三种干燥方法对蓝布正中没食子酸含量测定的影响

为比较蓝布正(Geum japonicum Thunb.var.chinense F.Bolle)经3种不同干燥方法处理对没食子酸含量的影响。采用高效液相色谱法,以Zorbax Extend-C18(4.6×150 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.1%磷酸溶液(12∶88,V/V)为流动相,比较了蓝布正经烘干法、自然晒干法及自然阴干法处理后没食子酸的含量。结果表明,该测定方法重现性好,自然晒干法、自然阴干法及烘干法的平均含量分别为0.75%、0.78%、0.79%,3种方法干燥后含量差异不大。鉴于贵州气候环境多雨阴天,提示烘干法可作为自然干燥法的有效补充,为蓝布正的产地干燥提供依据。

红花檵木品种分类系统

在建立红花木品种资源收集圃的基础上,开展了品种选育历史和遗传稳定性研究;采用二元分类方法,根据品种演化关系和叶形、叶色、毛被、花期、花色、分枝疏密及嫩枝韧皮部、木质部、须根颜色等易于识别的分类特征,编制了品种分类系统检索表,将红花木划分为3大类15个类型41个品种。

红檵木叶色变化的生理生化研究

In order to understand the physiological and biochemical reasons of leafcolor transformation in Loropetalum chinense var. rubrum,three types of L. chinense var. rubrum, Zihei (black purple), Zihong(red purple)and Hongzhe(red_ochre), and L. chinense were taken as materials. The contents of chlorophyll, carotenoid and soluble sugar, and activity of phenylalanine ammonialyase (PLA) in the leaves were measured from early March to June. The results showed that the contents of chlorophyll, carotenoid and soluble sugar increased gradually during the leafcolor changing from red to green, but there were obviously differences among types of Zihei, Zihong and Hongzhe. Anthocyanins contents in Zihe and Zihong leaves maintained high level, so their leaves still kept red when they got mature in early June. Phenylalanine ammonialyase (PLA) activity decreased, and had positive relationship with anthocyanin contents. Some measures such as shading or watering to lower air temperature could be taken to maintain leaves of L. chinense var. rubrum fresh red during summer.

柔毛水杨梅的化学成分

目的研究柔毛水杨梅(Geum japonicumThunb.var.chinenseF.Bolle)诱导早期新生血管形成和心肌细胞再生活性成分。方法采用Diaion HP 20型大孔树脂,Sephadex LH 20以及ToyopearHW 40F柱色谱结合活性追踪分离化合物,运用波谱技术分析确定化合物结构。结果从柔毛水杨梅甲醇提取物的正丁醇部分分离得到2个鞣质类化合物,利用理化性质及波谱分析确定其结构为casuarinin(1)、pedunculagin(2和3),其中pedunculagin(2和3)为一对端基异构体混合物。结论首次从该植物中分离得到化合物casuarinin(1),pedunculagin(2和3)。

蓝布正化学成分的研究

目的对蓝布正Geum japonicum Thumb．var．chinense F．Bolle乙醇提取物的化学成分的研究。方法利用Sephadex LH-20，硅胶柱色谱和硅胶制备薄层色谱等分离方法反复分离纯化，通过理化性质及光谱数据确定化合物的结构。结果从蓝布正的乙醇提取部分分离得到5个化合物，分别鉴定为翻白叶苷A①，17^3-脱镁叶绿素乙酯②，甘油-1-棕榈酸酯③，棕榈酸④，β-谷甾醇⑤。结论化合物1-5均首次从该植物中分离得到。

红花檵木花叶芽变生物学特性

对红花檵木‘密枝玫红’及其3份花叶芽变材料,通过病毒学初步鉴定、叶片解剖、叶片色素含量和光合特性差异分析,研究其花叶现象和部分植物学特性。结果表明:1)‘密枝玫红’及其3份花叶芽变材料的组织浸提液接种的黄豆、黄瓜、辣椒、番茄及红花檵木均生长良好,无病毒浸染症状;透射电镜观察没有看到病毒颗粒;2)3份花叶芽变材料可以通过扦插繁殖保持芽变特性,在湖南地区可露地栽培,抗病虫能力强;3)叶片厚度、上表皮细胞厚度和下表皮细胞厚度在4份供试材料之间差异显著;4)叶片的类胡萝卜素和花色素苷含量在3份花叶芽变材料之间差异显著,且花叶芽变材料的净光合速率高于母株;5)3份花叶芽变材料不仅在叶色方面明显区别于母株,在花色方面也有不同,这些新类型的出现丰富了红花檵木现有种质资源的叶色、花色类型,特别是2号芽变材料的花朵出现明显的红色和乳白色的嵌合,有可能成为新的优良品种资源。

