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Evaluation of <i>in vivo</i>migration of chondrocytes from tissue-engineered cartilage that was subcutaneously transplanted in mouse model
1
作者 Mariko Matsuyama Yuko Fujihara +4 位作者 Ryoko Inaki Satoru Nishizawa Satoru Nagata Tsuyoshi Takato Kazuto Hoshi 《Open Journal of Regenerative Medicine》 2013年第4期93-98,共6页
For regenerative medicine, clarification of in vivo migration of transplanted cells is an important task to secure the safety of transplanted tissue. We had prepared tissue-engineered cartilage consisting of cultured ... For regenerative medicine, clarification of in vivo migration of transplanted cells is an important task to secure the safety of transplanted tissue. We had prepared tissue-engineered cartilage consisting of cultured chondrocytes with collagen hydrogel and a biodegradable porous polymer, and we clinically applied it for treatment of craniofacial anomaly. To verify the safety of this tissue-engineered cartilage, we had syngenically transplanted the tissue-engineered cartilage using chondrocytes harvested from EGFP-transgenic mice into subcutaneous pocket of wild type mice, and investigated localizations of transplanted chondrocytes in various organs including cerebrum, lung, liver, spleen, kidney, auricle, gastrocnemius, and femur. After 8 to 24 weeks of the transplantation, accumulation of cartilaginous matrices was observed in tissue-engineered cartilage, while EGFP-positive transplanted chondrocytes were localized in this area. Otherwise, no EGFP was immunohistochemically detected in each organ, suggesting that subcutaneously-transplanted chondrocytes do not migrate to other organs through the circulation. In cartilage tissue engineering using cultured chondrocytes, risk for migration and circulation of transplanted cells seemed negligible, and that ectopic growth of the cells was unlikely to occur, showing that this is safe technique with regard to the in vivo migration of transplanted cells. 展开更多
关键词 cartilage tissue engineering chondrocyte MIGRATION
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The Effects of Extracellular Matrix on Tissue Engineering Construction of Cartilage in Vitro
2
作者 YU Li LI Fa-tao TANG Ming-qiao YAN Wei-qun 《Chinese Journal of Biomedical Engineering(English Edition)》 2006年第2期88-92,共5页
