溴甲烷及其混剂杀灭小麦矮腥黑穗病菌的研究

用溴甲烷、氰、溴甲烷与二氧化碳混剂、溴甲烷与环氧乙烷混剂以及溴甲烷与氰混剂在室内不同条件下对小麦矮腥黑穗病菌(Tilletia controversaKühn,TCK)进行了熏蒸灭菌效果的比较。结果表明:1)溴甲烷对TCK的灭菌效果随温度的升高、处理时间的延长而提高;间隔48 h的2次120 h的熏蒸处理,能显著降低溴甲烷的杀菌临界浓度值;2)溴甲烷与环氧乙烷混剂能完全杀灭TCK病菌,且能显著降低溴甲烷和环氧乙烷的杀菌临界浓度,其混合作用的熏蒸效果较溴甲烷与二氧化碳、氰混合剂好;3)在20℃,50%小麦装载量条件下,180 g.m-3溴甲烷处理120 h或90 g.m-3溴甲烷2次处理各120 h,均可以达到100%的杀灭效果;4)溴甲烷及其混剂对小麦光腥黑穗病菌冬孢子萌发率的影响可作为对TCK冬孢子萌发影响的指示;5)将溴甲烷处理小麦与国产未处理小麦以1∶2比例混配时,小麦中总溴含量可以降低到50 mg.kg-1水平以下,符合美国小麦卫生标准。

小麦矮腥黑粉菌及其近缘种的RPB2基因片段序列分析

以小麦矮腥黑粉菌(Tilletia controversa Kühn)及其近缘种小麦网腥黑粉菌[T.caries(DC.)Tul.]、小麦光腥黑粉菌(T.laevis Kühn)和其他6种黑粉菌的DNA为模板,用RNA聚合酶II的第2亚基RPB2基因的通用引物RPB2-740F/RPB2-1365R进行PCR扩增。结果表明,3种小麦腥黑粉菌均能扩增出617 bp大小的DNA片段,供试的其他6种黑粉菌没有任何扩增产物。利用DNAMAN软件进行序列分析结果表明,3种小麦腥黑粉菌的RPB2蛋白基因序列的相似性为99.08%,存在17个碱基的差异。利用RPB2基因的通用引物作为小麦腥黑粉菌的内置对照引物,与小麦矮腥黑粉菌的特异引物CQUTCK2/CQUTCK3相结合可提高小麦矮腥黑粉菌检测的准确性。

小麦矮化腥黑穗病菌侵染能力的研究

中美专家合作在美国犹他州对小麦矮化腥黑穗病菌的侵染能力进行了研究。试验采用不含抗病基因的小麦品种Cheyanne,播种前用溴甲烷对试验小区进行了熏蒸。接种物为含有多种致病型的冬孢子悬浮液,采用土壤表面喷洒冬孢子悬浮液的方法进行接种,接种密度为每cm20、0.88、8.84、88.45、884.49、8844.89、88449个孢子。结果表明,接种密度为每cm20.88个孢子时即可产生0.21％的穗发病率。对试验数据进行分析后表明,小麦矮化腥黑穗病菌的侵染规律符合侵染概率理论,在本试验条件下,单个孢子的侵染概率为0.0002。

进口小麦中矮腥黑穗病的检疫和灭菌处理

文章介绍了小麦矮腥黑穗病（ＴＣＫ）的特征、危害及检疫方法，对目前国内杀灭小麦矮腥黑穗病的热力灭菌法，γ射线辐照灭活法和环氧乙烷熏蒸法进行了对比，提出了采用环氧乙烷循环熏蒸的方法处理带有小麦矮腥黑穗病菌的进口小麦。

小麦矮腥黑粉菌检疫鉴定研究进展和展望

小麦矮腥黑粉菌(Tilletia controversaKuhn,简称TCK)是我国十分重要对外检疫性有害生物,是麦类腥黑穗病中危害最大、极难防治的国内外病害之一。本文主要综述了近年来对其检疫鉴定的研究进展,并对其发展方向进行展望,以期为实现准确、快速地鉴定提供帮助。

