circLRP6靶向miR-2116-3p促进皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、迁移和侵袭的机制

目的探讨环状RNA低密度脂蛋白受体相关蛋白(circLRP)6对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法收集39例皮肤鳞状细胞癌组织和癌旁组织,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测组织中circLRP6和miR-2116-3p表达。体外培养皮肤鳞状细胞癌细胞A431,分别转染si-circLRP6、miR-2116-3p mimics、共转染si-circLRP6与anti-miR-2116-3p后,采用CCK-8和克隆形成实验、划痕实验、Transwell、Western印迹法分别检测细胞增殖、迁移、侵袭及细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达。验证circLRP6和miR-2116-3p的关系。结果皮肤鳞状细胞癌组织中circLRP6表达较癌旁组织明显增高,miR-2116-3p表达较癌旁组织明显下降(P<0.05)。下调circLRP6或上调miR-2116-3p可明显降低A431细胞增殖活性、划痕愈合率和侵袭细胞数及MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05)。结论circLRP6靶向负调控miR-2116-3p,下调miR-2116-3p可减弱敲低circLRP6对A431细胞的影响。circLRP6靶向下调miR-2116-3p促进皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、迁移和侵袭。

miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用

背景:目前多项研究证实了miRNA影响增生性瘢痕的发生发展,Ⅰ型胶原与增生性瘢痕成纤维细胞密切相关,猜测miR-2116-3p也有可能与增生性瘢痕的发生发展有关系。目的:探讨miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用。方法:收集新疆医科大学第一附属医院6例患者的增生性瘢痕组织与6例患者重睑术后正常皮肤组织,采用qRT-PCR法检测miR-2116-3p与Ⅰ型胶原的表达。取增生性瘢痕组织,原代培养第3-6代成纤维细胞,分为阴性对照组、miR-2116-3p模拟物组和miR-2116-3p抑制物组,分别转染对应的序列,用CCK-8法与EdU试剂盒检测细胞增殖活力,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR法与Western blot法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α平滑肌肌动蛋白的基因与蛋白表达,双荧光素酶实验验证其靶向结合。结果与结论:(1)增生性瘢痕组织中miR-2116-3p的mRNA表达量低于正常皮肤组织(P<0.01),Ⅰ型胶原的mRNA表达量低于正常皮肤组织(P<0.01);(2)转染后24,48,72 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞活力降低(P<0.05或P<0.01),miR-2116-3p抑制物组细胞活力升高(P<0.05或P<0.01);转染后48 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞EdU标记数减少(P<0.01),miR-2116-3p抑制物组EdU标记数增加(P<0.05);(3)转染后24 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞划痕面积、细胞凋亡率增加(P<0.01),miR-2116-3p抑制物组细胞划痕面积、细胞凋亡率减少(P<0.01或P<0.05);(4)转染后24h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白的基因与蛋白表达下降(P<0.05或P<0.01),miR-2116-3p抑制物组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达升高(P<0.01);(5)双荧光素酶实验显示,miR-2116-3p能够与Ⅰ型胶原靶向结合;(6)结果表明,人增生性瘢痕中miR-2116-3p表达下调,miR-2116-3p可能通过靶向抑制Ⅰ型胶原的表达抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖、迁移,促进其凋亡。

