青蒿素对变应性接触性皮炎小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响

目的探讨青蒿素(Art)在变应性接触性皮炎(ACD)中对Th17和Treg的影响及机制。方法以DNFB致敏和激发制作小鼠ACD模型,局部外涂Art进行干预,采用RT-PCR和ELISA检测Treg/Th17细胞特异性核因子及相关细胞因子的表达与含量,流式细胞术检测Treg细胞数量,West-ern blot方法检测信号转导子和转录激活子STAT3的磷酸化活性表达。结果与正常组相比,模型组IL-6、IL-17含量、ROR-γt及STAT3的活性表达明显升高,同时Foxp3表达降低。Art明显降低ROR-γt表达、下调IL-6及IL-17水平,同时增加Foxp3表达并促进Treg产生,减弱STAT3的磷酸化活性。结论 Art可能通过调节Treg/Th17免疫平衡,对DN-FB诱导的ACD小鼠发挥免疫治疗作用。

Th17/Treg失衡在类风湿性关节炎发病机制中的研究

类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种临床常见的自身免疫性疾病,严重影响患者的生活质量。免疫细胞在其发生、发展中发挥重要作用,然而对其具体发病机制目前尚不十分清楚。辅助性T细胞17(Th17)是一类以分泌IL-17为主、可介导RA炎症反应过程的细胞;而调节性T细胞(Treg)则具有免疫抑制作用,Th17/Treg失衡在RA的发病机制中扮演重要角色。本文主要就Th17与Treg的相互作用及Th17/Treg失衡在RA发病机制中的作用做简要综述。

人参皂苷Rb1对自发性高血压大鼠Th17/Treg的影响

目的观察人参皂苷Rb1对自发性高血压大鼠(SHR)血压及Th17/Treg的影响。方法选择12周龄雄性SHR 36只,随机分为4组,人参皂苷Rb1大剂量和小剂量组、生理盐水组、氨氯地平组。血压正常的京都Wistar Kyoto大鼠(WKY)9只为正常对照组。于治疗第0周、12周分别用尾袖法测定大鼠血压,并分别采血,检测Th17以及Treg细胞比例。结果 12周后,人参皂苷Rb1大、小剂量组血压均较治疗前明显下降,但较氨氯地平组差;Rb1高剂量组及氨氯地平组分别与生理盐水对照组比,差别均有统计学意义(P<0.05)。Th17及Treg细胞亚群分析,Rb1高、低剂量组都可以下调Th17细胞比例,上调Treg细胞比例,氨氯地平组对Th17/Treg细胞分布以及比例影响不明显。结论人参皂苷Rb1可以显著降低自发性高血压大鼠的血压,其降压机制可能部分通过调节Th17/Treg细胞平衡实现。

转录因子RORγt对小鼠急性肺损伤Th17/Treg平衡的影响

目的:探讨转录因子维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)在急性肺损伤中对Th17辅助细胞(Th17)和T调节细胞(Treg)的比值Th17/Treg平衡的影响。方法:选择40只雄性SPF级昆明小鼠,随机分为4组,静脉注射生理盐水组10只(对照组)、内毒素尾静脉注射2h后观察组10只(实验组1)、内毒素尾静脉注射6h后观察组10只(实验组2)、内毒素尾静脉注射12h后观察组10只(实验组3)。分析支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及分类计数,取肺组织行病理学检查,采用流式细胞仪检测外周血Th17和Treg细胞的比例并计算Th17/Treg比值,ELISA法测定外周血白介素-17(IL-17)、白介素-23(IL-23)、干扰素-γ(IFN-γ)、RORγt含量,RT-PCR法检测前述因子在肺组织中的表达,以及实时定量PCR法检测肺组织中RORγt的表达,分析RORγt对Th17/Treg平衡的影响。结果:外周血标本中,实验组1、2、3Th17细胞比例比对照组升高,差异具有统计学意义(P<0.01);Treg细胞比对照组降低,差异具有统计学意义(P<0.05),Th17/Treg比值上升。实验组1、2、3IL-17、IL-23及RORγt含量均高于对照组,IFN-γ含量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组2肺组织RORγt蛋白的表达明显高于实验组1、3和对照组,后两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:Th17及RORγt表达参与了急性肺损伤的发生发展,RORγt表达降低可使Th17分化和增殖功能受抑,转录因子RORγt的测定有可能作为反映急性肺损伤严重程度的指标。

胡柚皮黄酮对非酒精性脂肪性肝炎小鼠Th17/Treg平衡的调节作用

主要通过观察胡柚皮黄酮(PTFC)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠Th17/Treg平衡的调节作用,探讨其干预NASH进展的免疫机制。以高脂饮食16周建立C57BL/6小鼠NASH模型,在造模第7周起分别预以25,50,100 mg·kg-1·d-1的PTFC灌胃干预10周,生化法检测血清TG,CHOL,ALT,AST水平,HE染色观察肝组织病理学变化;Real-time PCR检测肝组织RORγt和Foxp3 mRNA表达;流式CBA法检测血清IL-17,IL-6,IL-10,IL-4水平。研究发现,模型组小鼠血清CHOL,ALT,AST水平较正常组升高,TG水平下降;肝组织RORγt mRNA表达增强,Foxp3 mRNA表达下降,RORγt/Foxp3比值下降;血清IL-17,IL-6水平升高,IL-10,IL-4水平降低;PTFC干预后能明显减轻NASH小鼠肝组织炎症程度,改善肝功能,同时能够促进肝组织Foxp3 mRNA的表达而抑制RORγt mRNA表达,有效降低促炎因子IL-17和IL-6的水平而提高抑制性细胞因子IL-10和IL-4的水平。研究表明,高脂饮食诱导的NASH小鼠存在着Th17/Treg的免疫失衡,PTFC能通过调节Th17/Treg的平衡而缓解NASH的炎症反应,防止其进展。

