Effects of Tiaomaiyin and Its Disassembled Prescription on Expression of L-type Calcium Channel β2 Subunit in Rat Model of Tachyarrhythmia

[Objectives] To study the effects of Tiaomaiyin and its disassembled prescription on expression of L-type calcium channel β2 subunit in rat model of tachyarrhythmia. [Methods] Sixty Wistar rats were randomly divided into model group,Tiaomaiyin prescription group( whole prescription group),main efficacy group of removing heat to cool blood( blood cooling group),and auxiliary drug efficacy group of benefiting qi and nourishing heart( qi benefiting group),auxiliary efficacy group of promoting flow of qi and blood circulation( qi flow promoting group),and amiodarone group( western medicine group). Aconitine was given 7 d after the intragastric administration of the corresponding drugs,and the time of occurrence of arrhythmia in each group was observed. The left ventricular myocardium was subjected to reverse transcription-polymerase chain reaction and Western blotting. [Results] The ventricular premature beats( VPB) time in the whole prescription group and western medicine group was significantly longer than that in the model group. Ventricular tachycardia( VT),ventricular fibrillation( VF),and cardiac arrest( CA) were longer in the whole prescription group,blood cooling group,and western medicine group. The mRNA and protein expression of L-type calcium channel β2 subunit in the whole prescription group,blood cooling group and western medicine group were significantly decreased. [Conclusions] Tiaomaiyin whole prescription group and blood cooling group can reduce the occurrence time of tachyarrhythmia and reduce the expression of LTCC β2 in myocardium.

调脉饮对腹主动脉缩窄致心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响及机制

目的观察中药复方调脉饮对射血分数保留心衰大鼠心肌纤维化的影响及其机制。方法采用缩窄大鼠腹主动脉制备心力衰竭模型,随机分为假手术组、模型组、西药组(依那普利干预)、调脉饮组,从术后第2天开始给药,干预12周。采用左心室插管检测心脏收缩和舒张功能;Masson和免疫组化测定心肌组织胶原含量;放射免疫法检测心肌和血清中血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)含量;蛋白免疫印迹法检测AngⅡ受体1(AngⅡtype 1 receptor,AGTR1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)、纤连蛋白(fibronectin,FN)以及Smad7蛋白。结果与假手术组比,模型组的左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)和左心室开始收缩至左室内压最大变化速率(dp/dtmax)间隔时间(t-dp/dtmax)无明显变化,而左心室平均压显著上升(P<0.01),左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)明显减少(P<0.05),左心室终末舒张压、左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax)和左心室压力下降时间常数均明显升高(P<0.05,P<0.01)。调脉饮组和西药组对左心室收缩功能无明显影响,对左心室舒张指标左心室舒张压、左心室终末舒张压和-dp/dtmax的均值都有降低但无统计学差异。模型组心肌胶原容积分数明显高于假手术组(P<0.01)。调脉饮组和西药组心肌胶原容积分数均明显降低(P<0.01)。与假手术组比较,模型组心肌组织及血中的AngⅡ明显增加(P<0.05),心肌组织中TGF-β明显升高而Smad7蛋白明显降低(P<0.05)。与模型组比较,调脉饮和西药可显著降低血中AngⅡ的含量(P<0.05),同时明显降低心肌组织TGF-β含量,升高Smad7蛋白水平(P<0.05)。结论调脉饮有一定改善舒张功能的趋势,明显改善射血分数保留心衰大鼠的心肌纤维化,其机制可能与降低血中AngⅡ的含量、降低心肌组织TGF-β、升高Smad7蛋白表达含量有关。

调脉饮注射液抗心律失常的实验研究

目的:研究调脉饮注射液的抗实验性心律失常作用,并初步探讨其作用机制。方法:动物随机分为空白对照组、阳性药对照组和调脉饮注射液大、小剂量组,观察:对小鼠吸入氯仿所致室颤的保护作用;大鼠经20%乌拉坦6 mL.kg-1静脉麻醉后开胸,从颈静脉匀速滴入1.0μg.mL-1.min-1乌头碱溶液,豚鼠麻醉后从颈静脉匀速滴入10μg.mL-1.min-1哇巴因溶液,观察出现室性期前收缩、室性心动过速、室颤和心搏停止的时间,然后换算为乌头碱和哇巴因的累积量;大鼠麻醉后开胸,结扎冠状动脉5 min后恢复冠脉供血,造成缺血再灌注,观察心律失常持续时间。实验结束后取心脏制成10%匀浆,测定超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果:调脉饮注射液可以提高室颤阴性率,降低小鼠室颤的发生率(P<0.01);推迟大鼠室性早搏、室速及室颤的发生时间,提高乌头碱的累积用量,具有抗乌头碱心律失常(P<0.05)的作用;推迟豚鼠室性早搏的发生时间,提高哇巴因的累积用量,具有抗哇巴因心律失常(P<0.05)的作用;对心肌缺血再灌注所致心律失常有保护作用,能够缩短心律失常的持续时间,并能明显提高心肌SOD的活性。结论:调脉饮注射液能对抗实验性心律失常,对心肌缺血再灌注所致心律失常有保护作用,其作用机制可能与抑制脂质过氧化,减少自由基损伤有关。