The effects of various cartilage extracellular matrix on the construction of rabbit growth plate cartilage tissue in vitro were studied. The results show that collagen, proteoglycan and hyaluronic acid can promote the... The effects of various cartilage extracellular matrix on the construction of rabbit growth plate cartilage tissue in vitro were studied. The results show that collagen, proteoglycan and hyaluronic acid can promote the growth of cultured chondrocytes but the effects of various cartilage extracellular matrix(ECM)on chondrocyte differentiation are different. Collagen can promote the hypertrophy of chondrocytes while proteoglycan and hyaluronic acid inhibit the transition of mature chondrocytes into hypertrophied chondrocytes. 展开更多
关键词 EXTRACELLULAR matrix tissue engineering cartilage chondrocyte
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A Novel Biomaterial for Cartilage Repair Generated by Self-Assembly: Creation of a Self-Organized Articular Cartilage-Like Tissue
3
作者 Kazuo Yudoh Rie Karasawa 《Journal of Biomaterials and Nanobiotechnology》 2012年第2期125-129,共5页
Recently, attention has been drawn to tissue engineering and other novel techniques aimed at reconstruction of the joint. Regarding articular cartilage tissue engineering, three-dimensional materials created in vitro ... Recently, attention has been drawn to tissue engineering and other novel techniques aimed at reconstruction of the joint. Regarding articular cartilage tissue engineering, three-dimensional materials created in vitro by cultivation of autologous chondrocytes or mesenchymal stem cells with a collagen gel have been implanted to replace defective parts of the articular cartilage in limited cases with the diseases such as trauma or arthritis. However, several passages of chondrocyte culture are required to obtain a sufficient number of cells for tissue engineering. Additionally, several other problems arise including dedifferentiation of chondrocytes during cell culture, which need to be solved from a viewpoint of cellular resources. The purpose of our study is to create a novel biomaterial possessing functions and structures comparable to native hyaline articular cartilage by utilizing the physicochemical properties of the cartilage matrix components themselves, in other words, employing a self-assembly technique instead of using chondrocytes to produce cartilage matrices eventually leading to articular cartilage tissue formation. We verified the conditions and accuracy of the self-organization process and analyzed the resulting micro structure using electron beam microscopy in order to study the technique involved in the self-organization which would be applicable to creation of cartilage-like tissue. We demonstrated that self-assembly of several cartilage components including type II collagen, proteoglycan and hyaluronic acid could construct self-assembled cartilage-like tissues characterized by nano composite structures comparable to human articular cartilage and by low friction coefficients as small as those of native cartilage. 展开更多
