淋巴瘤患者血液t-PA与PAI-1的变化及其意义

目的 :研究非霍奇金氏淋巴瘤 (non Hodgkin’slymphoma ,NHL)血浆组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)、纤溶酶原激活剂抑制剂 1(PAI 1)的水平与NHL各生理病理参数的关系。方法 :采用ELISA法检测 36例NHL患者血浆t PA、PAI 1的水平。结果 :NHL患者血浆t PA (18.6 9± 15.5 0 )ng/mL及PAI 1(74 .6 1± 19.2 7)ng/mL较对照组显著升高 (P均 <0 0 1)。Ⅰ期、Ⅱ期NHL患者血浆t PA (2 7.37± 2 0.0 7)ng/mL高于Ⅲ期、Ⅳ期 (15.0 3±8.80 )ng/mL(P <0.0 5 )。LDH异常的NHL患者PAI 1(77 0 3± 2 5 4 1)ng/mL高于LDH正常的NHL患者(44 .4 0± 19. 0 3)ng/mL(P <0.0 1)。结论 :NHL患者体内t PA、PAI-1的过度表达 ,血浆高t PA水平提示病变处于早期及预后较好。PAI-1血浆水平较高提示预后不良 。

TNF-α对人脐静脉内皮细胞t-PA、PAI-1表达的研究

目的:观察肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activitor,t-PA)及其抑制剂-1(plasminogen activitor inhibitor-1,PAI-1)表达的影响。方法:原代分离HUVECs细胞并进行传代培养,分别以6个TNF-α浓度组(0、1、10、20、50、100 ng·m L-1)处理不同时间(0、1、3、6、12、24 h),酶联免疫吸附分析(ELISA)法测定t-PA、PAI-1抗原的表达;逆转-聚合酶链反应(RTPCR)检测t-PA、PAI-1基因的表达。结果:TNF-α促进PAI-1抗原的表达,并呈剂量和时间依赖关系,在TNF-α10 ng·m L-1作用6 h时最明显(P<0.01);TNF-α促进PAI-1 mRNA的表达,并呈剂量和时间依赖关系,在TNF-α10 ng·m L-1作用3 h时已非常明显(P<0.01),6 h时达到高峰(P<0.01);而TNF-α对HUVECs表达t-PA抗原、mRNA无明显影响。结论:炎症因子TNF-α可能通过上调PAI-1表达而诱发血栓相关疾病。

补阳还五汤有效组分对血管内皮细胞抗血栓功能及蛋白激酶C的影响

目的探讨补阳还五汤及其有效组分生物碱、苷对凝血酶诱导的血管内皮细胞抗血栓功能改变及蛋白激酶C(PKC)活化的影响。方法以凝血酶(10 U/mL)作用于培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304),同时加入药物,24 h后测定上清液中组织型纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平、细胞组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)、凝血酶调节蛋白(TM)mRNA表达及PKCα蛋白表达。结果凝血酶作用内皮细胞后,tPA释放增加(P<0.01),TF、TFPI mRNA表达增强(P<0.05),而PAI-1释放及TM mRNA表达无显著性变化(P>0.05);PKCα表达增强(P<0.05)。补阳还五汤可抑制凝血酶诱导的tPA释放增加(P<0.01),生物碱对tPA释放增加无显著影响(P>0.05);苷(1.25 mg/mL)可使凝血酶诱导的tPA分泌增加(P<0.05);原方、生物碱(2 mg/mL)和苷(5 mg/mL)均可抑制内皮细胞分泌PAI-1(P<0.01)。原方、生物碱(1,2 mg/mL)和苷均可抑制凝血酶诱导的TF mRNA表达增强;生物碱(0.5和1 mg/mL)可抑制TFPI mRNA表达(P<0.05);各药对TM mRNA表达无显著影响;原方、生物碱和苷均可抑制凝血酶诱导的内皮细胞PKCα表达的增强(P<0.01)。PKC激活剂佛波酯(PMA)刺激内皮细胞后,PKCα被激活(P<0.01);PKC抑制剂H7作用于PMA刺激的内皮细胞后,PKCα表达增强不明显,PAR-1受体抑制剂CATG作用于凝血酶刺激的ECV304细胞后,PKCα表达显著抑制(P<0.05)。结论凝血酶可诱导内皮细胞抗血栓性发生变化。补阳还五汤原方、生物碱和苷对凝血酶诱导的血管内皮细胞抗凝、纤溶功能的改变具有调节作用,使血管内皮细胞的抗凝、纤溶作用趋于正常,其作用可能主要是通过抑制凝血酶诱导的PKCα的激活而介导的。生物碱和苷类有效组分可能为该方抗血栓作用的药效物质基础。

