几株光合细菌的分离鉴定及在养殖罗非鱼中的应用

从渔场底泥样品中分离纯化得到5株紫色非硫光合细菌,根据分离菌株的细胞形态结构、光合内膜结构、活细胞光吸收特征以及生理生化特征,参照伯杰氏细菌分类学手册,5个分离株分别属于沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palusteris)和类球红细菌(Rhodobacter spheroides).利用它们的纯培养物及混合培养物进行的水产养殖试验表明,光合细菌可以明显提高养殖鱼的成活率以及生长速度,罗非鱼经过2周的养殖后,加入光合细菌的试验组比没加入光合细菌的对照组(成活率80%)成活率显著提高,最高达100%;平均体长、体重分别提高了3%～5%、20%～30%,效果显著;而同时加入光合细菌纯培养物的试验组和加入混合培养物的试验组,差别不大.

罗非鱼中红霉素残留量的高效液相色谱法的测定

建立了以高效液相色谱法测定罗非鱼中红霉素残留量的方法。提出了以乙腈为提取剂,经过液-液萃取、固相萃取、反萃取等步骤对样品进行分离净化的样品处理方法,该方法准确、灵敏度高。方法的检出限为400μg/kg。

次致死浓度Cu^(2+)对罗非鱼呼吸生理的影响

本文研究次致死浓度Cu^(2+)对罗非鱼呼吸生理的影响。通过比较15天里各污染组鱼呼吸频率、振幅和鳃盖运动的变化,得出罗非鱼异常鳃盖运动频率随Cu^(2+)浓度的增加而递增,咳嗽运动先于驱逐反射(expulsion reflex),提示鱼类的咳嗽运动和驱逐反射可作为次致死浓度下Cu^(2+)污染的敏感生物学监测指标。

Hg^(2+)、Cd^(2+)对鱼类嗅觉的毒性及Ca^(2+)的解毒作用

以罗非鱼为实验对象 ,采用电生理学和组织学方法系统研究了 4种不同浓度的 Hg2 +、Cd2 +污染液对鱼类嗅觉功能和嗅觉器官结构的损伤 ,以及 Ca2 +对 Hg2 +或 Cd2 +的解毒作用 ,结果表明 :1)Hg2 +、Cd2 +均可抑制罗非鱼嗅电图 ( electro- olfactogram,简称 EOG)反应 ,抑制效应随离子浓度的升高和污染时间的延长而增大 .Hg2 +的 IC50 值为 67.73μg/ L,Cd2 +为 33.91μg/ L,Cd2 +的抑制效应大于 Hg2 +.2 ) Ca2 ++Hg2 +、Ca2 ++Cd2 +混合液 (含 80 mg/ L Ca2 +)对 EOG的抑制作用均小于同浓度单一金属离子的抑制作用 ,表明 Ca2 +对 Hg2 +或 Cd2 +均有一定的解毒效应 ,其中 Ca2 +对 Hg2 +的解毒效应大于 Cd2 +.3)光镜研究显示 ,分别浸浴在 10、50 μg/ L Hg2 +或 Cd2 +4种污染液 15d后的罗非鱼嗅上皮均有不同程度的损伤 .在低浓度组 ,损伤主要是非感觉区粘液细胞出现增生现象 ;高浓度组的嗅上皮局部出现空泡化 ,嗅上皮边缘出现缺口并有细胞溢出 .在含 80 mg/ L Ca2 +的 10 μg/ L Hg2 +或Cd2 +混合组中 ,嗅上皮基本无损伤 ;在含同样浓度 Ca2 +的 50μg/ L Hg2 +或 Cd2 +混合组中 ,未见嗅上皮空泡化 。

罗非鱼源无乳链球菌S-核糖基高半胱氨酸酶基因(luxS)的克隆及其推导蛋白的三维结构预测

利用PCR技术对罗非鱼源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)S-核糖基高半胱氨酸酶(luxS)基因全长DNA进行了扩增、克隆和序列测定,采用ExPAsy软件包预测了推导蛋白的特性,利用SwisS-Model服务器建立了luxS三维结构,利用SwisS-PDBviewer软件进行了蛋白质三维结构的分析。预测结果显示,罗非鱼源无乳链球菌luxS推导蛋白包括保守的酶活性中心和锌结合位点,具有影响生物被膜形成、毒力因子调控等特性功能;经拉氏构象图(Ramachandran plot)分析,所构建的luxS的空间结构合理。

