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Differentiation of mesenchymal stem cells into neuronal cells on fetal bovine acellular dermal matrix as a tissue engineered nerve scaffold 被引量:4
1
作者 Yuping Feng Jiao Wang +5 位作者 Shixin Ling Zhuo Li Mingsheng Li Qiongyi Li Zongren Ma Sijiu Yu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2014年第22期1968-1978,共11页
The purpose of this study was to assess fetal bovine acellular dermal matrix as a scaffold for supporting the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into neural cells fol-lowing induction with neural di... The purpose of this study was to assess fetal bovine acellular dermal matrix as a scaffold for supporting the differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells into neural cells fol-lowing induction with neural differentiation medium. We performed long-term, continuous observation of cell morphology, growth, differentiation, and neuronal development using several microscopy techniques in conjunction with immunohistochemistry. We examined speciifc neu-ronal proteins and Nissl bodies involved in the differentiation process in order to determine the neuronal differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells. The results show that bone marrow mesenchymal stem cells that differentiate on fetal bovine acellular dermal matrix display neuronal morphology with unipolar and bi/multipolar neurite elongations that express neuro-nal-speciifc proteins, includingβIII tubulin. The bone marrow mesenchymal stem cells grown on fetal bovine acellular dermal matrix and induced for long periods of time with neural differen-tiation medium differentiated into a multilayered neural network-like structure with long nerve ifbers that was composed of several parallel microifbers and neuronal cells, forming a complete neural circuit with dendrite-dendrite to axon-dendrite to dendrite-axon synapses. In addition, growth cones with filopodia were observed using scanning electron microscopy. Paraffin sec-tioning showed differentiated bone marrow mesenchymal stem cells with the typical features of neuronal phenotype, such as a large, round nucleus and a cytoplasm full of Nissl bodies. The data suggest that the biological scaffold fetal bovine acellular dermal matrix is capable of supporting human bone marrow mesenchymal stem cell differentiation into functional neurons and the subsequent formation of tissue engineered nerve. 展开更多