红檵木的3′端延长随机引物扩增DNA(3′-ERPAD)标记

为了对 1 1 6个 1 0 -mer随机引物的RAPD分子标记进行深入了解 ,探讨分子标记与园艺性状的关系 ,筛选出多态性明显、重复性好、亮度大、分子量也较大 ( 1 0 31bp以上 )的 1 0 -mer随机引物 ,在其 3’端添加一任意碱基 ,对 1 4个红木材料和 2个来源不同的生态型木材料进行 3’ -ERPAD标记分析。发现在S2和S35的延伸引物中能够得到最佳扩增结果的引物对是S2 -G +S2-C和S35-A +S35-C ,它们的扩增结果都含有与各自基本引物相同的差异扩增带 ,这些差异带分别是S2 15 0 0 、S2 10 31和S3530 0 0 、S3590 0 、S355 6 0 。通过与园艺性状比较 ,发现S2 15 0 0

红花檵木SRAP反应体系的建立及优化

为了获得红花檵木清晰的SRAP标记图谱,对红花檵木DNA的提取方法以及SRAP-PCR反应体系的影响因子进行了初步探讨,筛选和建立了扩增多态性高、重复性好、带型清晰的DNA模板和SRAP-PCR反应体系,同时提出了应用SRAP分子标记构建红花檵木遗传图谱的可行性.最佳SPAR-PCR反应体系为:在50μL的反应体系中,Mg2+1.6 mmol/μL,dNTPs 1.0 mmol/μL,DNA模板150 ng,DNA聚合酶3.6 U,上下引物各0.20 mmol/L.扩增程序为:94℃预变性4 min,反应前5个循环在94℃1 min、35℃1 min、72℃1 min条件下运行,随后的30个循环复性温度提高到55℃,最后72℃延伸5 min.

红花檵木与檵木花数性表型变异研究

红花木与木花的数性结构有很大差异 ,木 4数性花占 96 2 %(花瓣、雄蕊、退化雄蕊、萼片均为 4数 ) ;野生红花木 4数性花约占 5 0 %;红花木栽培类型以 5数性花居多 ,不同类型品种花的数性结构亦有差异 ,总体变异规律为 :近期栽培品种双面红类 5数性花 >中期栽培品种透骨红类 >早期栽培品种嫩叶红类。利用花的数性表型变异探讨了品种的演化历史和新品种选育的前景。

红花檵木花粉单倍体愈伤组织的诱导与培养

为通过红花檵木单倍体愈伤组织获得红花檵木全基因组序列,在红花檵木‘细叶玫红’减数分裂和小孢子发育进程研究的基础上,初步明确了与小孢子不同发育时期相对应的花蕾外部特征,筛选出‘细叶玫红’单核靠边期花粉进行花药愈伤组织培养。诱导培养基以SNGM为基本培养基,添加2.5 mg/L NAA+0.5 mg/L 6–BA+30 g/L蔗糖;花粉愈伤组织培养的最优培养基为B5培养基,添加物同诱导培养基;花药愈伤组织悬浮培养体系为B5液体培养基,添加物同诱导培养基,转速为110 r/min,培养温度为25℃。经流式细胞仪检测,红花檵木花粉愈伤组织最大吸收峰值约为叶片愈伤组织的50%;用染色体压片计数法观察到叶片愈伤组织细胞染色体数为24条,花粉愈伤组织为12条,单倍体细胞占63.1%,表明红花檵木‘细叶玫红’花粉经诱导培养出的愈伤组织为单倍体愈伤组织。