红罗非鱼稚鱼与雌雄亲鱼肌肉脂肪酸组成分析

【目的】测定红罗非鱼(Oreochromis sp.)稚鱼、雌雄亲鱼的肌肉脂肪酸组成,为红罗非鱼的生物学研究及科学养殖提供基础资料。【方法】采用常规的化学分析方法及气相色谱技术检测红罗非鱼稚鱼与雌雄亲鱼肌肉脂肪酸的组成及含量变化。【结果】从红罗非鱼稚鱼肌肉中检测出10种脂肪酸,雌雄亲鱼肌肉中检测出16种脂肪酸,以C16:0、C16:1、C18:0、C18:1n-9、C18:2n-6的含量较高,占总脂肪酸含量的84%以上。红罗非鱼肌肉脂肪酸含量因生长期和性别不同而异,C20:5n-3(EPA)和C22:6n-3(DHA)在稚鱼肌肉中未能检出,雌亲鱼肌肉中含有少量(0.47%h和0.65%),雄亲鱼肌肉含量丰富(1.39%和2.33%);红罗非鱼稚鱼和雄性亲鱼肌肉中,脂肪酸含量次序为:饱和脂肪酸含量(ΣSFA)>单不饱和脂肪酸含量(ΣMUFA)>多不饱和脂肪酸含量(ΣPUFA),雌性亲鱼肌肉中:ΣMUFA>ΣSFA>ΣPU-FA。【结论】红罗非鱼稚鱼阶段主要依靠ΣSFA提供能量以满足其生长所需,雌雄亲鱼则依靠ΣMUFA和ΣPUFA来提高其繁殖性能。

马尾藻多糖对奥尼罗非鱼生长性能·血液生化指标和免疫调节的影响

［目的］研究马尾藻多糖对奥尼罗非鱼生长性能、血液生化指标和免疫调节的影响。［方法］采用 奥尼罗非鱼作为试验对象，在饲料中分别添加不同水平的马尾藻多糖（添加量分别为0、0.10%、0.15%和0.20% ），饲养30日后测定奥尼罗非鱼的增重率、特定生长率、饲料系数、血液生化指标和非特异性免疫指标。［结果］浓度为0.10%的马尾藻多糖能极显著提高奥尼罗非鱼的增重率、生长速度和降低饲料系数（P〈0.01），并能显著提高血液中红细胞数、总蛋白和血糖的含量 （P〈0.05）；浓度为0.15%的马尾藻多糖能极显著提高其总蛋白含量（P〈0.01）和显著提高血液中超氧化物歧化酶、溶菌酶和酸性磷酸酶活力（P〈0.05）；浓度为0.20%的马尾藻多糖能极显著提高其血液中总蛋白含量和酸性磷酸酶活力（P〈0.01），并显著提高溶菌酶活力（P〈0.05）。［结论］马尾藻多糖能显著提高奥尼罗非鱼的生长性能和非特异性免疫水平，在奥尼罗非鱼饲料中马尾藻多糖的适宜添加量为0.10%-0.15%。

Ca^(2+)对罗非鱼嗅电图的影响

将 4种不同浓度的Ca2 +溶液灌注罗非鱼嗅上皮 ,观测其对罗非鱼嗅电图 (electroolfactogram ,简称EOG)电位幅值的影响 ,结果表明 :Ca2 +对罗非鱼EOG具双重效应。在一定浓度范围 ( 1～ 4mmol/dm3 )内 ,随着Ca2 +浓度的增大 ,Ca2 +对EOG的效应由抑制逐渐转向促进 ,表现为反应的增大与Ca2 +浓度的提高呈正相关。但当Ca2 +浓度进一步提高到 8mmol/dm3 时 ,EOG反应减小 ,呈现抑制效应。本文探讨了Ca2 +影响EOG的可能机制。

福建水口水库野生罗非鱼年龄鉴定及生长浅析

利用鳞片、矢耳石、脊椎骨3种材料对水口水库野生罗非鱼（Tilapiasp．）606尾进行了年龄鉴定，并对其生长进行了初步分析。结果表明：以鳞片为主，矢耳石、脊椎骨为辅助鉴定的年龄由1～3龄组成；体长与鳞径拟合出直线回归方程为：L=45．991R-3．1241（r2：0．944，N=606）；VonBertalanffy生长方程为：L=262．8（1-e^-0.2（t＋1.28））；Wt=690（1-e^-0.2（t＋1.28）^2.890^6。2龄前随着体长的增加，体重增长缓慢，2—3龄体重较体长增长更为迅速。

