circLRP6靶向miR-2116-3p促进皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、迁移和侵袭的机制

目的探讨环状RNA低密度脂蛋白受体相关蛋白(circLRP)6对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法收集39例皮肤鳞状细胞癌组织和癌旁组织,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测组织中circLRP6和miR-2116-3p表达。体外培养皮肤鳞状细胞癌细胞A431,分别转染si-circLRP6、miR-2116-3p mimics、共转染si-circLRP6与anti-miR-2116-3p后,采用CCK-8和克隆形成实验、划痕实验、Transwell、Western印迹法分别检测细胞增殖、迁移、侵袭及细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达。验证circLRP6和miR-2116-3p的关系。结果皮肤鳞状细胞癌组织中circLRP6表达较癌旁组织明显增高,miR-2116-3p表达较癌旁组织明显下降(P<0.05)。下调circLRP6或上调miR-2116-3p可明显降低A431细胞增殖活性、划痕愈合率和侵袭细胞数及MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05)。结论circLRP6靶向负调控miR-2116-3p,下调miR-2116-3p可减弱敲低circLRP6对A431细胞的影响。circLRP6靶向下调miR-2116-3p促进皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、迁移和侵袭。

miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用

背景:目前多项研究证实了miRNA影响增生性瘢痕的发生发展,Ⅰ型胶原与增生性瘢痕成纤维细胞密切相关,猜测miR-2116-3p也有可能与增生性瘢痕的发生发展有关系。目的:探讨miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用。方法:收集新疆医科大学第一附属医院6例患者的增生性瘢痕组织与6例患者重睑术后正常皮肤组织,采用qRT-PCR法检测miR-2116-3p与Ⅰ型胶原的表达。取增生性瘢痕组织,原代培养第3-6代成纤维细胞,分为阴性对照组、miR-2116-3p模拟物组和miR-2116-3p抑制物组,分别转染对应的序列,用CCK-8法与EdU试剂盒检测细胞增殖活力,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR法与Western blot法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α平滑肌肌动蛋白的基因与蛋白表达,双荧光素酶实验验证其靶向结合。结果与结论:(1)增生性瘢痕组织中miR-2116-3p的mRNA表达量低于正常皮肤组织(P<0.01),Ⅰ型胶原的mRNA表达量低于正常皮肤组织(P<0.01);(2)转染后24,48,72 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞活力降低(P<0.05或P<0.01),miR-2116-3p抑制物组细胞活力升高(P<0.05或P<0.01);转染后48 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞EdU标记数减少(P<0.01),miR-2116-3p抑制物组EdU标记数增加(P<0.05);(3)转染后24 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞划痕面积、细胞凋亡率增加(P<0.01),miR-2116-3p抑制物组细胞划痕面积、细胞凋亡率减少(P<0.01或P<0.05);(4)转染后24h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白的基因与蛋白表达下降(P<0.05或P<0.01),miR-2116-3p抑制物组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达升高(P<0.01);(5)双荧光素酶实验显示,miR-2116-3p能够与Ⅰ型胶原靶向结合;(6)结果表明,人增生性瘢痕中miR-2116-3p表达下调,miR-2116-3p可能通过靶向抑制Ⅰ型胶原的表达抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖、迁移,促进其凋亡。