中华枸杞叶片离体再生技术初探

为探索中华枸杞(Lycium chinense Mill.var.chinense)叶片离体再生技术,通过设置不同消毒时间梯度,研究了0.1%升汞溶液对中华枸杞叶片的消毒效果;以MS为基本培养基,添加6-BA、2,4-D、IAA等激素,研究了不同激素浓度配比对中华枸杞叶片离体再生的影响。结果表明,用0.1%升汞溶液消毒叶片8 min,污染率最低,是中华枸杞叶片的最佳消毒时间。基本培养基中添加1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L2,4-D是诱导愈伤组织的最佳激素浓度配比;基本培养基中添加1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA是诱导愈伤组织分化的最佳激素浓度配比;基本培养基中添加0.2 mg/L IAA+0.6 mg/L NAA是诱导丛生芽生根的适宜激素浓度配比。利用组织培养技术可有效实现中华枸杞叶片离体再生和快速繁殖,为其工厂化育苗和优良品种的选育奠定基础。

RAPD在山麦冬属四种植物分类中的应用

采用随机扩增多态DNA（RAPD）技术对山麦冬属的4种植物进行研究，并以沿阶草OphiopogonbodlinienLevl．为组外比较，用SPSS3．1＋软件对实验数据进行统计分析，得到聚类图。观察所得结果，发现这5种植物被分为两大类群，短葶山麦冬、阔叶山麦冬、山麦冬、湖北山麦冬为一类，沿阶草为另一类，这与经典分类相一致，前4种隶属于山麦冬属，后一种属于沿阶草属；同时，我们发现短葶山麦冬和阔叶山麦冬相对遗传距离较近，结果为阔叶山麦冬是短葶山麦冬的阔叶变种提供分子遗传方面的佐证。

柔毛水杨梅对人微血管内皮细胞增殖、迁移、成管能力的影响

【目的】研究柔毛水杨梅对人微血管内皮细胞增殖、迁移、成管能力的影响。【方法】将不同浓度（0~200 ng/m L）柔毛水杨梅作用于人微血管内皮细胞（HMVEC-Ls）,分别采用MTS法检测细胞的增殖活性,划痕法检测细胞的迁移能力,Matrigel法检测细胞的成管能力以及Western blot法验证低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）、端粒酶逆转录酶（TERT）的表达水平。【结果】MTS结果显示：柔毛水杨梅与HMVEC-Ls共同培养7 d,25~200 ng/m L不同浓度组均可促进HMVEC-Ls增殖,与对照组（0 ng/m L）比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）,以100 ng/m L组促进HMVEC-Ls增殖能力最显著（P〈0.05）。划痕实验结果显示：与对照组比较,50~150 ng/m L组HMVEC-Ls迁移率显著增大,差异均有统计学意义（P〈0.05）,以150 ng/m L组HMVEC-Ls迁移率最高。成管实验结果：与对照组比较,50~150 ng/m L组HMVECLs成管长度显著增加,差异均有统计学意义（P〈0.05）,亦以150 ng/m L组HMVEC-Ls成管长度最大。Western blot检测结果：与对照组比较,150 ng/m L柔毛水杨梅浓度组HIF-1α、TERT和VEGF表达均显著升高（P〈0.05）。【结论】柔毛水杨梅可通过促进人微血管内皮细胞增殖、迁移、管样形成而发挥促血管新生效应,其机制可能与HIF-1α-TERT-VEGF途径介导的血管新生有关。

檵木与红花檵木叶中脂肪酸GC-MS分析

目的:分离和鉴定檵木及其变种红花檵木叶的脂肪酸成分。方法:采用索氏提取法提取脂溶性成分,气相色谱-质谱(GC-MS)联用法对其进行鉴定。结果:从檵木、红花檵木绿叶和红花檵木红叶中各分离鉴定出31、26和30种成分,其中,三种叶片中脂肪酸种类分别为19、14和16种,分别占总峰面积的99.09%、95.31%和98.83%。在三种叶片中含量较高的成分为油酸(30.77%、47.01%、75.28%)、亚油酸(48.49%、29.26%、0%)、棕榈酸(9.83%、8.87%、11.71%)、硬脂酸(3.86%、3.18%、4.88%)、山嵛酸(2.37%、2.17%、2.58%)。结论:檵木和红花檵木叶中含有大量不饱和脂肪酸,可作为中药材原料。

红刺玫愈伤组织诱导再生体系的建立

红刺玫（Rosa multiflora Thunb.var.cathayensis）为蔷薇科蔷薇属野蔷薇的一个变种,半常绿灌木,花色粉红。红刺玫以花期长、耐受高温和高湿气候等特性成为园林绿化的新宠[1]。但红刺玫的单瓣花和花色单一的缺陷限制了其广泛的应用,改良红刺玫花色引起园艺工作者的极大兴趣。