关键词 nerve regeneration peripheral nerve defects fetal bovine acellular dermal matrix biological scaffold bone marrow mesenchymal stem cells neuronal differentiation neurons tissue engineered nerve neural regeneration
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牛心包组织工程心脏瓣膜支架脱细胞的研究 被引量:4
2
作者 杨岷 成少飞 +4 位作者 王学宁 叶清 王维俊 王小妹 陈长志 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期72-75,共4页
目的研究去污剂-酶消化法、胰蛋白酶消化法和去氧胆酸钠法,去除新鲜牛心包组织细胞的效果和保护基质的能力,为组织工程心脏瓣膜的构建提供较满意的支架材料。方法分别采用去污剂-酶消化法、胰蛋白酶消化法和去氧胆酸钠法,处理新鲜牛心... 目的研究去污剂-酶消化法、胰蛋白酶消化法和去氧胆酸钠法,去除新鲜牛心包组织细胞的效果和保护基质的能力,为组织工程心脏瓣膜的构建提供较满意的支架材料。方法分别采用去污剂-酶消化法、胰蛋白酶消化法和去氧胆酸钠法,处理新鲜牛心包组织,光学显微镜、扫描电镜观察脱细胞效果和胶原纤维、弹力纤维改变;热皱缩实验、拉力测试观察基质的物理性能变化;DNA抽提比较脱细胞前后细胞数量差异。结果3种方法均能完全去除细胞,与去污剂-酶消化法比较,其他2种方法对基质的破坏明显。结论去污剂-酶消化法脱细胞效果好,且具有良好的保护基质能力。 展开更多
关键词 组织工程 心脏瓣膜 牛心包 去细胞基质
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京尼平交联的脱细胞牛心包生物支架材料的实验研究 被引量:8
3
作者 陈平 李新华 邢万红 《中国医药导报》 CAS 2010年第6期28-30,共3页
目的:初步探讨新型生物交联剂京尼平对脱细胞牛心包基质作为支架材料的影响及意义,为心肌组织工程心脏补片的构建提供较理想的生物支架材料。方法:实验分为三组,A组(25块)为新鲜未脱牛心包组织,B组(25块)为脱细胞牛心包组织,C组(25块)... 目的:初步探讨新型生物交联剂京尼平对脱细胞牛心包基质作为支架材料的影响及意义,为心肌组织工程心脏补片的构建提供较理想的生物支架材料。方法:实验分为三组,A组(25块)为新鲜未脱牛心包组织,B组(25块)为脱细胞牛心包组织,C组(25块)为京尼平交联的脱细胞牛心包组织。采用光学显微镜、扫描电镜观察脱细胞效果和胶原纤维、弹力纤维改变;以组织厚度、热皱缩温度和抗拉力测试观察基质的物理性能变化。结果:光学显微镜、扫描电镜观察显示去污剂-酶消化法去细胞百分率达98.63%,能够有效脱除细胞,完整保留牛心包组织的胶原纤维和弹力纤维;组织厚度测试结果为,A组(3.8±1.0)mm,B组(3.8±1.2)mm,C组(4.0±1.0)mm;组织热皱缩温度测定结果为,A组(78.50±0.50)℃,B组(67.90±0.60)℃,C组(85.90±0.40)℃;组织抗拉力测试结果显示,经交联剂京尼平处理后C组最大载荷、最大应力、弹性模量、最大应变均高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:经过新型生物交联剂京尼平交联的脱细胞牛心包最大载荷增加显著,可以弥补脱细胞牛心包力学性能的减少,作为较理想的心肌组织工程支架材料。 展开更多
关键词 心肌组织工程 生物交联剂 脱细胞牛心包
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牛心包纤维支架细胞重建组织工程体外实验研究(英文) 被引量:2
4
作者 龙小毛 龚光甫 +1 位作者 胡建国 林辉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2004年第21期1-6,共6页
目的构建利于宿主细胞重建的组织工程生物瓣材料.方法Ⅰ组新鲜牛心包片经(Courtuman法脱细胞后用戊二醛(GA)固定;Ⅱ组脱细胞及固定方法同Ⅰ组,随后用2,3丁二醇改性.肌成纤维细胞(MFC)和内皮细胞(EC)分别取自猪颈动脉,分别培养,分层种植... 目的构建利于宿主细胞重建的组织工程生物瓣材料.方法Ⅰ组新鲜牛心包片经(Courtuman法脱细胞后用戊二醛(GA)固定;Ⅱ组脱细胞及固定方法同Ⅰ组,随后用2,3丁二醇改性.肌成纤维细胞(MFC)和内皮细胞(EC)分别取自猪颈动脉,分别培养,分层种植.通过台盼蓝染色、光镜、扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)观察细胞生长效果.结果Courtuman法基本脱去了牛心包细胞成分,使其成为富含空隙的纤维支架.Ⅰ组试片无细胞生长,Ⅱ组细胞处于增殖状态,第17天Ⅱ组组试片内部有MFC生长;第27天,Ⅱ组试片一侧有2~3层细胞生长,外层EC完整融合,部分EC拉长成梭形,内层MFC已迁移入纤维支架内.结论生物材料牛心包脱细胞、鞣制、改性处理后形成的牛心包纤维支架利于细胞生长.分别提取、分别培养、分层种植MFC和EC是一种实用的再细胞化组织工程技术,可在体外实现牛心包纤维支架的完全内皮化及部分间质细胞化. 展开更多