circMTHFD2靶向miR-2116-3p对肝癌Huh-7细胞变迁的调控机制

目的目前环状RNA亚甲基四氢叶酸脱氢酶基因2(circMTHFD2)对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其与miR-2116-3p的关系尚不清楚。文中研究circMTHFD2、miR-2116-3p在肝癌中的表达情况,探讨circMTHFD2是否靶向miR-2116-3p调控肝癌细胞恶性生物行为。方法收集2018年3月至2019年12月在攀枝花学院附属医院肝胆科接受手术的47例肝癌患者的癌组织和癌旁组织(邻近正常肝组织)。RT-qPCR检测肝癌组织和癌旁组织中circMTHFD2和miR-2116-3p表达,并分析其与临床病理特征的相关性。根据转染情况分为:si-NC组(转染si-NC)、si-circMTHFD2组(转染si-circMTHFD2)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-circMTHFD2组(转染pcDNA-circMTHFD2)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-2116-3p组(转染miR-2116-3p)、si-circMTHFD2+anti-miR-NC组(共转染si-circMTHFD2和anti-miR-NC)、si-circMTHFD2+anti-miR-2116-3p组(共转染si-circMTHFD2和anti-miR-2116-3p),未经转染处理的Huh-7细胞记为NC组。CCK-8法和平板克隆实验检测Huh-7细胞增殖;划痕愈合实验检测Huh-7细胞迁移;Transwell实验检测Huh-7细胞侵袭。构建荧光素酶报告质粒,再次分为:miR-NC+WT-circMTHFD2组(共转染miR-NC和WT-circMTHFD2)、miR-2116-3p mimics+WT-circMTHFD2组(共转染miR-2116-3p mimics和WT-circMTHFD2)、miR-NC+MUT-circMTHFD2组(共转染miR-NC和MUT-circMTHFD2)、miR-2116-3p mimics+MUT-circMTHFD2组(共转染miR-2116-3p mimics和MUT-circMTHFD2)。双荧光素酶实验和RT-qPCR分析circMTHFD2对miR-2116-3p的靶向调控作用。结果肝癌组织中circMTHFD2表达(4.75±0.35)较癌旁组织(1.00±0.08)显著升高(P<0.05),miR-2116-3p表达较癌旁组织显著降低(P<0.05)。si-circMTHFD2组Huh-7细胞活力、克隆形成数与si-NC组比较显著降低(P<0.05)。si-circMTHFD2组Huh-7细胞划痕愈合率、侵袭细胞数、N-cadherin蛋白表达与si-NC组、NC组比较显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达与si-NC组、NC组比较显著升高(P<0.05)。miR-2116-3p mimics+WT-circMTHFD2组Huh-7细胞的相对荧光素酶活性较miR-NC+WT-circMTHFD2组显著下降(P<0.05)。pcDNA-circMTHFD2组Huh-7细胞miR-2116-3p表达水平显著低于pcDNA组(P<0.05);si-circMTHFD2组Huh-7细胞miR-2116-3p表达水平显著高于si-NC组(P<0.05)。结论肝癌组织中circMTHFD2表达上调,miR-2116-3p表达下调,circMTHFD2靶向miR-2116-3p调控肝癌细胞Huh-7增殖、迁移和侵袭。抑制circMTHFD2/miR-2116-3p途径是肝癌的潜在治疗策略。

miR-2116-3p和miR-342-3p对肝细胞癌诊断及预后价值的研究

目的:探讨miR-342-3p和miR-2116-3p在肝细胞癌中的临床价值。方法:该研究纳入进行根治性手术切除的HCC患者的肿瘤组织和瘤旁肝组织样本共57例,采用qRT-PCR法进行了miR-2116-3p、miR-342-3p的表达量测定并分析。结果:miR-2116-3p和miR-342-3p在肝癌组织中表达水平明显低于癌旁组织(P=0.034,P<0.001)。ROC曲线分析二者具有诊断效能(P<0.05)。miR-2116-3p表达量可以作为预测HCC患者不良预后的独立危险因素。结论:在本研究57例样本中,miR-2116-3p以及miR-342-3p在肝炎相关的HCC组织中显著降低,具有HCC诊断价值,为潜在新的标志物;miR-2116-3p为HCC不良预后独立预测因素。

天达-2116对冬小麦生长发育、产量和品质的调节效应

天达 - 2 116是一个新型植物生长调节剂。为了给其在生产上应用推广提供理论依据 ,采用随机区组试验研究了天达 - 2 116对冬小麦生长发育、产量及品质的影响 ,结果表明 ,天达 - 2 116对促进小麦分蘖、加快叶龄进程、促进根系发展、增加叶片中叶绿素含量、降低 MDA(丙二醛 )含量、增加穗粒数、提高产量、改善品质等均有不同的调节效应。

