基质细胞衍生因子-1对外周血Tip内皮细胞迁移能力的影响

目的观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对外周血Tip内皮细胞迁移能力的影响。方法采用密度梯度离心法从人外周血获取内皮祖细胞(EPC),并将其定向诱导为Tip内皮细胞。培养液中分别加入不同终浓度的SDF-1培养24小时。Transwell实验检测不同浓度的SDF-1对外周血来源的Tip内皮细胞迁移能力的影响。结果 50ng/ml、100ng/ml、200ng/mlSDF-1均能诱导Tip内皮细胞的迁移,迁移能力明显高于对照组(P<0.05),并且呈浓度依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SDF-1呈浓度依赖性促进干细胞源性Tip内皮细胞的迁移。

SDF-1/CXCR4轴及其抑制剂AMD3100调控Tip内皮细胞成血管效应的研究进展

SDF-1/CXCR4轴近年来被广泛研究,它在调控Tip内皮细胞迁移及成血管等过程中起着重要的作用。AMD3100为SDF-1/CXCR4轴的抑制剂,可以选择性抑制SDF-1与CXCR4结合,在血管形成中受到广泛研究。本文对SDF-1/CXCR4轴及其抑制剂AMD3100在调控Tip内皮细胞成血管效应中的最新研究进展进行综述。

血管内皮细胞在视网膜出芽式血管生成中的作用及其调控机制

出芽式血管生成是视网膜血管生成的主要方式之一,在视网膜正常发育和新生血管性眼病中发挥作用。血管内皮细胞结构和功能的完整性是确保出芽式血管生成的必要条件。血管内皮细胞具有多种亚型,每种细胞群均发挥不同的功能,在生理和病理状态下受到信号通路、代谢、免疫炎症和非编码RNA等多种因素调控。本文就血管内皮细胞在视网膜出芽式血管生成中的作用及其调控机制进行综述。

华支睾吸虫TIP-C基因的序列分析及原核表达

华支睾吸虫(Clonorchis sinensis)是一种重要的人兽共患病原,T细胞免疫调节蛋白(TIP)存在于该虫体生长发育的各个阶段,能够抑制T细胞免疫应答,有助于虫体在宿主体内寄生。为了解华支睾吸虫TIP蛋白的生物信息学及原核表达该蛋白,本研究利用DNAStar软件对GenBank中华支睾吸虫TIP基因编码蛋白的生物信息学进行分析,结果显示华支睾吸虫TIP蛋白表面具有较丰富的B细胞抗原表位且集中在其C段(CsTIP-C),具有多个α-螺旋和β-折叠。采用RT-PCR扩增CsTIP-C片段,构建pET-22b-CsTIP-C重组质粒,经双酶切及测序鉴定后,转化BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后SDS-PAGE检测该蛋白的表达情况,获得的重组蛋白经切胶纯化后进行western blot鉴定。PCR扩增及测序结果显示,扩增得到的CsTIP-C为930 bp,编码309个氨基酸。SDS-PAGE结果显示,CsTIP-C在33 ku处有目的蛋白条带,western blot结果表明该重组蛋白具有良好的反应原性。本研究首次完成了CsTIP-C的克隆表达,并证明该蛋白具有反应原性,为华支睾吸虫病免疫诊断试剂盒的研发奠定了基础。

磷酸肌醇3激酶／蛋白激酶B信号通路在基质细胞衍生因子-1诱导的Tip血管内皮细胞迁移中的作用

目的磷酸肌醇3激酶（P13K）／蛋白激酶B（Akt）信号通路在基质细胞衍生因子-1（SDF-1）诱导的Tip内皮细胞迁移中的作用。方法采用密度梯度离心法从人外周血单个核细胞中分离培养出血管内皮祖细胞，并将其诱导分化为Tip内皮细胞，将TiP内皮细胞随机分成阴性对照组、AMD3100对照组、LY294002对照组、实验组、AMD3100阻断组、LY294002阻断组、外源性PIP3组，Transwell迁移实验检测各组中Tip内皮细胞的迁移数。结果实验组迁移到下室的细胞数量[（100．667±4．509）个／高倍视野]较阴性对照组[（16．333±2．082）个／高倍视野]增多（t=29．415，P=0．003），AMD3100阻断剂组迁移到下室的细胞数[（20．333±0．577）个／高倍视野]与阴性对照组比较，差异无统计学意义（t=2．590，P=0．096），AMD3100阻断剂组和LY294002阻断剂组迁移到下室的细胞数分别为（20．333±0．577）、（40．000±2．646）个／高倍视野，均小于实验组（t=30．603、20．102．P=0．019、0．006），而在AMD3100阻断剂组中外源性的加人磷脂酰肌醇3激酶（P13K）产物PIP3，迁移到下室的细胞数[（99．667±3．786）个／高倍视野]与实验组比较差异无统计学意义（t=0．294，P=1．000）。结论P13K／Akt信号通路是SDF-1诱导Tip血管内皮细胞迁移的下游机制之一。