比例、Thl7细胞相关细胞因子mRNA转录、Thl7细胞相关细胞因子表达。结果:A组外周血Th17细胞比例、IL-17 mRNA转录相对值显、IL-17表达量显著高于B、C组,且差异有统计学意义,B组与C组比较差异无统计学意义。结论:Th17细胞增多及其细胞因子过度表达及转录是男性胸腺瘤(MG)患者引起MG发病的危险因素。

慢性心衰患者Th1与Th2型细胞及Treg细胞的表达

目的探讨Th1、Th2型细胞及Treg细胞在慢性心衰发病中的作用机制。方法采用RT-PCR技术检测62例慢性心衰患者和42例正常人外周血单个核细胞中T-bet、GATA-3及Foxp3mRNA的表达水平;ELISA法检测血浆中Th1/Th2型细胞因子IFN-γ/IL-4水平。结果慢性心衰患者T-bet表达水平高于正常对照组,GATA-3及Foxp3表达水平低于正常对照组(均P<0.05)。慢性心衰组患者血浆中IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4高于对照组(均P<0.01)。结论慢性心衰患者T-bet/GATA-3及IFN-γ/IL-4升高,Foxp3降低,提示Th1细胞亚群表达升高,Th2型细胞及CD4+、CD25+调节性T细胞减少,细胞免疫异常可能参与慢性心衰的发病机制。

慢性阻塞性肺疾病患者TH17细胞的表达及功能研究

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者TH17细胞的表达及功能。方法:选取COPD稳定期患者30例作为COPD稳定期组,门诊不吸烟的健康体检者30名为正常对照组。通过流式细胞术检测外周血TH17细胞的表达,ELISA检测血浆中白介素(IL)-17、IL-4、干扰素(IFN)-γ水平。结果:外周血中TH17细胞比例COPD稳定期组要高于正常对照组(P<0.01),ELISA检测表明,COPD稳定期组血浆中IL-17和IFN-γ水平均明显高于正常对照组(P<0.01),2组血浆中IL-4水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TH17细胞在COPD中的表达增加,参与了COPD慢性炎症过程。

中晚期鼻咽癌患者Th17细胞功能活性及调节性细胞因子水平的免疫病理意义

目的探讨Th17细胞功能活性及其相关调节性细胞因子在中晚期鼻咽癌患者免疫病理中的意义。方法 28例中晚期鼻咽癌患者,应用流式细胞术检测外周血Th17细胞数量比例,RT-PCR法检测ROR-γt mRNA转录水平,ELISA法检测血清白介素10(IL-10)和17(IL-17)及γ干扰素(IFN-γ)含量水平,并以15例健康人作为对照,分析其组间差异及其意义。结果中晚期鼻咽癌患者外周血单个核细胞中Th17细胞占CD4+T细胞的数量比例和ROR-γt mRNA的相对表达量均低于正常对照组(P<0.05),血清IL-10水平高于健康对照组(P<0.05),IL-17和IFN-γ水平低于正常对照组(P<0.05),提示Th17细胞功能活性显示了一种与患者病情进展程度呈现负相关关系的趋势。结论 Th17细胞数量及其功能活性降低,可能是中晚期鼻咽癌患者肿瘤微环境中免疫耐受现象突出、产生免疫逃逸的重要因素之一。一旦该结论得到确认,则有望成为新的干预治疗靶标。

慢性乙型肝炎患者外周血Th17及相关细胞因子表达研究

目的探讨Th17细胞及相关细胞因子与慢性乙型肝炎(CHB)病情的关系。方法采用RT-PCR检测慢性乙型肝炎轻度、中度、重度患者及健康对照外周血单个核细胞(PBMCs)中Th17细胞的特异性转录因子RORC mRNA及相关细胞因子TGF-β、IL-23、IL-6、IL-22、IL-1βmRNA表达水平,采用ELISA法检测CHB患者及健康对照PBMCs培养上清液中IL-17、IL-22的水平,比较不同组各生物指标分布的差异。结果与健康对照组相比,CHB患者PBMCs中RORC、TGF-β、IL-23、IL-17、IL-6、IL-1βmRNA含量随病情加重而升高,IL-22mRNA随病情加重而降低。CHB患者PBMCs培养上清液中IL-17、IL-22水平,与健康对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论 Th17细胞以及诱导Th17分化相关的细胞因子参与了CHB病情发展。

H7N9禽流感患者外周血T淋巴细胞亚群的分析及临床意义

目的 探讨H7N9禽流感患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及临床意义.方法 将23例H7N9禽流感患者（感染组）根据临床治疗预后分为好转组15例和死亡组8例,另选择体检健康者20例为正常对照组.采用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群CD3^＋CD4^＋T淋巴细胞、CD3^＋CD8^＋T淋巴细胞、Treg、Th17、CD3^＋CD8^＋IFN-γ^＋（Th1细胞）、CD3^＋CD8^-IL-4^＋（Th2细胞）百分率的变化.结果 感染组治疗前外周血CD3^＋CD4^＋T淋巴细胞百分率、CD3^＋CD8^＋T淋巴细胞百分率明显低于正常对照组（P＜0.05）,而Th17百分率、Th2细胞百分率较正常对照组明显增高（P＜0.05）;好转组治疗后外周血CD3^＋CD4^＋T淋巴细胞、Treg、CD3^＋CD8^＋T淋巴细胞百分率较治疗前明显增高,差异有统计学意义（P＜0.05）,治疗后外周血Th17细胞百分率、Th1细胞百分率较治疗前明显下降（P＜0.05）;死亡组治疗前、后上述指标间差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 H7N9禽流感患者存在严重的T淋巴细胞失衡,监测H7N9禽流感患者T淋巴细胞指标变化,对评估临床预后具有重要的参考价值.

