18种中药提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用比较及其机理

目的探讨18种中药提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用比较及其机理。方法18种药材(黄水枝、苦参、牡丹、地榆、熊果叶、花椒、柿叶、槐米、啤酒花、余甘子、桑叶、山茶花、大黄、白头翁、仙茅、紫苏、岩白菜及洋甘菊)分别以水、醇(70%乙醇)提取得36个提取物,采用体外酶法检测36个提取物对酪氨酸酶活性的抑制率,优选出抑制酪氨酸酶活性最好的样品;检测优选样品分别对酪氨酸单酚酶、多酚酶活性的抑制作用并计算半数抑制浓度(IC_(50)),采用酶动力学考察优选样品对酪氨酸多酚酶活性的反应作用类型。结果抑制酪氨酸酶活性筛选结果显示,当样本浓度为2.0 g/L时,黄水枝、苦参、牡丹、花椒、啤酒花的醇提物及黄水枝、地榆、花椒的水提物抑制酪氨酸酶活性较强,其中黄水枝醇提物和水提物分别为醇提物和水提物中抑制酪氨酸酶活力最佳的样品;黄水枝醇提物和水提物抑制酪氨酸单酚酶活性的IC_(50)值分别为0.283 g/L和0.637 g/L,抑制酪氨酸酶多酚酶活性的IC_(50)值分别为0.248 g/L、0.587 g/L;酶动力学结果显示,黄水枝醇提物抑制酪氨酸多酚酶的作用类型为可逆性竞争-非竞争性抑制,抑制常数K i为0.158 g/L。结论黄水枝醇提物对酪氨酸酶活性的抑制作用最强,其抑制酪氨酸多酚酶的作用类型为可逆性竞争-非竞争性抑制。

黄水枝醇提物对小鼠学习记忆障碍的影响及作用机制

目的探究黄水枝醇提物(以下简称“TPE”)对小鼠学习记忆障碍的影响及作用机制。方法将雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、阳性组(盐酸多奈哌齐4 mg/kg)和TPE低、中、高剂量组(150、300、600 mg/kg),每组10只。给药组小鼠每天灌胃相应药液1次,正常组和模型组小鼠每天灌胃水1次,连续22 d;第17天,给药组与模型组小鼠腹腔注射氢溴酸东莨菪碱(3 mg/kg)以建立学习记忆障碍模型。以Morris水迷宫实验对小鼠空间学习记忆能力进行评估,以苏木精-伊红染色对小鼠海马组织细胞形态进行观察,检测各组小鼠脑组织中乙酰胆碱酯酶(AChE)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平以及海马组织中磷酸化Tau蛋白(p-Tau)、β淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)、淀粉样前体蛋白(APP)的相对表达量。结果阳性组和TPE中、高剂量组小鼠的逃避潜伏期(训练第4~5天)均较模型组显著缩短,穿过平台次数和目标象限运动距离百分比均较模型组显著升高(P<0.05)。与模型组比较,各给药组小鼠海马CA1区中神经元有所增多,固化萎缩状态的神经元有所减少,神经元排列趋于紧密;阳性组和TPE中、高剂量组小鼠脑组织中ChAT、SOD水平均显著升高,AChE、MDA、IL-6、TNF-α水平和海马组织中p-Tau、BACE1、APP蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05)。结论TPE可改善东莨菪碱诱导的小鼠学习记忆障碍,其机制可能与平衡大脑胆碱能系统,缓解氧化应激损伤,改善炎症反应,抑制p-Tau、BACE1、APP蛋白的过度表达有关。