天达-2116对冬小麦后期物质转运及产量的影响

试验表明，植物生长调节剂天达-2116对冬小麦后期物质转运及产量有一定的调控效应。主要表现为：提高千物质积累量和花前物质向籽粒的运转量，增加了小麦灌浆物质的潜在源；籽粒饱满指数增加，改善穗部性状；提高产量，增产幅度为1．50％～7．50％。

天达-2116对冬小麦花后旗叶光合与衰老特性的调节效应

在大田条件下,研究了天达-2116对冬小麦花后旗叶光合与衰老特性的调节效应.结果表明,经天达-2116处理后,冬小麦花后旗叶叶绿素速降期的开始时间延缓,光合作用缓降期的持续时间延长,平均比CK延长了2.6 d,旗叶MDA含量升高受到抑制,叶片失水率降低,保水率增加.

天达-2116浸种对马铃薯的调节效应

应用天达-2116溶液对马铃薯浸种12 h后进行大田栽培试验。结果表明,不同浓度天达-2116溶液浸种对马铃薯生长、产量及品质具有不同的调节效应,该物质能够提高马铃薯根系活力和叶绿素含量、增加产量、提高马铃薯品质。5.0 g.kg-1浓度处理效果显著,产量比对照增23.8%,大薯率达40.50%,干物质、蛋白质、淀粉、还原糖含量分别比对照增21.85%、24.82%、18.36%和23.36%。

天达-2116在烤烟上的应用

为明确新型植物生长调节剂天达-2116在烟草上的应用效果,以晚花K326为供试材料,研究了天达-2116对烤烟农艺性状、经济性状、抗病性、产量及主要化学成分的影响。结果表明,喷施天达-2116能够增强烟株长势,改善烟叶农艺性状和经济性状,增加产量,提高烟株抗病性。其中喷施500倍液天达-2116,烟叶化学成分较为谐调,烟叶经济性状表现较好,产量比对照提高243.1 kg/hm2,产值比对照增加3719.7元/hm2,差异均达显著水平,上中等烟率比对照提高7%。因此,喷施天达-2116可提高烤烟产量和质量。

天达-2116对玉米生长、产量及品质的调节效应

天达-2116是一种新型的植物生长调控剂,为明确天达-2116拌种对玉米的调控效应,以玉米品种兴黄单206为试材,在田间采用随机区组试验,研究了不同浓度天达-2116拌种对玉米生长发育、产量及品质的影响,结果表明,天达-2116拌种能够增强玉米植株长势,增加茎粗,提高玉米株高、穗位高,增加千粒重,提高玉米产量和品质,7.5 g/kg拌种处理的产量比对照增加691.9 kg/hm2,增产率达7.98%。天达-2116在玉米上适宜的拌种浓度应在5～7.5 g/kg之间。

天达-2116拌种对冬小麦新麦18种子萌发和幼苗生长特性的影响

在室内条件下,以冬小麦品种新麦18为材料,以同量清水为对照,研究了天达-2116不同拌种浓度对小麦种子萌发、幼苗素质、叶绿素含量和硝酸还原酶(NR)活力的影响。结果表明,经天达-2116处理后,小麦种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数均有所提高,幼苗素质得到提高,叶绿素含量增加,NR含量始终高于对照,其中均以天达-211670倍拌种的效果较好。

叶面喷施天达-2116对冬小麦穗部性状及产量的影响

为改善小麦穗部性状,减少不孕小穗数,构建合理的产量构成因子。在大田条件下,研究了叶面喷施天达-2116（新型植物生长调节剂）对冬小麦穗部性状及产量的影响。结果表明,叶面喷施天达-2116能够增大籽粒体积,籽粒饱满指数增加;基部和顶部的穗粒数增加;提高产量,增产幅度达2.25%-9.38%。其中,以叶面喷施500倍效果最佳。

GNAS-AS1靶向miR-2116-3p基因表达调控卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制研究

