PAI-1和TAFIa对机体内源性纤溶的调控作用

目的 研究血浆中纤溶酶活化剂抑制物 1(PAI 1)和活化的凝血酶活化的纤溶抑制因子 (TAFIa)增加对机体内源性纤溶的影响。方法 以12 5I 纤维蛋白原进行示踪 ,建立大鼠肺纤维蛋白沉积模型 ;用凝血酶及血栓调节蛋白 (TM)活化TAFI,并用SDS/PAGE和TAFI活性测定试剂盒进行检测 ;然后用该模型研究PAI 1和TAFIa对大鼠内源性纤溶的作用。结果 (1)Batroxobin能导致纤维蛋白在大鼠肺组织沉积 ,表现为 5min肺组织放射性记数显著升高 ,而 30min由于内源性纤溶系统激活 ,肺组织放射性记数降低 ;(2 )TAFI经凝血酶 /TM活化后 ,电泳检测到约 36KD的TAFIa条带 ;(3)予TAFIa和PAI 1后 ,抑制了 30min肺同位素量的降低。结论 直接证实血浆中PAI 1和TAFIa增加可抑制纤溶 ,抑制内源性TAFIa和PAI 1可能是防治血栓性疾病的一种新途径。

正常妊娠妇女和妊娠期高血压疾病患者血浆TAFI和PAI-2变化的研究

目的:探讨凝血酶活化的纤维蛋白溶解抑制物(TAFI)和纤维酶原激活抑制物-2(PAI-2)在正常妊娠妇女和妊娠高血压疾病患者血浆中的变化及其临床意义。方法:研究对象包括22例妊娠期高血压疾病患者(其中子痫前期10例、妊娠期高血压12例)、30例正常妊娠妇女和30例正常未孕妇女,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定研究对象妊娠早、中、晚三期血浆中的TAFI和PAI-2抗原水平。结果:与未孕对照组比较,正常妊娠组妊娠各期PAI-2均明显升高,差异均有显著统计学意义(P均<0.01),而TAFI在孕晚期才明显高于未孕组,差异有统计学意义(P<0.05),与正常妊娠组比较,妊娠期高血压组妊娠三期中TAFI、PAI-2抗原水平差异无统计学意义(P>0.05),子痫前期组妊娠三期TAFI明显高于正常妊娠组,而PAI-2均低于正常妊娠组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:TAFI、PAI-2在正常妊娠妇女发挥着纤溶抑制作用,维持母体凝血和纤溶的平衡。TAFI是一个预测子痫前期的敏感指标,有助于预测子痫前期患者血栓前状态的形成,而PAI-2不能用来判断母体内纤溶水平变化,但可能预示不良妊娠结局。两者对于妊娠期高血压患者的临床意义不大。

研究TAFIa作为抗血栓药物靶的意义

目的论证TAFIa作为溶栓与抗栓治疗药物靶的可能性。方法通过TAFIa专一性抑制剂存在条件下,低浓度t-PA诱导的纤溶试验以及内纤溶试验,研究抑制TAFIa对纤溶的促进作用。结果通过体外水蛭素抗凝的小剂量t-PA纤溶试验证明,即使在抗凝剂水蛭素存在时,抑制TAFIa活性仍可促进纤溶产物-D-Dimer的生成,并且在一定的t-PA浓度范围内,与t-PA浓度呈正相关。通过跟踪加入TAFIa专一性抑制剂CPI的t-PA诱导的内纤溶过程,发现在低剂量t-PA内纤溶试验中,抑制TAFIa活性可以明显缩短纤溶时间。结论通过抑制TAFIa的活性,可促进t-PA诱导的纤溶,并且可以促进微血栓的降解,抑制某些情况下的微血栓形成,这提示了TAFI可作为微血栓预防和治疗靶的可能。

TAFI基因启动子区-2345 2G/1G多态性与脑梗死的关系

目的分析中国汉族人群TAFI基因启动子区-2345 2G/1G与动脉粥样硬化性脑梗死发病的关系。方法选择225例脑梗死(病例组)和184例健康体检者(对照组)为对象,应用等位基因特导性聚合酶链反应分析方法(AS-PCR)检测-2345 2G/1G多态性。结果 TAFI-2345 2G/1G在病例组的1G等位基因频率为42.9%,对照组为50.8%,2组间差异有统计学意义(P=0.024);病例组1G/1G基因型频率为15.1%,对照组为24.5%,2组间差异有统计学意义(P=0.017)。经Logis-tic回归分析,TAFI-2345 1G/1G基因型与脑梗死的发病有独立相关性。结论 TAFI-2345 2G/1G多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的发病有关联,1G/1G基因型可能使脑梗死患病风险降低。