星洲银罗非鱼线粒体细胞色素b基因的序列分析

克隆并测定了星洲银罗非鱼（Oreochromis sp．）细胞色素b基因（cytb）的全序列，得到全长1141bp的序列用于分析，用MEGA4．0分析软件与GenBank中的线粒体DNA序列进行序列比较，显示星洲银罗非鱼与其他鱼类的cytb基因的同源性较高，同源度介于83％～93％间；根据星洲银罗非鱼与莫桑比克罗非鱼、尼罗罗非鱼等12种鱼类的cytb基因序列构建的系统进化树，初步确定尼罗罗非鱼、莫桑比克罗非鱼为星洲银罗非鱼的父母本。

罗非鱼肠炎病病原体的分离与鉴定

从患病罗非鱼的血液、肝脏、脾脏中分离到细菌,经理化鉴定,该菌为气单胞菌,动物回归试验阳性,认定该罗非鱼的肠炎病由气单胞菌引起。

罗非鱼肠炎病病原体的分离与鉴定

从患病罗非鱼的血液、肝脏、脾脏中分离到细菌，经理化鉴定，该菌为嗜水气单胞菌，动物回归试验阳性，认定该罗非鱼的肠炎病是由嗜水气单胞菌引起。

红罗非鱼Na^+-K^+-ATPase α基因的克隆及其在不同盐度条件下mRNA表达差异

为获知红罗非鱼(Oreochromis sp.)Na+-K+-ATPaseα基因的全长分子结构及其在不同盐度条件下的表达情况,采用同源克隆及cDNA末端快速扩增(RACE-PCR)方法,首次在红罗非鱼鳃组织中克隆到了全长为3 379 bp的Na+-K+-ATPaseα基因全长cDNA序列,该序列包含3 072 bp的开放阅读框(ORF),143 bp的5'末端非编码区(UTR)和164 bp的3'末端非编码区(UTR),编码1023个氨基酸,预测分子量为112.5 kD,理论等电点为5.26。BLAST分析显示红罗非鱼Na+-K+-ATPaseα基因编码的氨基酸序列与其它已知物种相应基因编码的氨基酸序列的同源性达到97%-99%;系统进化分析显示,红罗非鱼Na+-K+-ATPaseα亚基与萨罗罗非鱼(Sarotherodon melanotheron)和莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus)亲缘关系较近。应用Real-time PCR技术,以β-actin基因为内参,对不同盐度(0、15、25、32 g/L)条件下鳃组织中Na+-K+-ATPaseα基因的表达情况进行了比较分析,结果表明,当盐度为25 g/L时,Na+-K+-ATPaseα基因的表达量达到峰值,而盐度升至32 g/L时,其表达量呈下降趋势;各盐度处理组中,养殖12 h后Na+-K+-ATPaseα基因的mRNA表达量显著上升(P<0.05)并达到最高;随着养殖时间的延长,24 h后该基因mRNA表达量开始降低,但仍然显著高于对照组的表达量值(P<0.05)。

罗非鱼鱼种肠炎病的病理组织学及病原体的研究

本文从病理组织学的角度,研究了罗非鱼鱼种肠炎病的发生与发展,为其诊断与防治奠定了理论基础。结果表明,该病病原体为产气单胞菌。

海口市优势水产品重点养殖区病害调查及分析

2007—2009年,对演丰、三江、灵山、大致坡、红旗、长流、西秀、府城等重点养殖区的罗非鱼(Tilapiasp.)、对虾(Penaeussp.)养殖水体进行现场调查和分析研究,初步摸清了近3年病害的种类、流行、发病特点及造成的损失情况.细菌性、病毒性疾病是罗非鱼、对虾的主要病害,特别是白斑病、红体病、链球菌病、底死症、高温综合症等发病非常普遍.7—9月份为罗非鱼发病高峰期;3—5月份和9—11月份为对虾发病高峰期.多数病害在调查区域均有分布,发病后死亡率较高.2007-2009年海口市水产病害死亡造成的直接经济损失近281万元.