清肝泻火方对Graves病模型小鼠Th17细胞转录因子表达的影响

目的:观察清肝泻火方对Graves病(GD)模型小鼠Th17细胞相关转录因子的影响,从免疫反应角度研究清肝泻火方治疗GD的作用机制,探讨该方治疗GD的新靶点。方法:选取雌性BALB/c小鼠80只,其中60只以表达TSHR-A亚单位的重组腺病毒免疫制备GD小鼠模型,造模成功后按随机数字表法分为模型组、甲巯咪唑组和清肝泻火方组,每组各20只;剩余20只作为对照组。甲巯咪唑组每日灌服甲巯咪唑混悬液12 mg/kg,清肝泻火方组每日灌服清肝泻火方混悬液2 m L,对照组和模型组每日灌服蒸馏水2 m L,各组均连续干预30 d。采用放射免疫法(RIA)检测各组GD模型小鼠血清中游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)水平;酶联免疫吸附法检测各组GD模型小鼠血清中白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-21(IL-21)水平。结果 :甲巯咪唑和清肝泻火方均可降低小鼠血清中FT3、FT4、TSH及IL-17、IL-21的表达水平,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:清肝泻火方能抑制Th17细胞相关转录因子的表达,从而抑制甲状腺自身的免疫炎症反应,促进GD小鼠甲状腺功能的恢复。

CD147介导CD4^+肿瘤浸润淋巴细胞促进乳腺癌进展

目的分析各T淋巴细胞亚群中CD147的表达水平以及CD147表达量在健康对照者外周血,乳腺癌患者外周血、淋巴结和肿瘤浸润淋巴细胞中CD4+T细胞的变化,分析CD147对乳腺癌患者预后的影响。方法采用Robust Multi-array Averaging的标准化方法提取GEO芯片GSE14308、GSE36765和GSE6532中的CD147表达数据。不同的基因表达水平的比较采用方差分析,生存曲线采用Log-Rank检验以及Cox比例风险回归模型进行多因素分析。结果 CD147在C57BL/6J小鼠淋巴结中的Th1细胞、Th2细胞、Th17细胞表达水平是Th0细胞的8~12倍。在乳腺癌患者的CD4+肿瘤浸润淋巴细胞中,CD147的表达水平显著高于健康对照者外周血、乳腺癌患者外周血和淋巴结中的CD4+T细胞。Log-Rank分析中,CD147表达量高低与无复发生存时间显著相关。Cox多元回归模型显示CD147高表达是乳腺癌复发的危险因素(风险度=1.764;95%可信区间:1.088~2.859)。结论 CD147可能通过上调CD4+T细胞的功能参与炎症反应,促进乳腺癌的进展。

COPD患者外周血存在Treg/Th17及IL-17变化

目的研究辅助性T细胞17（Thelper cell 17，Th17）和调节性T细胞（regulatory Tcell，Treg）及细胞因子在慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者中的变化。方法抽取入选的COPD患者120例[急性加重期（AECOPD）及稳定期COPD各60例]和健康对照者240例外周血，以流式细胞术分析Th17和Treg淋巴细胞，同时用ELISA法检测其白细胞介素-17（IL-17）表达水平，并对COPD患者行肺功能检查。结果①AECOPD组和稳定期COPD组患者外周血Th17、IL-17及Treg／Th17水平明显高于正常对照组；@COPD患者Th17、IL-17与第1s用力呼气量（FEV．）呈正相关；③COPD患者Treg／Th17与肺功能无相关性。结论COPD患者外周血存在Treg／Th17及IL-17变化。

结核患者CD19^+ CD5^+ CD1d^+ B细胞表达及其对Th17细胞的影响

目的:分析结核患者Th17应答与CD19+CD5+CD1d+B细胞频率的相关性。方法:应用流式细胞术检测健康对照、结核潜伏感染者、结核患者外周血中Th17应答水平及CD19+CD5+CD1d+B细胞频率。结果:结核患者Th17应答水平为(3.34±1.35)%,显著低于健康对照(4.60±1.56)%(q=6.56,P<0.001)和结核菌潜伏感染者(4.13±1.91)%(q=2.96,P<0.05);结核患者CD19+CD5+CD1d+B细胞频率为(28.29±11.03)%,显著高于健康对照(21.05±10.86)%(q=3.69,P<0.05)和潜伏感染者(20.46±9.88)%(q=3.59,P<0.05);结核患者Th17应答与CD19+CD5+CD1d+B细胞频率呈负相关性(r=-0.467 3,P<0.05)。结论:活动性结核病患者Th17细胞应答受抑制,这种抑制可能与CD19+CD5+CD1d+B细胞频率的增多有关。

Th17细胞与呼吸道变应性疾病的研究进展

Th17细胞是新近认定的不同于Th1和Th2的特有T细胞系,与其他免疫细胞协调介导各种免疫反应,在一些原来认为由Th1、Th2介导的变应性疾病中起重要作用。本文对Th17细胞及其产生的细胞因子:IL-17、IL-6、INF-α及相关细胞因子IL-23在变应性疾病中的作用及研究进展进行综述。