关键词 Self Assembly ARTICULAR cartilage tissue engineering chondrocyte
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In vitro and In vivo Evaluation of the Developed PLGA/HAp/Zein Scaffolds for Bone-Cartilage Interface Regeneration 被引量:5
4
作者 LIN Yong Xin DING Zhi Yong +4 位作者 ZHOU Xiao Bin LI Si Tao XIE De Ming LI Zhi Zhong SUN Guo Dong 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2015年第1期1-12,共12页
Objective To investigate the effect of electronspun PLGA/HAp/Zein scaffolds on the repair of cartilage defects. Methods The PLGA/HAp/Zein composite scaffolds were fabricated by electrospinning method. The physiochemic... Objective To investigate the effect of electronspun PLGA/HAp/Zein scaffolds on the repair of cartilage defects. Methods The PLGA/HAp/Zein composite scaffolds were fabricated by electrospinning method. The physiochemical properties and biocompatibility of the scaffolds were separately characterized by scanning electron microscope (SEM), transmission electron microscope (TEM), and fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUC-MSCs) culture and animal experiments. Results The prepared PLGA/HAp/Zein scaffolds showed fibrous structure with homogenous distribution, hUC-MSCs could attach to and grow well on PLGA/HAp/Zein scaffolds, and there was no significant difference between cell proliferation on scaffolds and that without scaffolds (P〉0.05). The PLGA/HAp/Zein scaffolds possessed excellent ability to promote in vivo cartilage formation. Moreover, there was a large amount of immature chondrocytes and matrix with cartilage lacuna on PLGA/HAp/Zein scaffolds. Conclusion The data suggest that the PLGA/HAp/Zein scaffolds possess good biocompatibility, which are anticipated to be potentially applied in cartilage tissue engineering and reconstruction. 展开更多
关键词 hUC-MSCs ELECTROSPUN PLGA/HAp/Zein grafts cartilage tissue engineering chondrocyte
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A HYBRID SCAFFOLD OF POLY(LACTIDE-CO-GLYCOLIDE) SPONGE FILLED WITH FIBRIN GEL FOR CARTILAGE TISSUE ENGINEERING
5
作者 高长有 《Chinese Journal of Polymer Science》 SCIE CAS CSCD 2011年第2期233-240,共8页