circMTHFD2靶向miR-2116-3p对肝癌Huh-7细胞变迁的调控机制

目的目前环状RNA亚甲基四氢叶酸脱氢酶基因2(circMTHFD2)对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其与miR-2116-3p的关系尚不清楚。文中研究circMTHFD2、miR-2116-3p在肝癌中的表达情况,探讨circMTHFD2是否靶向miR-2116-3p调控肝癌细胞恶性生物行为。方法收集2018年3月至2019年12月在攀枝花学院附属医院肝胆科接受手术的47例肝癌患者的癌组织和癌旁组织(邻近正常肝组织)。RT-qPCR检测肝癌组织和癌旁组织中circMTHFD2和miR-2116-3p表达,并分析其与临床病理特征的相关性。根据转染情况分为:si-NC组(转染si-NC)、si-circMTHFD2组(转染si-circMTHFD2)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-circMTHFD2组(转染pcDNA-circMTHFD2)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-2116-3p组(转染miR-2116-3p)、si-circMTHFD2+anti-miR-NC组(共转染si-circMTHFD2和anti-miR-NC)、si-circMTHFD2+anti-miR-2116-3p组(共转染si-circMTHFD2和anti-miR-2116-3p),未经转染处理的Huh-7细胞记为NC组。CCK-8法和平板克隆实验检测Huh-7细胞增殖;划痕愈合实验检测Huh-7细胞迁移;Transwell实验检测Huh-7细胞侵袭。构建荧光素酶报告质粒,再次分为:miR-NC+WT-circMTHFD2组(共转染miR-NC和WT-circMTHFD2)、miR-2116-3p mimics+WT-circMTHFD2组(共转染miR-2116-3p mimics和WT-circMTHFD2)、miR-NC+MUT-circMTHFD2组(共转染miR-NC和MUT-circMTHFD2)、miR-2116-3p mimics+MUT-circMTHFD2组(共转染miR-2116-3p mimics和MUT-circMTHFD2)。双荧光素酶实验和RT-qPCR分析circMTHFD2对miR-2116-3p的靶向调控作用。结果肝癌组织中circMTHFD2表达(4.75±0.35)较癌旁组织(1.00±0.08)显著升高(P<0.05),miR-2116-3p表达较癌旁组织显著降低(P<0.05)。si-circMTHFD2组Huh-7细胞活力、克隆形成数与si-NC组比较显著降低(P<0.05)。si-circMTHFD2组Huh-7细胞划痕愈合率、侵袭细胞数、N-cadherin蛋白表达与si-NC组、NC组比较显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达与si-NC组、NC组比较显著升高(P<0.05)。miR-2116-3p mimics+WT-circMTHFD2组Huh-7细胞的相对荧光素酶活性较miR-NC+WT-circMTHFD2组显著下降(P<0.05)。pcDNA-circMTHFD2组Huh-7细胞miR-2116-3p表达水平显著低于pcDNA组(P<0.05);si-circMTHFD2组Huh-7细胞miR-2116-3p表达水平显著高于si-NC组(P<0.05)。结论肝癌组织中circMTHFD2表达上调,miR-2116-3p表达下调,circMTHFD2靶向miR-2116-3p调控肝癌细胞Huh-7增殖、迁移和侵袭。抑制circMTHFD2/miR-2116-3p途径是肝癌的潜在治疗策略。

miR-2116-3p和miR-342-3p对肝细胞癌诊断及预后价值的研究

目的:探讨miR-342-3p和miR-2116-3p在肝细胞癌中的临床价值。方法:该研究纳入进行根治性手术切除的HCC患者的肿瘤组织和瘤旁肝组织样本共57例,采用qRT-PCR法进行了miR-2116-3p、miR-342-3p的表达量测定并分析。结果:miR-2116-3p和miR-342-3p在肝癌组织中表达水平明显低于癌旁组织(P=0.034,P<0.001)。ROC曲线分析二者具有诊断效能(P<0.05)。miR-2116-3p表达量可以作为预测HCC患者不良预后的独立危险因素。结论:在本研究57例样本中,miR-2116-3p以及miR-342-3p在肝炎相关的HCC组织中显著降低,具有HCC诊断价值,为潜在新的标志物;miR-2116-3p为HCC不良预后独立预测因素。

