多基原藏药普尔那抗炎活性成分比较研究

目的:多基原藏药普尔那是常用抗炎药,比较不同基原植物中抗炎活性成分绿原酸、芹菜素的含量,为藏医临床的科学选药、用药提供依据。方法:建立藏药普尔那中有效成分的HPLC含量测定方法。结果:普尔那的基原植物为菊科植物结血蒿和唇形科植物川藏香茶菜。结血蒿中绿原酸、芹菜素的含量高于川藏香茶菜,其茎中绿原酸的含量为1404.33μg/g,约为川藏香茶菜茎的16倍;叶中含量1338.61μg/g,约为川藏香茶菜叶的23倍;叶中芹菜素的含量为1040.24μg/g,约为茎含量的8倍;川藏香茶菜茎中则未检测到该成分。结论:通过实验数据分析发现,结血蒿中抗炎活性成分含量更高,其抗炎作用可能更好。研究提出了藏医临床消炎时的最优药材选用建议,为藏药材的临床选择、质量标准制订提供了数据支持。

藏药普尔那的生药鉴定及含量测定研究

目的:通过建立藏药普尔那的生药鉴定和化学成分含量测定方法,为定性鉴别及质量标准制定提供依据。方法:采用性状鉴别和显微鉴别两种方法进行鉴别,采用薄层色谱法、高效液相法对药物化学成分进行研究。结果:通过性状鉴别与显微鉴别确定藏药普尔那原植物的基本性状及纤维、花粉、导管、腺毛、棕色块等的显微特征,不同产地普尔那的性状略有不同,建立的生药鉴定方法简便易操作。含量测定实验发现,化学成分含量存在显著差异。不同产地普尔那中芦丁、绿原酸的含量不同,产自那曲市比如县的含量相对较高,结果呈海拔越高含量越高的趋势。同一产地不同药用部位的普尔那中绿原酸含量略有差别,即地上部分的含量高于根部,与传统藏医药中普尔那入药部位应为地上部分的理论相符。结论:藏药普尔那的现代生药鉴定方法可为其生药鉴定、资源开发利用提供科学依据;建立的高效液相色谱法测定普尔那成分含量的方法简单易操作,方便可靠。截至目前,对于该药材的道地产地、物质基础、质量标准及药效机制尚不明确,应按照我国传统医药“传承精华、守正创新”的发展策略,结合藏医学传统理论和现代科学技术开展更深入的研究,为藏医药的继承发展与传统藏药材的“正本清源”做出贡献。

高效液相色谱法测定藏药结血蒿中熊果酸含量

目的 建立藏药结血蒿药材中活性成分熊果酸的定量分析方法 ，测定熊果酸含量。方法 采用高效液相色谱法（HPLC法），色谱柱为Aglient XDB C18（4．6mm×150mm，5μm），流动相为甲醇-0．1％磷酸溶液，体积流量1．0mL/min，检测波长210nm。结果 熊果酸在60-190μg的质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9997）：平均回收率为93．22％，RSD为2．64％。结论 所建立的HPLC法简便快捷、准确。可用于结血蒿药材成分的定量测定及质量控制，为安全、合理、有效用药及制定藏药结血蒿的药材质量标准提供科学依据。

藏药结血蒿挥发油提取工艺研究

目的通过正交设计优选藏药结血蒿挥发油提取工艺,确定结血蒿挥发油提取最佳工艺。方法采用水蒸气蒸馏法提取结血蒿挥发油,设计L9(34)的正交表,以出油率作为考察指标,考察加水量、浸泡时间、提取时间三个因素对结血蒿挥发油提取的影响。由于结血蒿浸膏也是所需功效成分,因此同时考察三个因素对浸膏得率的影响。结果对结血蒿挥发油出油率,浸泡时间和提取时间有显著影响(P<0.05),有统计学意义,而加水量对其没有显著影响(P>0.05);对结血蒿浸膏得率,加水量对其具有显著影响(P<0.05),而浸泡时间、提取时间对其无显著影响(P>0.05),无统计学意义。经验证最终确定结血蒿挥发油最佳提取工艺为加水量18倍,浸泡1小时,提取5小时,出油率可达0.66%,浸膏得率可达23.0%。结论通过实验研究证明该提取工艺可靠合理,可用于结血蒿挥发油的提取。

藏药结血蒿生药鉴定与质量标准研究

目的对结血蒿进行生药学鉴定,为其鉴别及应用提供科学依据。方法运用药材性状、显微特征、薄层色谱、高效液相色谱对该药材进行鉴定。结果选择50%甲醇作为提取溶剂,超声时间30 min,溶剂用量为样品量的100倍,系统精密度良好,有良好的重复性,至少在12 h内稳定,加样回收较好,测得药材中绿原酸平均含量为1.372 7 mg/g(n=3),RSD=1.99%。。结论结果可为结血蒿生药鉴定、相关质量标准的提高、资源开发利用提供依据。

藏药普尔那对肝癌HepG2细胞增殖作用的实验研究

观察藏药普尔那提取物对HepG2细胞的增殖作用。采用MTT比色法测定不同质量浓度普尔那根茎乙酸乙酯提取物(GE)、根茎水提物(GW)、叶乙酸乙酯提取物(YE)、叶水提物(YW )对体外培养人肝癌细胞HepG2细胞增殖的影响。125μg/mL的低质量浓度GE、500μg/mL的低质量浓度YE对HepG2细胞增殖具有--定抑制作用。普尔那不同提取部位主要体现细胞增殖的促进作用。应进一步研究藏药普尔那的物质基础、药理活性,进行体外、动物毒性实验,且严格控制其临床使用剂量。

藏药普尔那黄酮纯化工艺及抗氧化活性研究

目的:以藏药普尔那为原料,开展其黄酮纯化工艺及抗氧化活性研究。方法:采用静态吸附与解吸试验,考察8种不同型号大孔树脂对普尔那黄酮吸附-解吸性能,筛选出最佳大孔树脂型号,通过对工艺各参数优化,确定黄酮最佳纯化工艺,以体外自由基清除实验、还原力实验和基于斑马鱼模型的体内抗氧化活性为考察指标,比较纯化前后普尔那黄酮抗氧化能力的差异。结果:普尔那黄酮最佳纯化工艺为:采用DA-201-CIV型大孔树脂,在上样液浓度为1.2 mg/mL,上样速度为2 BV/h,上样体积为3 BV,洗脱溶剂为70%乙醇溶液,洗脱速度为2 BV/h的条件下,收集0.7~2 BV洗脱范围内洗脱液,可使普尔那黄酮含量达到(38.60±0.57)%。抗氧化试验结果表明,普尔那黄酮具有较强的清除自由基能力以及良好的还原力,纯化后的普尔那黄酮在一定浓度范围内可抑制由甲硝唑诱导的斑马鱼皮肤荧光细胞氧化损伤。结论:通过大孔树脂纯化,可使普尔那黄酮纯度提升1.84倍,基于体外抗氧化试验及斑马鱼模型,明确了普尔那黄酮的抗氧化能力,其可用于抗氧化剂产品的开发。