应用RAPD分析红檵木变异类型的遗传多样性

用随机扩增多态性DNA技术(RAPD)分析了27份檵木材料的遗传多样性,包括24个红檵木变异类型,1个长红檵木(檵木的另一变种)及2个原种檵木材料。共筛选了180个随机引物,其中16个引物能产生清晰的扩增带且多态性明显。共产生119条带,平均每个引物产生7.4条,其中多态性带96条,多态性比例为80.7%。对RAPD数据进行UPGMA聚类分析,结果表明:27个样本共分为5个聚群,聚群内各样本之间没有明显的共同特征,但各小聚类组内各样株基本上有相同的叶色或花色。2个檵木原种、长红檵木与8个红檵木类型形成了一个大聚群,2个檵木原种与2个红檵木小叶类型亲缘关系很近。檵木与长红檵木的距离小于檵木与红檵木之间的距离。

红花木耐逆境胁迫研究

为明确红花木的适生环境,对红花木进行酸碱、盐及低温等胁迫处理,结果表明,红花木生长的最适pH值为5～6,在pH值为4的较强酸性环境和pH为7～8的中性或弱碱性环境中,红花木仍能生长,根系比叶片更容易受到pH值的影响.红花木耐盐胁迫性能较强,在盐含量15‰时能正常生长,根系的耐盐能力比叶片稍强些.红花木较耐寒,在-14℃的低温下能安全越冬,其根系的耐寒性强于枝叶,可以推广到年最低气温为-14至-16℃的地区.低于-16℃的地区,则要进行防冻处理.

金边瑞香的扦插生根研究

研究表明金边瑞香插穗所带叶片数与生根关系极大，在插穗体内吸水与蒸腾平衡状况下，一定长度的枝条其叶片数越多，生根率及根系发达程度越高；同一枝条分３段扦插，以梢部生根率及根系发达程度最高，中部次之，基部最差；不同树龄的金边瑞香插穗以“低龄”母株生根最好。

红花檵木叶色变化过程中叶形态特征和色素含量变化

红花檵木是一种在园林绿化上广泛应用的彩叶植物,夏季叶片会出现"返青"现象,导致观赏价值降低。本文对红花檵木红叶和绿叶、红花檵木回复突变的绿叶以及檵木叶片的叶形态特征和色素含量进行了研究,结果表明:①檵木的叶鲜重、干重、含水量和叶面积都比不同类型的红花檵木叶片下降,但是单位面积的鲜重、干重和含水量增加,质体色素含量和花青苷含量及其各类色素间比值与红花檵木转绿和复绿的叶片相近;②回复突变的红花檵木叶鲜重、含水量、比叶重、叶面积和色素特征等特征均与转绿叶片相似;③红叶转绿后,叶鲜重和叶含水量显著下降,但是叶干重显著增加,各种质体色素含量上升,花青苷含量急剧下降,说明红花檵木转绿过程中逐渐失水,并伴随新物质的积累。

中药复方凉茶提取物体外抗HIV活性研究

目的:筛选和评价中药复方凉茶提取物体外对HIV的抑制活性,并初步探讨其作用机制。方法:通过观察病毒致细胞病变和HIV-1 p24抗原表达抑制性实验,采用多株HIV病毒株(实验株、临床分离株、耐药株)对中药复方凉茶水提醇沉物体外抗HIV活性进行评价;通过融合阻断实验、HIV-1慢性感染细胞病毒复制抑制实验和重组HIV-1 RT酶活性抑制实验,初步探讨其抑制HIV复制作用机理。结果:中药复方凉茶提取物对不同HIV-1病毒株均有很好的抑制作用,其EC50值介于12.74～116.87μg/mL,对HIV-2毒株也有一定的抑制活性。中药复方凉茶提取物显示出低细胞毒性,对不同来源的细胞系的CC50值介于564.79～1699.22μg/mL。中药复方凉茶提取物能显著抑制重组HIV-1 RT酶活性,在提取物浓度5.3μg/mL时的抑制率(50%,对正常细胞与慢性感染细胞融合也有一定的抑制作用,EC50为101.94μg/mL。结论:中药复方凉茶提取物体外具有较好的抑制HIV-1复制活性,其作用机制可能是抑制HIV-1逆转录酶活性和病毒进入细胞。