The poly(lactide-co-glycolide)(PLGA) sponge fabricated by a gelatin porogen leaching method was filled with fibrin gel to obtain a hybrid scaffold for chondrocytes culture in vitro.The fibrin gel evenly distribute... The poly(lactide-co-glycolide)(PLGA) sponge fabricated by a gelatin porogen leaching method was filled with fibrin gel to obtain a hybrid scaffold for chondrocytes culture in vitro.The fibrin gel evenly distributed in the hybrid scaffold with visible fibrinogen fibers after drying.In vitro culture it was found that in the hybrid scaffold the chondrocytes distributed more evenly and kept a round morphology as that in the normal cartilage.Although the chondrocytes seeded in the control PLGA sponges showed similar proliferation behavior with that in the hybrid scaffolds,they were remarkably elongated,forming a fibroblast-like morphology.Moreover,a larger amount of glycosaminoglycans was secreted in the hybrid scaffolds than that in the PLGA sponges after in vitro culture of chondrocytes for 4 weeks.The results suggest that the fibrin/PLGA hybrid scaffold may be favorably applied for cartilage tissue engineering. 展开更多
关键词 cartilage tissue engineering PLGA sponge Fibrin gel chondrocyteS
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细胞复合β-磷酸三钙生物陶瓷修复软骨缺损的实验研究 被引量:9
6
作者 张磊 孙水 +1 位作者 任强 丁远景 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期698-701,共4页
[目的]通过将骨髓间充质干细胞(MCSc)诱导的具有软骨细胞、成骨细胞表型的细胞接种到三维多孔β-磷酸三钙(β-TCP)生物陶瓷支架材料上,体外构建骨软骨复合体,探讨以β-TCP为载体建造组织工程化软骨修复骨软骨缺损的可行性。[方法]将β-... [目的]通过将骨髓间充质干细胞(MCSc)诱导的具有软骨细胞、成骨细胞表型的细胞接种到三维多孔β-磷酸三钙(β-TCP)生物陶瓷支架材料上,体外构建骨软骨复合体,探讨以β-TCP为载体建造组织工程化软骨修复骨软骨缺损的可行性。[方法]将β-TCP多孔陶瓷加工成圆柱状,并将其作为构建人工软骨的细胞支架。在支架材料上分别接种从犬骨髓干细胞培养成的具有软骨细胞、成骨细胞表型的细胞,将细胞-支架复合体共同培养1周后,移植到犬关节软骨缺损处。植入后12、16周末取材,进行大体观察、组织学及组织化学等观察。[结果]复合体体内移植后,在犬关节软骨缺损处有新生软骨形成,形成的软骨基本保持了支架材料原有形态。[结论]β-TCP多孔陶瓷可作为支架材料,复合细胞后具有修复软骨缺损的作用。 展开更多
关键词 组织工程 生物陶瓷 软骨修复 软骨细胞 成骨细胞
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聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯支架复合同种异体软骨细胞修复关节软骨缺损的实验研究 被引量:4
7
作者 岳鹏举 赵建宁 +3 位作者 何志伟 何颉 王金良 郭亭 《医学研究生学报》 CAS 2009年第1期20-23,115,共5页
目的:探讨聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯(PHBV)三维多孔材料作为软骨组织工程支架的可行性及有效性。方法:采用"压片-热处理-粒子析出技术"制备PHBV多孔支架。体外分离培养软骨细胞后接种到PHBV支架体外培养4周,期间扫描电镜观察... 目的:探讨聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯(PHBV)三维多孔材料作为软骨组织工程支架的可行性及有效性。方法:采用"压片-热处理-粒子析出技术"制备PHBV多孔支架。体外分离培养软骨细胞后接种到PHBV支架体外培养4周,期间扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况,然后与单纯PHBV支架同时植入兔膝关节软骨缺损区继续培养4、8、12周后取材,分别行大体、组织学、Ⅱ型胶原免疫组化观察。进行Wakitani评分,观察其体内修复关节缺损效果。结果:电镜观察示软骨细胞在支架上黏附、增殖良好并能分泌细胞外基质,组织学观察示PHBV支架浅层有新生软骨组织形成,于4周后开始形成透明软骨样结构且表面基本平整与宿主整合良好,组织学切片上可见类软骨形成并分泌甲苯胺蓝异染的软骨基质和软骨特异性Ⅱ型胶原。结论:PHBV可以作为软骨组织工程支架材料,能够用于再生修复软骨的缺损。 展开更多
