rhTPO对脂多糖诱发血小板减少小鼠骨髓造血干细胞及免疫的影响

目的探讨重组人血小板生成素（rhTPO）对脂多糖（LPS）诱发血小板减少小鼠血小板计数（BPC）、骨髓造血干细胞、巨核细胞及免疫的影响。方法SPF级雄性C57／BL6小鼠100只，随机分为五组：健康对照（c）组，模型（LPS）组（腹腔注射LPS30mg／kg），低、中、高剂量rhTPO（L、M、H）治疗组（制模后连续皮下注射不同剂量rhTPO3d），观察每日小鼠外周血BPC的变化，ELISA法检测第4天小鼠血浆TNF-仪、IL-6、IL-10等炎性因子水平，流式细胞术测定骨髓造血干细胞CD34＋、巨核细胞CD41／CD61表达，计算胸腺、脾脏脏器指数，记录各组小鼠72h死亡率。结果各组小鼠注射LPS后BPC较C组不同程度下降（P〈0．05）；LPS、M、H组3d时BPC（×10^9／L）降至最低值（128．2±31．1、169．4±62．4、137．0±39．8），L组2d时BPC（×10^9／L）降至最低值（259．4±51．3），L组小鼠BPC最低值高于M、H、LPS组（P〈0．05）；3、4d时，L组BPC明显高于LPS、M、H组（P〈0．01），M、H组与LPS组比较无升高（P〉0．05）。注射LPS后4d时各组小鼠骨髓巨核细胞CD41／CD61高于c组（P〈0．01），L组小鼠骨髓巨核细胞CD41／CD61明显高于M、H、LPS（P〈0．01），M组、H组与LPS组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；4d时LPS、M、H组小鼠骨髓CD34＋表达较C组无变化（P〉0．05），L组较M、H、LPS组及C组CD34＋表达增高（P〈0．01），M组、H组与LPS组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。4d时各组小鼠TNF-α、IL-6水平与C组比较差异无统计学意义（P〉0．05），L、M、H组与LPS组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）；LPS、M、H组IL-10水平与C组比较差异均无统计学意义（P〉0．05），L组明显高于C、LPS、M及H组（P〈0．01）。4d时LPS、M、H组胸腺指数较c组均降低（P〈0．01），L组较LPS升高（P〈0．01），与C组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；LPS、L、M、H、C组小鼠脾指数无明显改变，组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。L组小鼠72h死亡率明显低于其他三组（P〈0．01）。结论低剂量rhTPO可能通过促进LPS诱发血小板减少小鼠骨髓干细胞及巨核细胞增殖、提高抗炎细胞因子水平、增强小鼠免疫达到升高小鼠BPC水平、降低72h死亡率的效果。

重组人血小板生成素及白介素-11应用于白血病化疗所致血小板减少症的系统评价

目的评价重组人血小板生成素（rh TPO）及重组人白细胞介素-11（rh IL-11）应用于白血病化疗后血小板减少症的有效性与安全性。方法采用循证医学的方法,计算机检索中国知网（1997-2015年1月）、万方数据资源系统（1977-2015年1月）、中国科技期刊数据库（1989-2015年1月）,收集rh TPO和rh IL-11治疗白血病化疗后血小板减少症的所有平行对照试验。结果共纳入7篇文献。与rh IL-11组相比,rh TPO能增加白血病患者恢复血小板的最高值,缩短白血病患者化疗后血小板≤50×10^9/L的持续时间,缩短白血病患者化疗后恢复至血小板≥75×10^9/L的时间（均P〈0.00001）;rh TPO组不良反应发生率更低[RR 0.19,95%CI（0.12-0.31）,P〈0.00001]。但rh TPO组和rh IL-11组患者化疗后血小板的最低值及rh TPO组和rh IL-11组恢复至血小板≥100×10^9/L的时间无明显差异。结论在治疗白血病化疗后血小板减少症方面,与rh IL-11组相比,rh TPO能够增加血小板恢复的最高值、缩短血小板≤50×10^9/L的持续时间和恢复至血小板≥75×10^9/L的时间,并减少不良反应的发生。但二者对改善化疗后血小板的最低值和使患者恢复至血小板≥100×10^9/L的时间方面差异无统计学意义。然而,目前的临床试验设计存在不足,需要设计完善的大样本随机对照试验进行验证。

重组人血小板生成素参考品的研制

目的 制备重组人血小板生成素参考品，为ｒｈＴＰＯ的体外生物学活性测定提供相对标准。方法 采用ＴＰＯ依赖细胞株进行ｒｈＴＰＯ体外生物学活性测定。结果 效价测定９次。ＳＤ＝０．１５７９．ＣＶ＝１４．１％，平均效价 为ｌ１０００Ｕ／支，其他项目均达到国家标准品要求。参考品置－２５℃保存６个月后稳定性良好。结论 作为参考品可 用于ｒｈＴＰＯ体外生物学活性控制。

