IMMULITE化学发光TSI检测分析性能验证及临床性能评估

目的探讨IMMULITE 2000XPi全自动化学发光免疫分析TSI检测方法的精密度、正确度、线性范围等分析性能,及与Roche Cobas e602电化学发光Anti-TSHR检测方法间的临床性能差异。方法参考美国临床与实验室标准化协会(CLSI)有关文件,分别采用EP-15A3方案验证TSI精密度与正确度,采用EP6-A2方案验证TSI线性区间,并利用EP-17A2方案对TSI和Anti-TSHR进行方法学评估,比较二者临床性能在Graves病中诊断价值的差异。结果IMMULITE 2000XPi TSI正常及异常2个水平的重复性精密度分别为:3.38%、3.14%;中间精密度分别为:3.70%、6.62%;正确度验证区间涵盖验证物质的靶值;线性区间数据分析,二次及三次曲线非线性系数b2和b3均无显著性,数据呈线性。358例临床样本TSI与Anti-TSHR结果比较,灵敏度:89.0%vs 49.0%,配对灵敏度差异:40%(CI:31.9%~47.2%);特异性:94.7%vs 54.7%,配对特异性差异:40%(CI:28.2%~50.5%)。结论IMMULITE 2000XPi全自动发光TSI检测本实验室分析性能均能符合厂家声明,与Roche Cobas e602 Anti-TSHR比较,TSI检测方法在Graves病的辅助诊断中显示出更优的临床性能。

抗甲状腺刺激性免疫球蛋白单链抗体噬菌体抗体库的初建

目的 建立抗甲状腺刺激性免疫球蛋白单链抗体噬菌体抗体库,为进一步获得功能性抗体可变区基因,制备单链抗体和单链抗体-辣根过氧化物酶融合蛋白,用于甲状腺自身免疫性疾病的治疗和检测打下基础。方法 利用RT-PCR技术从分泌抗甲状腺刺激性免疫球蛋白的杂交瘤细胞中扩增出轻重链可变区基因,与噬粒表达载体p3SCMH连接,转化大肠杆菌,以甲状腺刺激性免疫球蛋白阳性患者血清IgG为抗原对表达的噬菌体抗体进行筛选。结果 经过三轮“吸附-洗脱-富集”筛选过程,洗脱下来的噬菌体呈现明显富集,收获率增加了40倍。结论 初步建立了抗甲状腺刺激性免疫球蛋白单链抗体的噬菌体抗体库。