关键词 软骨细胞 修复 关节软骨 组织工程
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同种异体软骨细胞-聚羟基乙酸支架复合物修复甲状软骨缺损 被引量:2
8
作者 乔占清 张俊 +3 位作者 马赛 马振亚 司远征 乔新明 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第12期1711-1717,共7页
背景:将聚羟基乙酸支架与软骨细胞复合,可获得组织工程人工骨。目的:观察同种异体软骨细胞-聚羟基乙酸支架复合物修复乳兔喉甲状软骨缺损的效果。方法:取新西兰成年大白兔20只,构建喉甲状软骨缺损模型后随机分组,实验组于缺损处植入同... 背景:将聚羟基乙酸支架与软骨细胞复合,可获得组织工程人工骨。目的:观察同种异体软骨细胞-聚羟基乙酸支架复合物修复乳兔喉甲状软骨缺损的效果。方法:取新西兰成年大白兔20只,构建喉甲状软骨缺损模型后随机分组,实验组于缺损处植入同种异体软骨细胞-聚羟基乙酸支架复合物,对照组于缺损处植入聚羟基乙酸支架。植入后4,8周进行大体观察、组织学观察。结果与结论:(1)大体观察结果:植入后4周,实验组软骨缺损得到一定的修复,修复区域未出现坏死;对照组缺损区域填充有肌肉和结缔组织。植入后8周,实验组软骨缺损得到进一步修复,修复界限不明显;对照组软骨缺损未得到修复,与周围正常软骨之间存在明显界限。(2)免疫组织化学染色结果:实验组植入后4,8周的Ⅱ型胶原表达均高于对照组(P<0.05)。结果表明同种异体软骨细胞-聚羟基乙酸支架复合物可促进乳兔喉甲状软骨缺损的修复。 展开更多
关键词 甲状软骨 软骨细胞 组织工程 生物材料 软骨生物材料 喉甲状软骨 软骨缺损 同种异体软骨细胞 聚羟基乙酸
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Pluronic F-127负载同种异体软骨细胞修复兔全厚关节软骨缺损的实验研究 被引量:8
9
作者 翟喜成 王英振 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2003年第15期1053-1055,共3页
目的:探讨Pluronic F-127作为软骨细胞移植载体的可行性。方法:将培养的软骨细胞与20%的Pluronic F-127的混合,移植到兔膝关节软骨缺损处。在移植后4、8、12周对缺损的修复情况进行大体、光镜组织学评估和电镜观察。结果:移植的软骨细... 目的:探讨Pluronic F-127作为软骨细胞移植载体的可行性。方法:将培养的软骨细胞与20%的Pluronic F-127的混合,移植到兔膝关节软骨缺损处。在移植后4、8、12周对缺损的修复情况进行大体、光镜组织学评估和电镜观察。结果:移植的软骨细胞在载体中生长良好,形成了透明软骨。扫描电镜下可见多数成熟的透明软骨细胞。Pluronic F-127平均降解时间为6~8周,与正常软骨的再生速度基本一致。根据Wakitani制定的评分标准,采用盲法对修复质量作出评价。Pluronic F-127组和对照组的组织学评分在各个时期无显著的差异(P>0.001),而软骨细胞-载体复合体组和对照组相比在各个时期均存在显著的差异(P<0.001)。结论:Pluronic F-127可作为工程化软骨细胞安全有效的载体。 展开更多
关键词 软骨缺损 软骨细胞 组织工程 载体
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可降解高分子丙交酯-乙交酯共聚物(PLGA)三维支架的细胞相容性和鼻软骨组织工程 被引量:5
10
作者 章培标 武汉 +3 位作者 王新 庄秀丽 景遐斌 陈学思 《组织工程与重建外科杂志》 2006年第2期88-91,共3页
目的探讨可生物降解丙交酯-乙交酯共聚物(PLGA)(80∶20)三维多孔支架生物相容性及用于构建组织工程鼻软骨可行性,为临床鼻软骨缺损的修复提供新来源。方法体外分离培养新生兔关节软骨细胞,采用计算机形态分析和MTT法检测兔软骨细胞在PLG... 目的探讨可生物降解丙交酯-乙交酯共聚物(PLGA)(80∶20)三维多孔支架生物相容性及用于构建组织工程鼻软骨可行性,为临床鼻软骨缺损的修复提供新来源。方法体外分离培养新生兔关节软骨细胞,采用计算机形态分析和MTT法检测兔软骨细胞在PLGA膜和支架表面粘附、扩展和增殖情况。将培养扩增的兔软骨细胞,按6×106cells/ml浓度接种于预加工的人鼻软骨外形PLGA多孔支架内,抗坏血酸体外诱导培养4周,形成软骨样组织,倒置显微镜、组织切片、扫描电镜观察人工软骨的组织形态结构。结果培养开始阶段,软骨细胞在PLGA膜表面粘附较差,以后逐渐增高,24小时接近于对照组;MTT法结果显示,软骨细胞在PLGA支架内培养7天时细胞绝对数量明显增加,而相对增殖率逐渐下降。肉眼观察,培养物为人鼻软骨外形的透明软骨样组织,具有一定弹性和硬度,表面有大量软骨基质形成;倒置显微镜下可见人工软骨周围有大量软骨细胞聚集和细胞外基质形成。组织切片及扫描电镜分析,多孔支架材料的网孔不完整,孔内有大量软骨细胞和细胞外基质,可见典型软骨陷窝样结构。结论可生物降解PLGA制备的三维多孔支架具有较好生物相容性和可塑性,可用于组织工程鼻软骨体外构建,具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 可降解高分子 丙交酯 乙交酯共聚物 三维支架 细胞相容性 软骨组织工程 In Vitro 兔软骨细胞 三维多孔支架 鼻软骨 体外诱导培养 细胞外基质 生物相容性 可生物降解 倒置显微镜 组织切片 人工软骨 表面粘附 体外分离培养 扫描电镜观察
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软骨细胞微载体(Cytodex-3)平板三维培养扩增的实验研究