调脉饮及拆方对实验性室性心律失常的作用和分子机制研究

目的:观察调脉饮全方及拆方对2种实验性心律失常动物模型的作用及相关机制。方法:将动物随机分为模型组、调脉饮全方组、凉血清热药组、去凉血清热药组和阳性药组。采用生理记录系统观察调脉饮全方及拆方对氯化钙(CaCl_2)诱发大鼠室性心律失常、哇巴因诱发豚鼠室性心律失常的影响;采用Western Blot法检测豚鼠心肌组织钠,钾-腺苷三磷酸酶(Na^+K^+-ATP)、钙-腺苷三磷酸酶(Ca^(2+)-ATP)和电压门控钠通道5α(sodium voltage-gated channel alpha subunit 5,SCN5A)的蛋白表达。结果:调脉饮全方组和凉血清热药组均可延迟CaCl_2诱发大鼠的室性早搏和死亡时间,调脉饮各组方对于哇巴因诱发豚鼠室性早搏和死亡时间均有一定的延长作用,其中全方组和凉血清热药组延迟死亡时间较为显著,有统计学意义(P<0.05)。调脉饮各组豚鼠心肌Na^+K^+-ATP、Ca^(2+)-ATP的蛋白表达降低,SCN5A的表达无显著差异。结论:调脉饮全方组与凉血清热药组具有对抗实验性室性心律失常的作用。

调脉饮颗粒抗心律失常的多种离子通道靶点作用研究

目的通过研究调脉饮颗粒对心肌细胞动作电位和多种心肌离子通道的作用,探讨调脉饮颗粒抗心律失常的作用靶点。方法采用全细胞膜片钳技术检测0.1 mg/mL和1 mg/mL调脉饮颗粒对重组表达的人源性心脏离子通道靶点快速延迟整流钾通道(rapidly activating delayed rectifier potassuim channel,Ikr,hERG)、钠通道1.5亚型(sodium channel subtype 1.5,NaV1.5)、钙通道1.2亚型(calcium channel subtype 1.2,L-type,CaV1.2)、慢激活延迟整流钾通道(slowly activating delayed rectifier potassuim channel,IKs,KV7.1)、超快延迟整流钾通道(ultra-rapid delayed rectifier potassium channel,IKur,KV1.5)、瞬时外向钾通道(transient outward potassium channel,Ito,KV4.3)、内向整流钾通道(inward rectifier potassium channel,Kir2.1)、ATP敏感性钾通道(ATP sensitive potassium channel,KATP)、钙通道3.2亚型(calcium channel subtype 3.2,T-type,Cav3.2)、乙酰胆碱敏感性钾通道(acetylcholine-sensitive potassium channel, KAch)、超极化激活的阳离子电流亚型2(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated ion channel subtype 2,HCN2)和HCN4以及多能干细胞诱导分化心肌细胞(induced pluripotent stem cell dericed cardiomyocyte,IPSC-CM)动作电位和心脏钠钙交换电流(Na+-Ca2+-exchanger,NCX)的作用。结果 0.1 mg/mL调脉饮颗粒显著抑制CaV3.2(18.94%±2.19%)和NCX(28.46%±9.74%)电流,1 mg/mL调脉饮颗粒显著抑制hERG(43.29%±0.09%),CaV3.2(34.72%±0.61%),KATP(38.44%±2.67%),HCN4(30.64%±1.94%)和NCX(64.25%±25.29%)电流,并显著增加KV7.1(34.49%±4.53%)电流(P<0.05);同时调脉饮颗粒可以引起IPSC-CM动作电位时程延长,延长心脏的有效不应期。结论调脉饮颗粒延长IPSC-CM动作电位时程和对NCX、hERG通道电流的抑制作用可能是其抗心律失常作用的主要机制,抑制CaV3.2钙电流和HCN4窦房结起搏电流,可能起到降低心率的作用,增强KV7.1电流可能抵消抑制hERG通道引起的过度的动作电位时程延长和QT间期延长,其对KATP的抑制作用可能起到心肌缺血的保护作用。

调脉饮拆方抗心律失常作用的研究

目的:观察调脉饮全方及拆方对3种实验性心律失常动物模型的影响。方法:将动物随机分为模型组、调脉饮全方组、凉血清热主药功效组、益气养心辅药功效组、行气通脉辅药功效组和阳性药普罗帕酮组。通过记录Ⅱ导心电图,观察调脉饮全方及拆方对乌头碱诱发大鼠室性心律失常、哇巴因诱发豚鼠室性心律失常、结扎冠状动脉诱发大鼠心律失常3个实验性心律失常模型的作用。结果:调脉饮全方组与凉血清热组对乌头碱致大鼠心律失常、哇巴因诱发豚鼠室性心律失和结扎冠状动脉诱发大鼠心律失常发生率具有抑制作用。结论:调脉饮全方组与凉血清热组具有对抗实验性心律失常的作用。