重组组织型纤溶酶原激活剂大规模纯化及部分性质的研究

收集产重组组织型纤溶酶原激活剂 (rt PA)的CHO工程细胞灌流培养上清 ,经过Streamline扩张柱床和赖氨酸 Sepharose 4B柱亲和吸附色谱纯化后 ,最后产品的比活性达到 6 0 0 0 0 0IU mg蛋白 ,rt PA总活性回收率在 98%左右 ,经还原SDS PAGE分析主要为高相对分子质量rt PA蛋白 ,HPLC分析达到色谱纯 ,N端 15个氨基酸序列和pI与文献报道的一致。蛋白质印迹实验证实具有t

大鼠心肌缺血及再灌时血浆蛋白C的变化

复制大鼠心肌缺血再灌模型，观察血浆抗凝因子蛋白Ｃ（ＰＣ）的活性变化及血浆ＰＡＩ和ｔ－ＰＡ的活性，同时监测心电图、血清ＬＤＨ、ＳＧＯＴ和心脏病理学改变。结果表明，心肌缺血时ＰＣ活性明显降低（与对照组比Ｐ＜０．０５），随着缺血时间延长，ＰＣ活性呈现进一步下降。此外，ｔ－ＰＡ活性的变化规律与ＰＣ相同，ＰＡＩ则与ＰＣ相反。缺血再灌后ＰＣ、ｔ－ＰＡ和ＰＡＩ活性都略有恢夏。提示，ＰＣ活性降低参与急性心肌梗塞（ＡＭＩ）过程，与心肌损伤程度有关；ＰＣ与ｔ－ＰＡ、ＰＡＩ之间存在着协调作用。ＰＣ缺乏可能与ＡＭＩ发病有关系。

定量检测组织型纤溶酶原激活剂夹心ELISA方法的建立

目的:建立灵敏、特异的组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)定量测定方法,为血栓性疾病和肿瘤性疾病的早期诊断及疗效评估提供辅助手段。方法:采用抗t-PA多克隆抗体包被酶联板、HRP标记抗t-PA单克隆抗体为标记抗体、重组t-PA为标准品,建立定量测定t-PA的夹心ELISA双抗体法。以t-PA测定的特异性、灵敏性和重复性评价夹心ELISA测定法。结果:夹心ELISA测定法可检测t-PA浓度为0.5ng/mL的样品,不同样品的组内和组间的变异系数分别为4.7%和8.4%。采用夹心ELISA法测定40份正常人血浆,t-PA的平均含量为(4±2.1)ng/mL。结论:夹心ELISA测定法具有灵敏性高、特异性强的特点,可用于人血浆中t-PA水平的定量测定。

脑梗塞患者甘油三脂与纤溶活性异常的研究

目的 :探讨脑梗塞患者血高甘油三酯与纤溶系统异常的危险因素。方法 :采用酶联免疫吸附双抗体夹心法、酶法 ,对 5 1例脑梗塞患者及 5 0例健康对照组血组织型纤溶酶原激活物 (t PA) ,纤溶酶原激活物抑制物 1(PAI 1)和甘油三酯 (TG)水平进行了对比分析。结果 :血高TG、高PAI 1,与低t PA含量变化为脑梗塞患者异常变化特征 ,与正常组相比有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :高甘油三酯通过改变纤溶活性是诱发脑梗塞疾病发生。

急性脑梗死阿替普酶静脉溶栓治疗预后影响因素研究

目的分析急性脑梗死(ACI)患者重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA,商品名:阿替普酶)静脉溶栓治疗预后影响因素。方法回顾性分析接受rt-PA静脉溶栓治疗的72例ACI患者临床资料,按治疗后第90天改良Rankin量表(mRS)评分,分为预后良好组(0~1分)及预后不良组(2~6分),采用多因素Logistic回归分析确定与预后相关的因素。结果预后良好组患者41例,预后不良组患者31例;溶栓前美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分[优势比(OR)=1.179,95%置信区间(95%CI):1.032~1.348]、发病至溶栓时间(OR=1.014,95%CI:1.008~1.025)、溶栓前血糖(OR=1.847,95%CI:1.248~2.733)与静脉溶栓治疗后3个月功能良好预后独立相关(P<0.05)。结论溶栓前NIHSS评分、发病至溶栓时间、溶栓前血糖是ACI患者rt-PA静脉溶栓预后的独立影响因素。