11
作者 赵斌 郝彤 +1 位作者 邢更彦 张仲文 《生物骨科材料与临床研究》 CAS 2009年第3期12-17,共6页
目的通过在微载体上进行平板培养扩增软骨细胞,并结合液态壳聚糖构建组织工程软骨。方法比较兔软骨细胞在单层培养与微载体上进行三维培养扩增软骨细胞的再分化能力。通过酶解法消化幼兔膝关节软骨后,得到种子细胞,分别进行单层和微载... 目的通过在微载体上进行平板培养扩增软骨细胞,并结合液态壳聚糖构建组织工程软骨。方法比较兔软骨细胞在单层培养与微载体上进行三维培养扩增软骨细胞的再分化能力。通过酶解法消化幼兔膝关节软骨后,得到种子细胞,分别进行单层和微载体三维培养扩增。通过评价细胞活性,倍增时间分析培养效果。并进行体外球型培养评价软骨细胞再分化能力,进行了糖胺多糖的定量生化分析。三维培养扩增软骨细胞与壳聚糖复合构建组织工程软骨,培养21天后通过组织学特种染色鉴定构建组织特性。结果微载体培养的软骨细胞可以保持良好活力和再分化能力,与单层培养体系相比较,糖胺多糖的定量生化分析(30.417±1.116ugGAG/mg样本)和(45.122±1.239ugGAG/mg样本)的差异具有统计学意义(P﹤0.05)。结论在微载体上进行三维培养扩增软骨细胞可以加强细胞再分化能力。软骨细胞与壳聚糖合成后,可以在体外形成形态稳定的组织工程软骨。 展开更多
关键词 软骨细胞 微载体壳聚糖 组织工程软骨
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PhaP-RGD融合蛋白修饰的PHBHHx与人鼻中隔软骨细胞的生物相容性研究
12
作者 常会敏 高天喜 +3 位作者 王正辉 卢晓云 吴宝俊 张向红 《组织工程与重建外科杂志》 2013年第6期319-323,共5页
目的观察经PhaP-RGD融合蛋白修饰的3-羟基丁酸和3-羟基己酸的共聚酯(PHBHHx)生物材料与人鼻中隔软骨细胞的生物相容性。方法体外培养人鼻中隔软骨细胞,接种于经PhaP-RGD融合蛋白修饰的PHBHHx膜性材料上进行体外培养,通过MTT比色法、DAP... 目的观察经PhaP-RGD融合蛋白修饰的3-羟基丁酸和3-羟基己酸的共聚酯(PHBHHx)生物材料与人鼻中隔软骨细胞的生物相容性。方法体外培养人鼻中隔软骨细胞,接种于经PhaP-RGD融合蛋白修饰的PHBHHx膜性材料上进行体外培养,通过MTT比色法、DAPI染色、扫描电镜、甲苯胺蓝染色等实验方法观察在体外条件下生物修饰后的PHBHHx膜与鼻中隔软骨细胞的生物相容性。结果经PhaP-RGD融合蛋白修饰的PHBHHx膜表面接触角变小,亲水性增加;人鼻中隔软骨细胞在蛋白修饰后的生物膜材料表面能保持较高的增殖率;经蛋白修饰的PHBHHx膜表面的软骨细胞活力明显高于细胞培养板及未经蛋白修饰的PHBHHx膜上的软骨细胞;甲苯氨蓝染色发现经PhaP-RGD修饰的PHBHHx膜能促进软骨细胞分泌胞外基质糖胺多糖。结论经PhaP-RGD融合蛋白修饰的PHBHHx与软骨细胞的生物相容性良好,是一种较理想的软骨组织工程支架材料。 展开更多
关键词 PhaP—RGD融合蛋白 3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯 人鼻中隔软骨细胞 组织工程
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大豆异黄酮对负载于脱细胞羊膜上软骨细胞增殖及其IGF-1 mRNA基因表达的影响 被引量:1
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作者 郭小明 赵文君 +1 位作者 白人骁 邢国胜 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期921-925,共5页
目的观察大豆异黄酮对负载于脱细胞羊膜上的软骨细胞增殖及其胰岛素样生子因子-1(IGF-1)mRNA基因表达的影响,为组织工程软骨的临床应用奠定基础。方法无菌条件下酶消化法分离、培养新生兔软骨细胞;酶消化法和物理法无菌制备脱细胞羊膜;... 目的观察大豆异黄酮对负载于脱细胞羊膜上的软骨细胞增殖及其胰岛素样生子因子-1(IGF-1)mRNA基因表达的影响,为组织工程软骨的临床应用奠定基础。方法无菌条件下酶消化法分离、培养新生兔软骨细胞;酶消化法和物理法无菌制备脱细胞羊膜;取第三代软骨细胞接种到脱细胞羊膜上。实验组分别加入含10-9、10-8、10-7mol/L的大豆异黄酮DMEM/F-12培养液,对照组为DMEM/F-12培养液。亚甲蓝染色观察羊膜经酶消化法结合物理法脱细胞的程度、倒置显微镜下观察分离的软骨细胞及其复合到羊膜上的形态,甲苯胺蓝染色观察软骨细胞与脱细胞羊膜的复合。MTT法检测各组软骨细胞增殖率,RT-PCR方法定量检测各组软骨细胞IGF-1 mRNA基因表达量。结果原代分离、贴壁的软骨细胞多呈三角型、梭型,培养至5 d时,铺满瓶底,呈"铺路石"状。亚甲蓝染色显示羊膜脱细胞后膜上未见异染蓝色细胞。第三代软骨细胞接种到脱细胞羊膜1 d后,可见部分软骨细胞伸出伪足,细胞呈圆形或三角形。甲苯胺蓝染色显示软骨细胞复合在脱细胞羊膜上4 d后,细胞形态无明显改变,形态多为三角型和梭型,基质蓝染,细胞核呈深蓝色。10-9、10-8、10-7mol/L 3个浓度的大豆异黄酮在软骨细胞接种到脱细胞羊膜上4 d后均能促进负载于羊膜上的软骨细胞的增殖,并且10-7mol/L浓度的大豆异黄酮明显高于对照组(P<0.05)。RT-PCR结果显示大豆异黄酮可促进软骨细胞表达IGF-1 mRNA,表达量明显高于对照组(P<0.05),且具有一定的剂量依赖性。结论大豆异黄酮可促进负载于脱细胞羊膜上的软骨细胞的增殖及其IGF-1 mRNA的表达。 展开更多
关键词 大豆异黄酮 软骨细胞 增殖 胰岛素样生长因子-1 组织工程软骨