润燥灵对干燥综合征模型小鼠Th17/Treg细胞的影响

目的:探讨润燥灵对免疫诱导性干燥综合征(SS)模型小鼠外周血辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)的影响。方法:将90只C57bl/6j小鼠随机分成为正常组、模型组、润燥灵36g/kg组、润燥灵18g/kg组、润燥灵9g/kg组和泼尼松0.2g/kg组,每组15只,除正常组外,其余各小鼠采用免疫诱导法建立SS模型,造模第5 w开始灌胃给药,每周测量小鼠饮水量,给药4 w后眼球取血,断颈处死,分离颌下腺,HE梁色后病理检测,PCR检测颌下视黄醇类核内受体(RORγt)和转录因子叉头框蛋白3(Fox P3)的表达,流式细胞术检测Thl7细胞和CD4^+CD25^+T细胞的含量。结果:与模型组比较,润燥灵36g/kg组和润燥灵18g/kg组小鼠饮水量增加,颌下腺淋巴细胞浸润减少。PCR法结果显示,与正常组比较,模型组RORγt m RNA和Fox P3 m RNA表达量升高;与模型组比较,润燥灵36gkg、润燥灵18g/kg和泼尼松0.2g/kg组RORγt m RNA和Fox P3 m RNA表达量降低。流式细胞术结果显示,与模型组比较,润燥灵36gkg组和泼尼松0.2g/kg组CD4^+/CD4^+CD25^+T比值降低。结论:润燥灵能够抑制SS模型小鼠RORγt m RNA和Fox P3 m RNA表达量,调节Thl7/Treg细胞平衡作用。

外周Th17／Treg和白细胞介素17与狼疮肾炎临床病理的相关性研究

目的阐明狼疮肾炎（LN）患者外周血辅助性T细胞17／调节性T细胞（Th17／Treg）及白细胞介素（IL）17与临床病理的相关关系。方法以2011年6月至2012年2月在复旦大学附属中山医院肾内科就诊的LN患者为研究对象，记录其人口学、临床指标和病理指数等资料。流式细胞术检测外周血Th17、Treg细胞所占比例，计算Th17／Treg比值；ELISA法检测外周血IL．17等细胞因子水平。结果60例LN患者被纳入研究，SLE疾病活动指数（SLEDAI）为9．50±4．61。LN患者（活动组＋非活动组）Th17／Treg比值明显高于健康对照组[（0．95±0．67）比（0．29＋0．13），P〈0．05]；LN活动组Th17／Treg比值明显高于LN非活动组[（1．33±0．71）比（0．57±0．33），P〈0．01]。LN患者外周血Th17／Treg比值与SLEDAI呈正相关（r=0．650，P〈0．01），与。肾脏病理活动指数（AI）呈正相关（r=0．675，P〈0．01）。血清IL-10水平与SLEDAI呈负相关（r=-0．567，P〈0．01），与AI呈负相关（r=-0．422，P〈0．01）；血清IL．17水平与SLEDAI呈正相关（r=0．559，P〈0．01），与AI呈正相关（r=0．479，P〈0．01）；血清IL．23水平与SLEDAI呈正相关（r=0．339，P〈0．05），与AI呈正相关（r=0．350，P〈0．05）。LN患者血清抗ds—DNA抗体水平和c3水平与SLEDAI和AI评分均无相关性（P〉0．05）。以SLEDAI≥10作为诊断LN临床病情活动标准。Th17／Treg、IL-17和IL．23的ROC曲线下面积分别为0．92（0．83～1．00）、0．91（0．81—1．00）和0．67（O．51—0．83）；以AI〉8分作为诊断LN病理活动标准，Th17／Treg和IL-17的ROC曲线下面积分别为0．87（0．76～0．99）和0．84（0．69—0．99）。结论外周血Th17／Treg比值和IL．17水平与LN患者临床病理活动的相关度高于血清抗ds．DNA抗体、c3及IL-10、IL．23等指标；血清IL-10、IL．23水平与LN临床病理的相关度高于血清抗ds．DNA抗体和c3。

应激性胃溃疡中Th1/Th2细胞与Th17/Treg细胞平衡的变化及凯时的干预作用研究

目的探讨应激性胃溃疡中Th1/Th2细胞和Th17/Treg细胞平衡的变化及凯时的干预作用。方法将40只雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组(N组)、应激组(S组)、脂微球空载体10μg/kg组(L组)、凯时低剂量1μg/kg组(M组)和凯时高剂量10μg/kg组(P组)。大鼠经上述药物预处理后,制作应激性胃溃疡模型。造模完成后采集外周血分离淋巴细胞及血浆,采用荧光定量PCR方法分析Th1/Th2/Th17/Treg细胞相对应的转录因子T-bet/Gata-3/RORγt/Foxp3mRNA的表达量,采用试剂盒检测血浆中的超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)浓度,并评价胃溃疡指数(UI)及制作病理切片。结果与N组比,S组UI加重,血浆MDA含量增高,SOD活性降低(P<0.05),Gata-3mRNA表达上调(P<0.05);RORγt与Foxp3mRNA表达均下调(P<0.05),而T-bet/Gata-3比值下降(P<0.05)。与S组比,P组UI减轻,血浆MDA含量降低,SOD活性升高(P<0.05),Gata-3mRNA表达下调(P<0.05),Foxp3mRNA表达上调(P<0.05)。结论应激性胃溃疡的发生发展可能与Th1/Th2细胞和Th17/Treg细胞失衡有关。凯时具有抗氧化作用,能减少应激性胃溃疡的发生,且在急性应激早期可能有保护机体免疫功能的作用。