天达-2116对冬小麦生长发育、产量和品质的调节效应

天达 - 2 116是一个新型植物生长调节剂。为了给其在生产上应用推广提供理论依据 ,采用随机区组试验研究了天达 - 2 116对冬小麦生长发育、产量及品质的影响 ,结果表明 ,天达 - 2 116对促进小麦分蘖、加快叶龄进程、促进根系发展、增加叶片中叶绿素含量、降低 MDA(丙二醛 )含量、增加穗粒数、提高产量、改善品质等均有不同的调节效应。

植物生长调节剂天达2116对冬小麦产量和品质及生理特性的影响

在大田生产条件下研究了植物生长调节剂天达 2 1 1 6对冬小麦的产量和品质及生理特性的影响。结果表明 ,在适宜喷施浓度下 ,天达 2 1 1 6可显著提高冬小麦产量 ,改善冬小麦的籽粒品质及经济性状 ,促进灌浆期光合作用能力 ,利于光合产物的有效积累分配 ,但喷施浓度不当反而有负效应 ,从而最终影响产量潜力的发挥。故在对天达 2 1 1 6的实际应用推广中应注意其合理用量问题 ,本试验中 ,天达 2 1 1 6在拔节期 +孕穗期、灌浆期的喷施浓度为 0 .1 %时获得最高的产量效益 ,为最适喷施浓度。

天达2116细胞膜稳态剂在陇东旱地玉米上的应用

1999～2002年在陇东旱地玉米上进行"天达2116"细胞膜稳态剂应用效果和方法的小区试验和生产示范研究。结果表明,"天达2116"能使玉米提前拔节和抽雄,增加株高、穗位高度、穗粒数和千粒重,增强花期的抗旱性,显著降低果穗的秃顶率。其中浸种增幅为10.27%～18.91%,最适宜浓度为0.50%;叶面喷施增幅为7.32%～11.7%。另外,不同年份使用"天达2116"玉米增产的主要原因不同。

天达-2116对冬小麦后期物质转运及产量的影响

试验表明，植物生长调节剂天达-2116对冬小麦后期物质转运及产量有一定的调控效应。主要表现为：提高千物质积累量和花前物质向籽粒的运转量，增加了小麦灌浆物质的潜在源；籽粒饱满指数增加，改善穗部性状；提高产量，增产幅度为1．50％～7．50％。

天达-2116对冬小麦花后旗叶光合与衰老特性的调节效应

在大田条件下,研究了天达-2116对冬小麦花后旗叶光合与衰老特性的调节效应.结果表明,经天达-2116处理后,冬小麦花后旗叶叶绿素速降期的开始时间延缓,光合作用缓降期的持续时间延长,平均比CK延长了2.6 d,旗叶MDA含量升高受到抑制,叶片失水率降低,保水率增加.

天达2116在陇东旱地冬小麦上应用效果研究

在陇东旱地冬小麦上进行了4种增产剂3种应用方法的试验和示范。结果表明,天达2116浸种、叶喷 和浸喷复合处理效果最好,较对照增产9．2％～30．9％,增产原因是促进了小麦分蘖和抽穗,增强了抗早性, 减轻了锈病危害,显著增加了有效穗数、穗粒数和千粒重。迦姆丰收浸种和叶喷效果次之,较对照增产10．3％ ～17．0％;KH2PO4和动力2003浸种效果较好,较对照分别增产18．5％和32．1％。

天达-2116浸种对马铃薯的调节效应

应用天达-2116溶液对马铃薯浸种12 h后进行大田栽培试验。结果表明,不同浓度天达-2116溶液浸种对马铃薯生长、产量及品质具有不同的调节效应,该物质能够提高马铃薯根系活力和叶绿素含量、增加产量、提高马铃薯品质。5.0 g.kg-1浓度处理效果显著,产量比对照增23.8%,大薯率达40.50%,干物质、蛋白质、淀粉、还原糖含量分别比对照增21.85%、24.82%、18.36%和23.36%。