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力学刺激提高生物3D打印软骨构建物基质的形成 被引量:2
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作者 孙可欣 曾今实 +2 位作者 李佳 蒋海越 刘霞 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第21期3293-3299,共7页
背景:基质分泌不均匀、力学强度不足是影响组织工程构建物在体内形成效果的重要因素,力学刺激是促进细胞外基质分泌的有效手段。目的:探索3D生物打印复合支架在力学加压环境下的生物学表现。方法:采用3D生物打印技术制备软骨细胞-甲基... 背景:基质分泌不均匀、力学强度不足是影响组织工程构建物在体内形成效果的重要因素,力学刺激是促进细胞外基质分泌的有效手段。目的:探索3D生物打印复合支架在力学加压环境下的生物学表现。方法:采用3D生物打印技术制备软骨细胞-甲基丙烯酰胺基明胶复合支架,活死染色观察细胞存活情况。将复合支架置于力学加压生物反应器中进行加压培养,以6孔板中不加压培养的复合支架为对照,活死染色观察细胞存活情况,组织学染色观察复合支架体外软骨形成情况,qRT-PCR检测成软骨相关基因mRNA的相对表达量。将加压与不加压复合支架分别植入裸鼠皮下,5周后取材,组织学观察软骨形成情况。结果与结论:①复合支架外观呈现清晰的网格状结构,体外培养1,4,7 d时,支架形态稳定、结构清晰,细胞存活率均在90%以上;②培养2周后,加压组复合支架中的细胞存活率低于不加压组(P<0.05);苏木精-伊红染色显示两组复合支架均有明显的软骨陷窝结构,细胞在材料中分布较均匀,加压组复合支架的材料间空隙内有更多新生软骨组织形成;番红O染色显示两组均可见红色软骨基质形成,加压组细胞周基质染色更深;Ⅰ型胶原免疫组织化学染色显示,加压组着色更为明显;加压组弹性蛋白、Ⅱ型胶原的mRNA表达高于不加压组(P<0.05);③植入裸鼠皮下5周后,苏木精-伊红染色显示加压组软骨组织形成更为均一,软骨细胞大小均匀,陷窝结构明显;④结果表明,虽然体外加压刺激会引发3D生物打印软骨细胞-甲基丙烯酰胺基明胶复合支架中的细胞死亡,但同时会促进存活细胞向支架空隙间长入,提高其软骨基质相关基因的表达,促进成软骨能力。 展开更多
关键词 3D生物打印 力学刺激 软骨细胞 甲基丙烯酰胺基明胶 组织工程软骨 复合支架
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天然高分子材料水凝胶应用于软骨缺损修复的研究进展
15
作者 马晓航 曾林如 +2 位作者 罗淦 康仪 裘世杰 《中国医药导报》 CAS 2023年第4期47-51,共5页
软骨缺损通常是一种由疾病、创伤以及衰老引起的关节透明软骨的病变,也是骨关节炎(OA)主要的病理特征之一。OA作为一种慢性退行性疾病,一直是临床骨科医生面临的棘手难题。微骨折术、关节软骨成形术及软骨细胞移植等手术方法近年来取得... 软骨缺损通常是一种由疾病、创伤以及衰老引起的关节透明软骨的病变,也是骨关节炎(OA)主要的病理特征之一。OA作为一种慢性退行性疾病,一直是临床骨科医生面临的棘手难题。微骨折术、关节软骨成形术及软骨细胞移植等手术方法近年来取得了较大成功,但尚不能完全治愈软骨损伤,且存在手术禁忌、感染、免疫反应等问题。软骨组织工程的出现使软骨再生成为可能,基于多糖、蛋白质等在内的天然高分子材料拥有出色的生物相容性、降解性及独特的自愈能力,为软骨缺损修复指明了新的方向。本文现对天然高分子材料水凝胶在软骨缺损修复中的应用进行综述,以期为软骨再生提供一定理论参考依据。 展开更多
关键词 天然高分子 水凝胶 软骨 组织工程 骨关节炎 综述
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组织工程化软骨组织形成的最佳细胞浓度和最佳形成时间的实验研究 被引量:38
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作者 夏万尧 曹谊林 +3 位作者 商庆新 陈付国 刘彦春 王倬 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 1999年第4期244-248,共5页
目的研究探讨自体组织工程化软骨在动物自体内形成的最佳细胞浓度和最佳形成时间。方法取贵州香猪部分耳廓软骨组织体外消化分离软骨细胞,与可注射性生物材料Pluronic混合形成复合物,浓度为10、20、30、40、50、6... 目的研究探讨自体组织工程化软骨在动物自体内形成的最佳细胞浓度和最佳形成时间。方法取贵州香猪部分耳廓软骨组织体外消化分离软骨细胞,与可注射性生物材料Pluronic混合形成复合物,浓度为10、20、30、40、50、60、70×106/ml,将细胞-生物材料复合物接种于猪自体腹外侧壁皮下。第6周取材,分别称重,并作HE、SafraninO染色,评价软骨组织形成的最适细胞浓度。参考上述实验结果,制成最适软骨细胞-生物材料复合物,接种到猪自体腹外侧壁皮下,分别在接种后第1、3、6、9和15周取材,大体观察,并作HE、SafraninO染色,确定软骨组织形成的最佳时间。结果在动物自体内形成的软骨组织,与正常软骨组织有相似的组织学特性,形成软骨组织最适细胞浓度为50×106/ml,最佳形成时间是第6周。结论成功地利用组织工程技术在具有免疫功能的自体动物体内形成了软骨组织,并确定了软骨组织形成的最佳细胞接种浓度和接种的软骨组织形成最佳时限。 展开更多
关键词 软骨细胞 软骨细胞 组织工程 细胞浓度
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可注射温固化支架复合异体软骨细胞修复关节软骨缺损的初步研究 被引量:9