关键词 组织工程 牛心包 脱细胞 戊二醛 2 3丁二醇
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以脱细胞牛心包膜为支架材料构建组织工程化表皮的初步研究 被引量:1
5
作者 姚本栈 吴汉江 胡广伟 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2006年第1期18-20,共3页
目的:探讨脱细胞牛心包膜(ABP)作为组织工程化表皮支架材料的可行性。方法:体外分离培养SD大鼠皮肤KC,将KC以1×106个/cm2接种于ABP上,用光镜、扫描电镜观察细胞在ABP上的粘附、增殖情况。结果:KC在ABP上种植5 d后,光镜观察可见KC在... 目的:探讨脱细胞牛心包膜(ABP)作为组织工程化表皮支架材料的可行性。方法:体外分离培养SD大鼠皮肤KC,将KC以1×106个/cm2接种于ABP上,用光镜、扫描电镜观察细胞在ABP上的粘附、增殖情况。结果:KC在ABP上种植5 d后,光镜观察可见KC在ABP上单层生长。扫描电镜观察见KC粘附于ABP表面,呈大小不等的集落。结论:ABP可作为组织工程化表皮的支架材料。 展开更多
关键词 组织工程 角质形成细胞 脱细胞牛心包膜 表皮
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原花青素处理去细胞牛心包细胞的相容性研究 被引量:1
6
作者 刘洋 刘珊珊 +4 位作者 段维勋 朱海龙 金振晓 易定华 刘维永 《岭南心血管病杂志》 2011年第3期224-227,共4页
目的考察原花青素处理去细胞牛心包的细胞相容性。方法采用L929细胞经原花青素处理去细胞牛心包浸提液培养后,噻唑蓝试验(MTT)法测定其相对增值率;将L929细胞与原花青素处理去细胞牛心包直接接触培养,逐日观察细胞生长状态;将L929细胞... 目的考察原花青素处理去细胞牛心包的细胞相容性。方法采用L929细胞经原花青素处理去细胞牛心包浸提液培养后,噻唑蓝试验(MTT)法测定其相对增值率;将L929细胞与原花青素处理去细胞牛心包直接接触培养,逐日观察细胞生长状态;将L929细胞种植于原花青素处理的去细胞牛心包表面,扫描电镜观察其生长情况。结果原花青素处理去细胞牛心包性质稳定,细胞毒性程度为0~1级。L929细胞与心包材料直接接触培养生长良好,形态学无明显改变。结论原花青素处理去细胞牛心包细胞相容性好。 展开更多
关键词 原花青素 去细胞牛心包 生物材料 组织工程 细胞毒性
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组织工程牛心包补片在法洛四联症分期矫治中的应用 被引量:2
7
作者 李波 王辉山 +3 位作者 汪曾炜 方敏华 韩宏光 王镇龙 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第12期2197-2204,共8页
背景:行法洛四联症矫治手术时,对右室流出道狭窄较严重的病例,常需要行右室流出道补片加宽成形,目前采用的加宽材料有生物补片及人造织物补片等。目的:比较涤纶人造血管片和组织工程牛心包补片在法洛四联症分期矫治手术中加宽右室流出... 背景:行法洛四联症矫治手术时,对右室流出道狭窄较严重的病例,常需要行右室流出道补片加宽成形,目前采用的加宽材料有生物补片及人造织物补片等。目的:比较涤纶人造血管片和组织工程牛心包补片在法洛四联症分期矫治手术中加宽右室流出道的早期临床效果。方法:25例已行一期分流手术后再行二期心内矫治的法洛四联症患者,按照不同的二期手术时间分为两组:2007年4月至2010年7月接受二期手术的14例患者以涤纶人造血管片加宽右室流出道;2010年8月至2011年9月接受二期手术的11例患者,采用商品化的组织工程牛心包补片加宽右室流出道。比较两组术后早期的临床效果。结果与结论:25例患者中,仅涤纶人造血管片组术后死亡1例,术后开胸止血1例,所有均未出现免疫排斥反应和毒性反应。组织工程牛心包补片组术后呼吸机使用时间、体外循环稳定后测量的右心室与左心室收缩压比值、右心室流出道压差、心包腔引流量、术后ICU治疗时间和术后住院天数均少于涤纶人造血管片组(P<0.05)。说明采用组织工程牛心包补片加宽右室流出道的患者术后恢复较采用涤纶人造血管片的患者快,右室流出道疏通效果好,提示组织工程牛心包补片是法洛四联症患者分期矫治手术中加宽右室流出道的一种较理想材料。 展开更多
关键词 生物材料 生物材料临床实践 法洛四联症 组织工程牛心包 右室流出道 涤纶人造血管片 二期心内矫治 并发症
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应用牙龈角质细胞构建组织工程化牙龈的实验研究 被引量:2
8
作者 赖红昌 戴烨扬 张志勇 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2007年第1期46-49,共4页
目的:建立体外连续培养的人牙龈角质细胞系,探讨构建人工复合牙龈的方法,为种植体周围软组织改善提供帮助。方法:体外无血清培养人牙龈角质细胞,探索细胞体外生长的动力学规律。将角质细胞与脱细胞真皮基质复合,构建组织工程化牙龈。结... 目的:建立体外连续培养的人牙龈角质细胞系,探讨构建人工复合牙龈的方法,为种植体周围软组织改善提供帮助。方法:体外无血清培养人牙龈角质细胞,探索细胞体外生长的动力学规律。将角质细胞与脱细胞真皮基质复合,构建组织工程化牙龈。结果:体外连续传代培养人牙龈角质细胞,可传4~6代,存活30~50d;培养细胞具有角质细胞的典型形态和染色特征。第1、2代细胞群体倍增时间最短,贴壁率、克隆形成率最高。角质细胞可以接种于脱细胞真皮基质上,形成组织工程化牙龈。结论:体外培养扩增人的牙龈角质细胞,第2、3代较适合用于组织工程化牙龈的构建。脱细胞真皮基质可作为组织工程化牙龈的支架材料。 展开更多