天达-2116在烤烟上的应用

为明确新型植物生长调节剂天达-2116在烟草上的应用效果,以晚花K326为供试材料,研究了天达-2116对烤烟农艺性状、经济性状、抗病性、产量及主要化学成分的影响。结果表明,喷施天达-2116能够增强烟株长势,改善烟叶农艺性状和经济性状,增加产量,提高烟株抗病性。其中喷施500倍液天达-2116,烟叶化学成分较为谐调,烟叶经济性状表现较好,产量比对照提高243.1 kg/hm2,产值比对照增加3719.7元/hm2,差异均达显著水平,上中等烟率比对照提高7%。因此,喷施天达-2116可提高烤烟产量和质量。

天达-2116对玉米生长、产量及品质的调节效应

天达-2116是一种新型的植物生长调控剂,为明确天达-2116拌种对玉米的调控效应,以玉米品种兴黄单206为试材,在田间采用随机区组试验,研究了不同浓度天达-2116拌种对玉米生长发育、产量及品质的影响,结果表明,天达-2116拌种能够增强玉米植株长势,增加茎粗,提高玉米株高、穗位高,增加千粒重,提高玉米产量和品质,7.5 g/kg拌种处理的产量比对照增加691.9 kg/hm2,增产率达7.98%。天达-2116在玉米上适宜的拌种浓度应在5～7.5 g/kg之间。

“天达2116”对采种甜菜生理指标及产质量的影响

试验结果表明:在母根栽植发叶后,种株抽薹初期,叶面喷施植物细胞膜稳态剂“天达2116”,对种株根系的伸长、植株增高及叶片增厚、增绿,叶绿素含量增加,以及提高光合速率,增强植株抗逆性,对茎枝增粗、分枝增多,提高结实率和种球饱满度,降低种位密度,促进早熟,优化品质,提高种子成熟度和发芽率等影响较大,可增加种子产量12.5%～14.4%。

天达-2116拌种对冬小麦新麦18种子萌发和幼苗生长特性的影响

在室内条件下,以冬小麦品种新麦18为材料,以同量清水为对照,研究了天达-2116不同拌种浓度对小麦种子萌发、幼苗素质、叶绿素含量和硝酸还原酶(NR)活力的影响。结果表明,经天达-2116处理后,小麦种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数均有所提高,幼苗素质得到提高,叶绿素含量增加,NR含量始终高于对照,其中均以天达-211670倍拌种的效果较好。

叶面喷施天达-2116对冬小麦穗部性状及产量的影响

为改善小麦穗部性状,减少不孕小穗数,构建合理的产量构成因子。在大田条件下,研究了叶面喷施天达-2116（新型植物生长调节剂）对冬小麦穗部性状及产量的影响。结果表明,叶面喷施天达-2116能够增大籽粒体积,籽粒饱满指数增加;基部和顶部的穗粒数增加;提高产量,增产幅度达2.25%-9.38%。其中,以叶面喷施500倍效果最佳。

GNAS-AS1靶向miR-2116-3p基因表达调控卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制研究

目的:探讨GNAS-AS1对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:RT-qPCR法检测正常人卵巢上皮细胞HUM-CELL-0088及卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3和A2780细胞中GNAS-AS1和miR-2116-3p表达水平。以SKOV3细胞为研究对象,分别转染GNAS-AS1小干扰RNA、miR-2116-3p模拟物或抑制剂,CCK-8法、Transwell和Western blot法分别检测下调GNAS-AS1、上调miR-2116-3p或下调miR-2116-3p对细胞增殖、迁移和侵袭及CyclinD1、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin、Vimentin和E-Cadherin蛋白表达的影响。双荧光素酶报告基因实验验证GNAS-AS1与miR-2116-3p调控关系。结果:与HUM-CELL-0088细胞比较,卵巢癌细胞系SKOV3、OVCAR3和A2780中GNAS-AS1表达升高(P<0.05),miR-2116-3p表达降低(P<0.05)。下调GNAS-AS1表达或上调miR-2116-3p表达后,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭细胞数及细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低(P<0.05),E-Cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。GNAS-AS1在SKOV3细胞中负调控miR-2116-3p表达。下调miR-2116-3p表达或同时下调GNAS-AS1和miR-2116-3p表达后,SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭细胞数及细胞中CyclinD1、MMP-2、MMP-9和N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高(P<0.05),E-Cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:GNAS-AS1在卵巢癌细胞系中表达升高,下调其表达可降低卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其可能通过负调控miR-2116-3p表达发挥作用。