82种中草药对罗非鱼无乳链球菌的抑菌活性研究

采用琼脂扩散法的牛津杯法,测定82种中草药水提物对罗非鱼(Tilapia sp.)无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的体外抑菌活性,并采用纸片法选择几种活性较强的中草药水提物对无乳链球菌进行联合药敏试验。结果显示,黄连、五倍子、红藤、大蒜、北五味子、夏枯草、艾叶、苏木、三棵针、紫苏、土槿皮、老鹤草、石榴皮、大黄、丹参、鱼腥草、虎杖、赤芍、车前草、田基黄20种中草药水提物对无乳链球菌表现出明显的体外抑菌活性,其中黄连、五倍子的体外抑菌效果最显著;中草药联合药敏试验结果表明,五倍子与大黄、艾叶、丹参、苏木、北五味子、红藤、石榴皮、虎杖、黄连表现为协同作用;黄连与大黄、丹参、苏木、红藤表现为协同作用,与艾叶、北五味子、石榴皮表现为拮抗作用;三棵针与大黄、丹参、苏木、红藤、石榴皮、黄连、夏枯草、五倍子表现为协同作用,与艾叶、北五味子、虎杖表现为拮抗作用。

溢多酶P-8901对罗非鱼生长性能的影响

在罗非鱼基础饲料(对照组)中分别添加不同比例溢多酶P-8901,探讨溢多酶P-8901对罗非鱼生产性能的影响。结果表明,在罗非鱼鱼种试验中,与对照组相比,添加100 g.t-1、150 g.t-1、180 g.t-1溢多酶P-8901试验组的饲料效率分别比对照组提高8.48%、7.89%和9.03%(P<0.05);增重率分别提高9.00%、10.33%和9.50%(P<0.01);生长率分别提高4.00%、4.48%和4.13%(P<0.01);蛋白质效率分别提高8.38%、7.75%和8.84%(P<0.01)。养成试验中,添加100 g.t-1、150 g.t-1、180 g.t-1溢多酶P-8901试验组饲料系数分别比对照组提高4.28%、5.41%和6.56%(P<0.05);增重率分别提高6.31%、7.94%和8.82%(P<0.01);生长率分别提高3.68%、4.72%和5.26%(P<0.01);蛋白质效率分别提高5.36%、7.53%和9.24%(P<0.01)。饲养结果表明,添加溢多酶P-8901能够明显提高饲料利用率,提高罗非鱼的生长性能,尤其对鱼种的效果比养成阶段更好。

Ca^（2＋）对罗非鱼EOG影响及其解毒可行性探讨

将四种浓度的Ｃａ２＋溶液和含４ｍｍｏｌ／Ｌ简Ｃａ２＋的不同浓度的Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋及其混合液，分别灌注鱼的嗅囊，研究它们对罗非鱼嗅电图（下简ＥＯＧ）的影响，并初步探讨Ｃａ２＋作为解毒剂的可行性及机制．结果表明：１）在一定浓度Ｃａ２＋范围内，ＥＯＧ振幅随Ｃａ２＋浓度的增加而增大，超此范围，则随浓度的增加而减小；２）Ｃａ２＋能使Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋中毒鱼的ＥＯＧ反应振幅接近正常值，反映其具一定解毒作用，效果顺序为Ｃｕ２＋＞Ｚｎ２＋；３）Ｃａ２＋对Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋混合液也具一定解毒作用．

^(14)C-DDT在罗非鱼体内的积累、分布及降解(英文)

用示踪法研究海水中１４Ｃ－ＤＤＴ在罗非鱼中的积累分布和降解．结果表明，２４ｈ内鱼体所有器官几乎都达到积累高峰，随后缓慢下降．在第２４ｈ，鱼体各器官对ＤＤＴ的积累能力依次为：肝脏，胆囊，肠，脑，鳃，尾鳍，眼，肌肉和鳞片．肝脏单位重量放射性活度为肌肉的５７倍．对ＤＤＴ降解物的ＴＬＣ分析发现，内脏团中在２ｈ内已经有ＤＤＴ的降解物出现．第６ｈ内脏团中可提取物中ＤＤＴ及其残留物的比例分别为：ＤＤＴ３１．０５％，ＤＤＤ４３．５２％，ＤＤＥ５．６０％，ＤＤＭＵ３．３０％，ＤＤＡ２．３２％，原点未知物１４．２１％．提示ＤＤＴ能在罗非鱼中很快的降解，主要降解产物为ＤＤＤ．这和以往在其它鱼类得出的研究结果不同．水中的放射性活度在４８ｈ内快速减少，此后缓慢上升．对水中标记残留物的ＴＬＣ分析发现，在实验后期水中放射性残留物已基本不是ＤＤＴ．第２６ｄ水样的放射性残留物中，ＤＤＴ只占２．９３％，而原点未知物则占８３．１３％．