小麦矮腥黑粉菌PCR快速检疫鉴定方法

设计一对特异性引物,对小麦矮腥黑粉菌(TCK)及其近似种进行PCR扩增,结果表明TCK可以扩增出200bp清晰条带,而其近似种未出现条带,该方法可以作为TCK的PCR快速检疫鉴定方法。

小麦矮腥黑粉菌冬孢子萌发和室内人工接种方法的探索

小麦矮腥黑穗病是由小麦矮腥黑粉菌（Tilletia controversa Kühn,TCK）引起的我国对外一类检疫性病害.本项研究对其病菌冬孢子的萌发、人工接种方法进行了室内试验.结果表明,参试菌株冬孢子在土壤浸提液培养基上45～50 d时达到萌发高峰,冬孢子浓度对萌发率有影响,浓度为（100～105）×104个/mL时萌发率最高.因此,可以选用此浓度作为室内TCK冬孢子萌发研究的适宜浓度.在室内进行TCK冬孢子的人工接种方法的研究表明,冬孢子在培养基上萌发后,将麦种放在培养皿盖中的湿滤纸上,置于5℃的培养箱中培养,直到苗长到3～5 cm,然后将麦苗种植到直径为24 cm的塑料盆中,在白天30℃,夜晚18℃的生长箱中培养至植株成熟,可获得7％左右的发病植株.

中美小麦矮腥黑穗病菌鉴定合作研究 Ⅱ.比较形态学研究

对美国135个小麦矮腥黑穗病菌(Tilletia controversa Kuehn,以下简称TCK)及小麦网腥黑穗病菌(T.caries Tul.以下简称TCT)进行的比较形态学研究表明,网脊高度最具有鉴别意义。在中美双方所测的近万个数据中,TCK与TCT菌株的平均网脊高度值很少交叉,两个种在网脊高度上的区别具有种间的规律性和鉴别性。经人工污染样品及市场样品对各种模型的检测证明,根据逻辑方程推导出的临界网脊值可用于市场样品检验中对TCK的判别和鉴定,从而为准确、快速地鉴定进口粮中少量的或混合的TCK、TCT冬孢子提供了新途径。

中美小麦矮腥黑穗病菌鉴定合作研究 Ⅰ.自发荧光显微学特性研究

中美双方为探讨适用于进口粮检疫的小麦矮腥黑穗病菌(Tilletia controversa Kuehn,以下简称TCK)准确简便的鉴定方法,于1989～1992年进行联合试验。本文以美国不同时期和不同地域所收集的小麦矮腥黑穗病菌(TCK)和小麦网腥黑穗病菌(T.caries Tul.,以下简称TCT)共135个菌株为材料,对这两种病菌的自发荧光显微学特性,作了比较研究,建立了数学模型,并在人工污染样品中进行了应用研究,结果表明,自发荧光显微学法和LI-F方程,可以有效地鉴别TCK或TCT菌株,但如应用于鉴别进口粮中混合的或少量的TCK、TCT冬孢子,则其准确率随孢子含量的下降而降低。

小麦矮腥黑穗病菌的单孢接种侵染

采用进口美麦中截获的单个、经萌发的TilletiacontroversaK櫣ｈｎ(TCK)冬孢子人工接种创伤和未创伤的美国硬红冬小麦的胚芽鞘 ,每个胚芽鞘接种一个萌发TCK冬孢子 ,接种后麦苗在 5℃、1 2h光照和黑暗交替条件下培养 2 1或 2 9天 ,然后移植到隔离网室中的塑料周转箱中作常规栽培管理 ,结果均得到了TCK病穗。这是单个萌发TCK冬孢子引起小麦发病的首次报道。本试验结果表明 ,在自然条件下 ,当寄主和环境条件适宜时 ,微量的甚至单个TCK冬孢子就能引起小麦发病。这为开展TCK在我国的定殖可能性研究提供了一定的实验依据。

等离子体对小麦矮腥黑粉菌处理效果的扫描电镜观察

Plasma treatment is a new physical sterilization technology.In this study the teliospores of Tilletia controversa Kühn(TCK) were treated with plasma,and then observed by Scanning Electron Microscope(SEM).The results showed that the teliospores were broken into pieces.It set up some bases for research on plasma treatment of masses of wheat seeds containing teliospores of TCK.