脑梗死患者甘油三酯与纤溶活性异常的研究

目的:探讨患者血浆高甘油三酯与纤溶系统异常对脑梗死发病的危险度。方法:采用酶联免疫吸附双抗体夹心法、酶法,对51例脑梗死患者及50例健康对照组血浆组织型纤溶酶原激活物(tPA)、纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)和甘油三酯(TG)水平进行对比分析。结果:血浆高TG、高PAI-1与低tPA含量变化为脑梗死患者异常变化的特征,与正常组相比差异有显著性(P<0.01)。结论:高甘油三酯通过改变纤溶活性是诱发脑梗死疾病发生、发展的危险的因素之一。

低浓度地氟醚对全麻病人血液动力学和纤溶功能影响

目的 :观察低浓度地氟醚吸入对全麻病人血液动力学和纤溶功能的影响。方法 :择期胸部手术病人 2 8例 ,ASAⅠ～Ⅱ级。麻醉诱导后气管插管 ,观察 0 .5、1 .0MAC地氟醚对病人血液动力学和纤溶功能的影响。结果 :麻醉诱导后气管插管时 ,病人SBP、DBP和MAP均呈显著性下降 ,HR显著增快 (P均 <0 .0 1 )。分别吸入 0 .5、1 .0MAC地氟醚时 ,虽收缩压 (SBP)、舒张压 (DBP)、平均动脉压 (MAP)较麻醉前明显下降 (P <0 .0 5 ) ,但与麻醉诱导后相比 ,血压未见进一步降低 ;心率 (HR)虽较麻醉前增快 ,但与气管插管后比较 ,HR有所减慢。吸入 0 .5MAC地氟醚后 ,血浆t PA含量明显增加 ,而血浆PAI水平则显著降低 ,随地氟醚吸入浓度 (1 .0MAC)的增加 ,血浆t PA含量进一步增加 ,血浆PAI含量进一步降低。结论 :0 .5、1 .0MAC地氟醚对全麻病人血液动力学有一定的影响 ,可增强机体的纤溶功能。

脑梗死患者血清脂蛋白(a)水平和纤溶系统活性的测定及相互关系

目的探讨脑梗死患者血清脂蛋白(a)水平、组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)和纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)活性的变化及它们之间的相互关系,研究脂蛋白(a)与缺血性脑血管病的关系。 方法 对137例急性脑梗死患者和54例健康者(对照组),采用速率散射比浊法检测血清脂蛋白(a)水平,发色底物法检测血浆t-PA与PAI-1活性,并进行比较。 结果脑梗死组血清脂蛋白(a)水平为(343±136)mg／L,血浆PAI-1活性为(896±97)AU／L,对照组血清脂蛋白(a)水平及PAI-1活性分别为(205±110)mg／L和(587±142)AU／L,两组比较差异有显著意义(P<0.01);脑梗死组t-PA活性为(223±77)IU／L,对照组为(424±121)IU/L,两组比较差异有显著意义(P<0.01)。脑梗死组血清脂蛋白(a)水平与t-PA活性呈显著负相关(r=-0.326,P<0.01),与PAI-1活性呈显著正相关(r=0.796,P<0.001)。结论脂蛋白(a)通过降低t-PA的活性和(或)增强PAI-1的活性,干扰纤溶系统的平衡,从而参与动脉粥样硬化过程。高脂蛋白(a)水平是缺血性脑血管病的重要独立危险因素。

COPD和慢性肺心病患者急性感染期血浆纤溶活性的改变及其临床意义

分别检测24例慢性阻塞性肺病(COPD)患者及20例慢性肺心病患者的血浆组织型纤溶酶原激活物(t-PA),纤溶酶原激活物抑制物(PAI)活性及D二聚体(D-D)含量等纤溶指标,并与正常对照组进行比较,发现两观察组的t-PA活性明显降低(P<0.01),PAI活性明显上升(P<0.01),D-D含量也显著升高(P<0.01),但两观察组间各指标平均值相差不显著(P均>0.05)。提示纤溶系统功能改变在COPD阶段已经开始,此点对临床防治有重要意义。

低分子肝素对肾病综合征患者血浆组织纤溶酶原激活剂与D-二聚体水平的影响

目的 探讨低分子肝素 (L MWH)的溶栓作用。方法 用底物显色法和ELISA法测定肾病综合征 (NS)患者应用 LMWH前后血浆组织型纤溶酶原激活剂 (t- PA)与 D-二聚体 (D- D)的水平。结果 皮下注射 LMWH组血浆 t- PA与 D- D水平明显增高 ,而静脉滴注 LMWH组血浆 t- PA与 D- D水平无明显变化。结论 皮下注射 L MWH有明显溶栓作用。