重组人血小板生成素治疗血液肿瘤化疗后血小板减少的系统评价

目的:评价重组人血小板生成素(rhTPO)治疗成人血液肿瘤化疗后血小板减少的有效性与安全性。方法:采用循证医学的方法,计算机检索CBM、CNKI、MEDLINE、EMBASE、Cochrane图书馆临床对照试验资料库等数据库,收集rhTPO治疗成人血液肿瘤化疗后血小板减少的临床研究证据。结果:共纳入7篇文献。与对照组相比,rhTPO试验组血小板计数最低值、血小板计数恢复的最高值、血小板<50×109·L-1的持续天数、血小板恢复≥100×109·L-1的天数以及血小板输注量加权均数差值(WMD)(95%可信区间(CI))分别为1.06(-0.08,2.20)、67.19(32.1,101.58)、-3.35(-4.51,-2.18)、-2.97(-4.63,-1.32)、-2.58(-4.92,-0.24),不良反应发生率相对危险度(RR)(95%CI)为4.69(1.90,11.58)。结论:现有研究显示,在治疗成人血液肿瘤化疗后血小板减少方面,rhTPO能够提高血小板恢复的最高值和增加值,缩短化疗后血小板<50×109·L-1的持续天数,加快血小板的恢复速度,并间接减少血小板输注量,且不良反应轻微。然而,目前临床试验设计存在不足,尚需进行设计良好的大样本研究验证。

重组人血小板生成素治疗难治性特发性血小板减少性紫癜的循证评价

目的:评价重组人血小板生成素(rhTPO)治疗成人慢性难治性特发性血小板减少性紫癜(ITP)的有效性与安全性。方法:采用循证医学的文献分析评价方法,计算机检索CBM、CNKI、MEDLINE、EMbase、Cochrane图书馆临床对照试验资料库等数据库,收集rhTPO治疗成人慢性难治性ITP的临床研究证据。结果:检索到rhTPO治疗成人慢性难治性ITP的文献有:自身前后对照试验5篇,随机对照试验2篇。按Jadad量表评分:1篇随机对照研究质量较高,为4分,其余文献均小于3分。5项自身对照研究结果基本一致,认为rhTPO可升高成人难治性ITP患者的血小板计数,且不良反应轻微。2项随机对照试验认为rhTPO联合达那唑治疗难治性ITP的效果明显优于单用达那唑,且对于单用达那唑治疗无效者,接受rhTPO治疗后血小板计数亦明显升高。结论:现有研究显示rhTPO在治疗成人慢性难治性ITP方面疗效确切、安全性好,但试验设计存在不足,尚需进行设计良好的大样本研究。

重组双体化促血小板生成素模拟肽人血清白蛋白融合蛋白(HSA-TMP-TMP)体内生物活性与药效学研究

探索双体化重组人白蛋白与促血小板生成素模拟肽二联体融合蛋白(HSA-TMP-TMP)对正常小鼠促血小板生成活性的影响,并探讨双体化HSA-TMP-TMP对卡铂诱导继发性血小板减少症模型小鼠的治疗作用。给予正常小鼠不同剂量的双体化HSA-TMP-TMP,观察其促血小板生成活性;给予小鼠单次腹腔注射卡铂,建立化疗药物卡铂诱导的血小板减少症模型,并给予不同剂量的双体化HSA-TMP-TMP进行治疗,观察治疗效果。单体和双体HSA-TMP-TMP均可显著提高正常小鼠血小板计数水平,双体HSA-TMP-TMP提高正常小鼠血小板计数水平是单体HSA-TMP-TMP的1.57倍。而且,双体HSA-TMP-TMP对卡铂诱导继发性血小板减少症模型小鼠具有显著的治疗作用。双体HSA-TMP-TMP具有显著增加正常小鼠血小板计数水平的生物活性,而且对卡铂诱导的血小板减少症小鼠具有显著的治疗作用。

促血小板生成素和血小板特异性抗体在SLE合并血小板减少中的作用

目的:通过对系统性红斑狼疮(SLE)合并血小板减少患者血清中的促血小板生成素(TPO),血小板特异性抗体(HPA)以及各实验室指标的检测,分析TPO,HPA与各实验室指标的相关性,探究TPO及HPA与SLE合并血小板减少患者的关系,从而初步分析SLE合并血小板减少症的发病机制。方法:收集SLE合并血小板减少患者30例(SLE合并组),单纯SLE患者22例(SLE组),健康对照者18例(对照组),应用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测血清中TPO、HPA含量,应用免疫比浊方法检测SLE合并组C反应蛋白(CRP),类风湿因子(RF),补体C3,补体C4实验室指标,沉降法检测红细胞沉降率(ESR),电阻法检测血小板值,分析TPO与各实验室指标的相关性。结果:TPO含量在3组间差异有统计学意义(P<0.01);HPA阳性率在3组间差异无统计学意义(P>0.05)。在SLE合并组中,TPO与CRP(r=0.387,P=0.035)、血沉(r=0.669,P=0.001)呈正相关;与C3(r=-0.397,P=0.030)、C4(r=-0.462,P=0.010)呈负相关;与RF、血小板计数无相关性。结论:SLE患者血清中TPO含量明显升高,而HPA则无差异,TPO可能在SLE患者血小板减少作用机制中发挥一定作用。