胃癌患者血浆TAFI及TAT的变化及其临床意义

目的探讨胃癌患者血浆凝血酶激活的纤溶抑制物(thrombin activated fibrinolysis inhibitor,TAFI)和凝血酶-抗凝血酶复合物(thrombin-antithrombin complex,TAT)水平的变化及其与胃癌的关系。方法收集原发性胃癌患者106例为实验组。同时,收集体检健康者30例为对照组。采用酶联免疫吸附双抗体夹心(ELISA)法定量测定血浆中凝血酶激活的纤溶抑制物抗原(TAFI:Ag)及TAT水平。结果实验组血浆TAFI:Ag及TAT水平分别为(30.0±2.5)μg/m L及(36.3±3.4)ng/m L,对照组血浆TAFI:Ag及TAT水平分别为(22.5±2.5)μg/m L及24.5±2.5 ng/m L,有显著性差异(P<0.05)。胃癌患者TAFI抗原及TAT水平随临床分期的进展而增高,Spearman秩相关分析提示,其与术后病理分期呈正相关,相关系数分别为0.814及0.881。用ROC曲线研究TAFI抗原和TAT两项指标的检验效能显示:TAFI抗原的临界值为26.25μg/m L(AUC=0.915,P<0.05);TAT的临界值为29.15 ng/m L(AUC=0.852,P<0.05)。结论胃癌患者体内TAFI及TAT水平均显著升高,并与胃癌病理分期呈正相关,提示其作为胃癌诊治的辅助实验室指标或有可观的应用价值。

凝血、纤溶系统功能与2型糖尿病关系的研究

目的探讨机体凝血和纤溶系统功能的改变与2型糖尿病并发症的关系。方法选取49例2型糖尿病患者,按其24 h内尿白蛋白量分为尿白蛋白正常组21例,微白蛋白尿组15例,临床肾病组7例,另为合并急性并发症组6例。同时选择30例年龄与患者相匹配的健康者作为对照组。测定血浆组织型纤溶酶原激活物(tPA)含量和纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)含量、纤溶酶原(PLG)活性、D-二聚体(D-D)含量、凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)含量及其活性(TAFIa)。结果糖尿病(DM)患者tPA为14.6±5.9μg/ml和PLG 94.4±14.3%,皆明显低于对照组(两者分别为17.9±6.0μg/ml,101.4±11.7%;P<0.05);DM组PAI 33.2±11.1μg/ml、D-D 0.74±O.11μg/ml、TAFI 122.36±47.1%及TAFIa 77.3±8.5μg/ml,显著高于对照组(分别是25.8±7.9、0.21±0.57、89.2±31.1、27.2±10.3),差异有显著性(均P<0.05);分析DM肾病患者白蛋白尿正常组与对照组差异无显著性,其余4组与对照组差异均有显著性(P<O.05)。对TAFI相关分析,表明其与患者UAE、PAI、D-D结果呈正相关。结论机体凝血纤溶功能的异常改变与2型糖尿病肾病关系密切,各项目的检验,可反映糖尿病微血管病的程度,从而有助于临床对患者病情与预后的评估。

大鼠动脉粥样硬化形成过程中凝血酶活化纤溶抑制剂活性与血脂的相关性

目的探讨在大鼠动脉粥样硬化(AS)形成过程中凝血酶活化纤溶抑制剂(thrombin-activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI)活性与血脂的相关性。方法40只健康的雄性Wistar大鼠随机分为4组(每组10只):正常对照组、高脂组、高脂维生素D3(VD3)组、内皮损伤组。分别以普通饲料、高脂饲料、高脂饲料+VD3、高脂饲料+VD3+内皮球囊损伤处理,复制大鼠AS形成过程中的三个阶段的模型,即高脂血症、纤维增生性动脉硬化、较成熟的AS斑块病变。测定血浆总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C),发色底物法测定血浆TAFI的活性。结果与正常对照组比较,三组模型鼠的血浆TC、TG、LDL-C、和TAFI活性明显高于正常对照组(P<0.01),有递增趋势,以内膜损伤组升高最为明显;三组模型鼠的HDL-C水平明显低于正常对照组(P<0.01或P<0.05),有递减趋势,以内膜损伤组降低最为明显;血浆TAFI活性与TC、TG呈正相关。结论AS的发生过程中血脂与血浆TAFI活性呈正相关,TAFI参与了AS的形成过程,其活性升高可能是AS的致病因素之一。