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作者 王东武 杨柳 +2 位作者 段小军 李忠 张洪鑫 《重庆医学》 CAS CSCD 2006年第12期1082-1084,1087,共4页
目的探讨可注射性温固化凝胶壳聚糖-甘油磷酸钠(C-GP)复合同种异体软骨细胞在体内形成透明软骨和注入关节腔后修复关节软骨缺损的可行性和有效性。方法将预制的壳聚糖和甘油磷酸钠按一定体积比制成混合液,实验组为支架复合同种异体软骨... 目的探讨可注射性温固化凝胶壳聚糖-甘油磷酸钠(C-GP)复合同种异体软骨细胞在体内形成透明软骨和注入关节腔后修复关节软骨缺损的可行性和有效性。方法将预制的壳聚糖和甘油磷酸钠按一定体积比制成混合液,实验组为支架复合同种异体软骨细胞,设单纯支架和生理盐水为两组对照。注入成年兔的背部皮下和预制关节软骨缺损的关节腔内,复合物在体内37℃形成凝胶,术后4、8、12周分别行大体、组织学(HE、TB)、Ⅱ型胶原免疫组织化学观察,并进行Wakitani评分。观察其体内成软骨和填充并修复关节缺损效果。结果液态C-GP复合物注入体内可形成凝胶,实验组皮下生长4周,组织学观察示典型的透明软骨样结构且分泌基质;C-GP复合细胞注入关节腔可很好地填充关节缺损,并于4周后开始形成透明软骨样结构且表面平整与宿主整合良好,组织学切片上可见类软骨形成并分泌甲苯胺蓝异染的软骨基质和软骨特异性Ⅱ型胶原。结论可注射性C-GP复合软骨细胞体内可形成具有一定形态功能的类软骨组织,能够应用于微创技术再生修复软骨的缺损。 展开更多
关键词 软骨细胞 壳聚糖 甘油磷酸钠 组织工程 修复 关节软骨
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关节软骨缺损修复研究进展 被引量:23
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作者 陈付国 曹谊林 商庆新 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 1998年第5期297-300,共4页
关节软骨缺损是临床常见疑难病症之一。滑膜关节表面缺损后难以修复。现就关节软骨缺损的自发修复、自体或异体移植修复、软骨膜或骨膜移植修复、软骨细胞移植修复,以及三维立体细胞培养及组织工程技术修复等五个方面。
关键词 关节软骨缺损 修复 组织工程 软骨细胞
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体外构建可注射性组织工程软骨的初步研究 被引量:10
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作者 王东武 杨柳 +1 位作者 段小军 李忠 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1145-1147,共3页
目的利用关节软骨细胞复合壳聚糖-磷酸甘油(ch itosan/glycerophosphate,C/GP)凝胶,体外构建可注射性组织工程软骨,为微创方式治疗关节软骨缺损提供依据。方法以体外培养扩增的兔关节软骨细胞为种子细胞,以自制温固化可注射C/GP凝胶为支... 目的利用关节软骨细胞复合壳聚糖-磷酸甘油(ch itosan/glycerophosphate,C/GP)凝胶,体外构建可注射性组织工程软骨,为微创方式治疗关节软骨缺损提供依据。方法以体外培养扩增的兔关节软骨细胞为种子细胞,以自制温固化可注射C/GP凝胶为支架,按5×107/m l细胞浓度复合体外培养。于倒置显微镜下观察细胞形态与分布,四甲基偶氮唑盐(MTT)法计算培养1周时种子细胞存活率,培养4周时样本进行组织学及扫描电镜观察。结果软骨细胞在7∶1(体积分数)C/GP凝胶中保持球形,细胞存活率95%以上;HE染色可见软骨较为典型的陷窝样结构、软骨囊及同源细胞群等现象;甲苯胺蓝异染及免疫组化Ⅱ型胶原染色呈强阳性。结论软骨细胞在C/GP凝胶中可存活并保持分泌软骨基质的功能,形成类软骨组织。温固化可注射性C/GP凝胶能作为软骨组织工程的载体材料。 展开更多
关键词 关节 软骨细胞 壳聚糖 甘油磷酸钠 支架/组织工程
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应用聚羟基丁酸酯支架构建组织工程软骨 被引量:7
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作者 杨维东 胡平 +3 位作者 钱其春 高峰 张晓东 毛天球 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期157-159,共3页
目的 :探索聚羟基丁酸酯支架复合软骨细胞构建软骨组织的可行性和方法。方法 :应用多孔聚羟基丁酸酯 ,孔径为 30 0~ 40 0 μm ,空隙率为 85 % ,经过 10 0mg/L人纤维粘连蛋白的表面修饰 ,接种兔耳廓软骨细胞 ( 4× 10 7/ml) ,以自... 目的 :探索聚羟基丁酸酯支架复合软骨细胞构建软骨组织的可行性和方法。方法 :应用多孔聚羟基丁酸酯 ,孔径为 30 0~ 40 0 μm ,空隙率为 85 % ,经过 10 0mg/L人纤维粘连蛋白的表面修饰 ,接种兔耳廓软骨细胞 ( 4× 10 7/ml) ,以自体细胞移植方式将聚羟基丁酸酯 /软骨细胞复合物植入新西兰兔皮下 ,在移植后第 4、8周进行大体标本、HE染色和番红 O染色观察新生软骨组织的形成情况。对照组为聚羟基丁酸酯支架植入。结果 :实验组显示 ,第 4、8周大体标本外观像软骨组织 ,第 4周组织学观察显示有软骨组织形成 ,但细胞外基质较少 ,第 8周软骨趋向成熟 ,有较多的基质形成。结论 :聚羟基丁酸酯支架材料可以用于组织工程骨的构建。 展开更多
关键词 组织工程 软骨 聚合物 聚羟基丁酸酯支架 颌面外科
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