luxAB基因标记的K2116L菌株在棉花根际中的定殖

采用三亲本杂交法将发光酶luxAB基因转移进棉花根际促生菌芽胞杆菌K2116菌株中,获得标记菌株K2116L。标记菌株连续传代15次均未发生质粒丢失现象,表明标记菌株具有较好的遗传稳定性;K2116L菌株的生长及其释钾能力未受到标记质粒的影响。K2116L菌株在灭菌和非灭菌的黄褐土、黄潮土和红壤3种土壤中均能长期存活;在灭菌土壤中的数量稍高于非灭菌土壤;在3种土壤中的数量依次为:黄褐土>黄潮土>红壤;在不同土壤中,K2116L菌株具有与土著菌株进行空间和营养竞争的能力。采用根盒试验追踪标记菌株在棉花根部的定殖动态,棉花播种12d时标记菌株在0～2、2～4cm深度根际土壤定殖密度达到最大;18d时在4cm以下的深度达到最高水平。棉花播种18d时标记菌株在所有深度的根表均达到最高定殖水平,0～2cm根段定殖密度为1.76×106cfu.g-1,8cm以下根段达到1.6×105cfu.g-1。补充营养后,根际和根表标记的菌株数量均有明显上升。试验数据显示,随着根的生长标记菌株不断向根尖方向扩散。

“天达2116”对西藏冬青稞生长发育的影响研究

为解决西藏作物生产上易受干旱、霜冻危害,寻找安全环保的新途径,选择"天达2116"对冬青稞进行拌种、叶面喷施、春天复壮、拌种+叶面喷施、拌种+春天复壮、拌种+复壮+叶面喷施等6个处理,研究其在高原这种特殊生态环境条件下对西藏冬青稞生长发育的影响。结果表明,6个处理的青稞籽粒产量均高于对照,依次比对照增产4.84%、29.49%、19.19%、14.35%、19.03%、38.07%,其中"拌种+复壮+叶面喷施"处理青稞的增产幅度最大,达38.07%,主要是通过提高青稞的千粒重、单株有效穗数来提高其产量;6个处理的青稞秸秆产量均高于对照,且增产趋势与子粒增产趋势基本一致;6个处理的青稞子粒每公顷比对照经济效益高324.30元、2047.80元、1293.30元、901.50元、1244.25元、2601.30元。因此,建议"天达2116"在西藏青稞上应用以"叶面喷施"或"拌种+复壮+叶面喷施"2个处理为最佳。

辣根喷施天达2116叶面肥的应用效果

为研究喷施天达2116叶面肥对辣根的应用效果,在辣根生长的不同阶段,喷施不同类型的天达2116叶面肥,比较天达2116叶面肥对辣根地下部形态特征、产量和经济效益的影响,结果表明,喷施不同类型的天达2116叶面肥对辣根地下部形态指标、产量和经济效益均有一定影响,其中壮苗灵+叶菜型+根茎型对辣根的最大根粗、分枝数和平均根质量影响最大,分别比对照增加15.74%、14.61%和36.53%。天达2116壮苗灵+叶菜型+根茎型叶面肥的辣根产量和经济效益分别达到18 166.05 kg·hm^(-2)和30 048元·hm^(-2),比对照分别增加36.53%和91.51%。由此可见,天达2116壮苗灵+叶菜型+根茎型叶面肥组合处理应用效果最好,可有效改善辣根的地下部形态特征,提高产量和经济效益。