凝血酶激活的纤溶抑制物编码区基因位点C1040T和G505A单核苷酸多态性与脑梗死的相关性研究

目的:研究凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)编码区CPB2基因位点C1040T和G505A的单核苷酸多态性与脑梗死之间的联系。方法:应用聚合酶链反应和限制性内切酶片段长度多态性分析技术(PCR-RFLP)检测98例脑梗死患者和100名正常对照者的TAFI基因编码区C1040T(Thr325Ile)、G505A(Thr147Ala)多态性分布特点。结果:CPB2基因C1040T(Thr325Ile)及G505A(Thr147Ala)2个位点的3种基因型在脑梗死组和对照组的频率分布分别为C1040C(Thr325Thr)33(33.7%)、29(29.0%);C1040T(Thr325Ile)47(48.0%)、51(51.0%);T1040T(Ile325Ile)18(18.3%)、20(20.0%);A505A(Thr147Thr)15(15.3%)、43(43.0%);G505A(Thr147Ala)44(45.0%)、19(19.0%);G505G(Ala147 Ala)39(39.7%)、38(38.0%)。经χ2检验,基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡,并且脑梗死组与对照组之间各种基因型频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TAFI编码区CPB2基因(Thr325Ile、Thr147Ala)的多态性与脑梗死的发生无明显相关性。

凝血酶激活的纤溶抑制物基因3’端+1583A/T多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的关系

目的分析中国汉族人群凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)基因3’端+1583A/T多态性与动脉粥样硬化性脑梗死发病的关系。方法本研究采用病例-对照研究,选择中国汉族人群225例动脉粥样硬化性脑梗死(病例组)和184例健康体检者(对照组)为对象,应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析方法(PCR-RFLP)检测TAFI+1583A/T多态性。结果 TAFI+1583 A/T在病例组的A等位基因频率为24.7%,对照组为25.0%,两组比较经χ2检验差异无显著性(P=0.913)。病例组AA基因型为6.7%,对照组为3.8%,两组比较经χ2检验差异无显著性(P=0.202)。结论 TAFI+1583A/T与脑梗死的发病无关。

2型糖尿病患者TAFI、PAI-1、t-PA、F1+2与尿微量蛋白之间关系的研究

目的:探讨凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)在2型糖尿病患者中纤溶抑制的作用机制,并分析TAFI、PAI-1、组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)、凝血酶原片段1+2(F1+2)等凝血、纤溶的指标与尿微量蛋白之间的关系。方法:64例2型糖尿病患者以尿蛋白排泄量分微量蛋白尿组(MAU)和正常蛋白尿组(NAU)组。TAFI、PAI-1、t-PA及F1+2等凝血纤溶指标测定用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISH),并分析上述指标与尿微量蛋白、血压、血糖、血脂、功能参数之间的关系。结果:与对照组比较,血浆TAFI仅在MAU组显著性升高(P<0.05);血浆t-PA在T2DM的2组中增高均无显著性;而血浆PAI-1和F1+2在NAU和MAU组均显著性增高,差异有统计学意义(P<0.01)。但TAFI、PAI-1、t-PA、F1+2在2组之间无显著性差异。结论:2型糖尿病患者的纤溶功能降低主要是由于PAI-1的作用,随着蛋白尿的出现,其进一步的低纤溶状态则是由TAFI介导的,故TAFI和PAI-1在抑制纤溶系统功能上的作用是独立的。

编码TAFI505A/G和1040C/T基因多态性与2型糖尿病关系的研究

目的:探讨凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)编码区2个位点(505A/G,1040C/T)的单核苷酸多态性与2型糖尿病(T2DM)发病及病程进展的相关性。方法:应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术检测267例T2DM患者(单纯糖尿病110例,早期糖尿病肾病90例,临床糖尿病肾病67例)和140例正常对照者的TAFI505A/G、1040C/T2位点的多态性。结果:505A/G多态性位点病例组与对照组中各基因型的分布差异无统计学意义。在1040C/T位点,T2DM组T等位基因的频率与对照组相比明显下降(15.6%对25.7%,P<0.05),其T/T纯合子型比例亦显著下降(P<0.05,95% OR 0.28,CI0.11～0.70)。但这种显著性差异只在早期糖尿病肾病患者中表现出来,随着病情的进展,这种差异在临床糖尿病肾病患者组与对照组间却表现不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1040C/T多态性位点T等位基因可能作为一种保护性基因在T2DM发病及早期病情进展中起到保护性作用,即TAFI1040C/T基因多态性可能与T2DM患病危险度存在关联。

慢性肝病患者血浆中凝血酶激活的纤溶系统检测的临床意义

目的:探讨慢性肝病患者血浆凝血酶激活的纤溶抑制物活性(TAFI:A)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)及组织型纤溶酶原激活物(t-PA)水平变化的临床意义。方法:收集84例临床肝病患者的血液标本,同时选取52例体检健康者为对照组,TAFI:A测定采用发色底物法,PAI-1、t-PA含量测定采用ELISA法,并统计分析上述3项指标与不同类型慢性肝病间的相关性。结果:与对照组比较,病例组血浆TAFI:A水平均显著降低(P<0.05);血浆PAI-1水平显著增加(P<0.05);血浆t-PA水平亦显著增加(P<0.05,原发性胆汁性肝硬化除外)。结论:慢性肝损伤患者血浆TAFI:A水平降低,导致纤溶活性增加,是提示慢性肝病患者呈出血倾向的一项指标。