替芬泰对HepG2-2.2.15细胞HBV-DNA的抑制作用

目的探讨替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞HBV-DNA的抑制作用。方法以Hep G2-2.2.15细胞作为实验模型,通过MTT法检测替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞的毒性,确定替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞的半数中毒浓度(TC50)。在替芬泰浓度为50μg·ml-1时未见明显的细胞毒性,所以设替芬泰3个剂量组为50、25、12.5μg·ml-1,拉米夫定50μg·ml-1作为阳性对照药,收集给药3、6 d的细胞。用实时荧光定量PCR法检测DNA载量。结果替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞的TC50为180.70μg·ml-1。随着替芬泰药物浓度的增加,Hep G2-2.2.15细胞内的HBV-DNA拷贝数相应减少,并有明显的浓度依赖性。结论替芬泰对Hep G2-2.2.15细胞内HBV-DNA有显著的抑制作用,有效浓度为12.5μg·ml-1,最佳浓度为50μg·ml-1。

替芬泰对2.2.15细胞分泌HBsAg的影响

目的探讨替芬泰(TFT)对2.2.15细胞分泌乙肝表面抗原(HBsAg)的影响。方法以乙肝病毒的脱氧核糖核酸(HBV-DNA)克隆转染人肝癌细胞HepG2 2.2.15细胞系作为实验模型,TFT配制成102、51、25.5μm的药液,另设拉米夫定(LAM)218μm阳性对照组(简称为LAM 218μm组)和病毒对照组,分别加入24孔细胞培养板中,0.6 ml/孔,每浓度4孔。每4天换液1次,第8天收集细胞上清液。采用酶联免疫法(ELISA)检测细胞上清液中HBsAg的滴度,比较各组3个批次的OD值,并记录其平均抑制率。结果LAM 218μm组的OD值明显低于病毒对照组,差异有统计学意义(P<0.05);TFT 102、51、25.5μm组的OD值均明显低于病毒对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。LAM 218μm、TFT 102、51、25.5μm组的平均抑制率分别为37.49%、56.26%、47.33%、36.82%。结论TFT能有效抑制HBsAg分泌,从而发挥出抗HBV的作用,可为进一步研发TFT成为抗HBV新药提供数据支持及参考。