目的:探讨GNAS-AS1对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:RT-qPCR法检测正常人卵巢上皮细胞HUM-CELL-0088及卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3和A2780细胞中GNAS-AS1和miR-2116-3p表达水平。以SKOV3细胞为研究对象,分别转染GNAS-AS1小干扰RNA、miR-2116-3p模拟物或抑制剂,CCK-8法、Transwell和Western blot法分别检测下调GNAS-AS1、上调miR-2116-3p或下调miR-2116-3p对细胞增殖、迁移和侵袭及CyclinD1、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin、Vimentin和E-Cadherin蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证GNAS-AS1与miR-2116-3p调控关系。结果:与HUM-CELL-0088细胞比较,卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3和A2780中GNAS-AS1表达升高(P<0.05),miR-2116-3p表达降低(P<0.05)。下调GNAS-AS1表达或上调miR-2116-3p表达后,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭细胞数及细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05),E-Cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。GNAS-AS1在SKOV3细胞中负调控miR-2116-3p表达。下调miR-2116-3p表达或同时下调GNAS-AS1和miR-2116-3p表达后,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭细胞数及细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9和N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高(P<0.05),E-Cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:GNAS-AS1在卵巢癌细胞系中表达升高,下调其表达可降低卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其可能通过负调控miR-2116-3p表达发挥作用。

天达-2116在酿酒葡萄上的应用效果

以酿酒葡萄品种品丽珠和梅鹿特为试材 ,研究不同时期、不同浓度叶面喷施天达 -2 1 1 6对葡萄新梢生长、光合特性及果实品质的影响 ,结果表明 :喷施适宜的天达 -2 1 1 6可以调节不同葡萄品种的新梢生长状况 ,提高葡萄叶片叶绿素含量 ,促进光合作用 ,还能够改善葡萄果实的品质。

采种甜菜喷施“天达-2116”效果初探

采种甜菜喷施“天达-2116”试验结果表明,以4叶期喷施二次效果最好,甜菜的株高、根长、根重、叶重明显增加,母根增产达23.3%,而且施用成本低,但在使用时应注意不要与碱性物质混用,喷后8h内遇雨应补喷。

天达-2116对冬枣应用效果的研究

天达-2116是一种植物细胞膜稳态剂,通过稳定和保护农作物细胞膜,提高光合效率,促进农作物的根系和茎叶的生长,增强农作物的抗病、抗逆性,从而提高产量,改善品质.为验证其对冬枣的应用效果,进行了本项试验.

“天达-2116”抗病增产剂及其应用技术

“天达-2116”是“复合氨基低聚糖农作物系列抗病增产剂”的商品名，是由山东大学生命科学院研制、山东天达生物技术有限公司开发生产的农作物抗病增产剂，是国家“863计划”第一农业课题和2001年中国科协和重点推广的高科技生物产品。目前已有20多个系列产品推向市场。在全国30个省、市、自治区和美国、德国等38个国家120多种农作物上使用，

天达-2116在果树上的应用效果及施用技术

一、应用效果 1、提高叶片质量：处理树叶片质量明显提高，叶片肥厚、浓绿、光亮，叶片厚度增加5％左右。2008年9月14日在河北省深州市了解到，尹往馈早丰王桃园，连续3年使用除草剂（草甘膦），造成严重落叶、死枝、死树，后采用喷、涂天达-2116，几天后停止落叶，6-7天后发出新叶，新梢叶片正常，重病树转轻，轻病树转正常，桃果得以正常成熟和销售，将欲刨掉的桃园挽救过来。

“天达-2116”对茶树生长的影响与抗逆性试验初报

“天达-2116”植物生长营养液，是山东省国家高技术研究发展计划成果产业化基地——天达生物制药有限公司与山东大学生命科学院联合研制开发的一种绿色植保产品，也是同娄产品中唯一列入国家“863”计划的重点推广产品。为探索“天达-2116”植物细胞稳态剂对茶树生长的促进作用，提高茶叶的自然品质和抗逆能力，为大面积示范推广提供依据，特进行本试验。