关键词 组织工程 牙龈 角质细胞 脱细胞真皮基质
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染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的细胞毒性研究 被引量:1
9
作者 刘洋 刘珊珊 +4 位作者 朱海龙 段维勋 孙国成 易定华 刘维永 《国际心血管病杂志》 2011年第3期170-173,共4页
目的:评价染料亚甲基蓝介导的光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的细胞毒性。方法:(1)间接接触毒性试验:制备染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道浸提液,培养I.929细胞,然后采用MTT比色法测定相对增殖率。(2)直接接触... 目的:评价染料亚甲基蓝介导的光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的细胞毒性。方法:(1)间接接触毒性试验:制备染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道浸提液,培养I.929细胞,然后采用MTT比色法测定相对增殖率。(2)直接接触毒性试验:将L929细胞与染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道直接接触培养,在不同时间观察细胞的生长状态。将L929细胞种植于染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道表面,用扫描电镜观察其生长情况。结果:染料亚甲基蓝介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的性质稳定,细胞毒性程度为0~1级。L929细胞与瓣膜材料直接接触培养生长良好,形态学无明显改变。结论:染料介导光氧化处理去细胞牛颈静脉带瓣管道的细胞相容性良好。 展开更多
关键词 染料介导光氧化 去细胞 牛颈静脉带瓣管道 组织工程 细胞毒性试验
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灭菌处理牛心包制备脱细胞支架的内皮化 被引量:1
10
作者 刘飞 张冠鑫 +2 位作者 刘晓红 王立成 徐志云 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第28期4562-4566,共5页
背景:组织工程学研究常用的动物组织不可避免地存在各种微生物附着,而无菌是组织工程材料临床应用的一项基本要求。目的:观察体积分数75%乙醇灭菌对牛心包性能及生物相容性的影响。方法:将牛心包组织分别用无菌PBS(对照组)、含1%抗生素... 背景:组织工程学研究常用的动物组织不可避免地存在各种微生物附着,而无菌是组织工程材料临床应用的一项基本要求。目的:观察体积分数75%乙醇灭菌对牛心包性能及生物相容性的影响。方法:将牛心包组织分别用无菌PBS(对照组)、含1%抗生素(青霉素/链霉素/两性霉素B溶液)的PBS、氯己定及体积分数75%乙醇进行灭菌处理。采用LB固体培养基评价4种方法的杀菌效果;采用VB染色评估4组处理对牛心包组织结构的影响;通过CCK-8实验测定4种处理抽提液的细胞毒性。将体积分数75%乙醇灭菌处理的牛心包制作为脱细胞支架,与人脐静脉内皮细胞共培养,观察细胞的黏附与内皮化效果。结果与结论:①体积分数75%乙醇和氯己定处理24 h的牛心包满足完全灭菌的要求,1%抗生素处理组和对照组可见明显菌落形成;②VB染色显示,体积分数75%乙醇、氯己定和1%抗生素处理的牛心包胶原纤维呈波浪状排列整齐,结构紧凑,弹性纤维含量较少但结构清晰;③体积分数75%乙醇灭菌处理的牛心包不影响L929细胞的增殖活性,培养1-3 d内的细胞存活率均在100%以上;氯己定灭菌处理的牛心包有很强的细胞毒性,导致细胞死亡;④人脐静脉内皮细胞可在脱细胞支架表面正常生长与黏附;在20 d的种植期内,第8-12天脱细胞支架表面黏附的细胞最多;⑤结果说明,体积分数75%乙醇能够有效消灭附着在牛心包上的所有微生物,不会影响牛心包的组织学完整性与生物相容性。 展开更多
关键词 牛心包 灭菌 75%乙醇 脱细胞支架 组织工程 内皮细胞化 生物相容性 细胞黏附
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去细胞牛松质骨复合骨髓基质干细胞修复兔桡骨缺损 被引量:1
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作者 王德超 郑玉琴 +3 位作者 孙建华 史晨辉 董金波 刘维钢 《深圳中西医结合杂志》 2007年第2期70-73,86,共5页
目的:研制理想的能够修复骨缺损的骨材料,为其在骨缺损修复领域中的临床应用提供实验依据。方法:体外扩增诱导兔骨髓基质干细胞,将其与去细胞牛松质骨复合培养。造成兔桡骨中段10mm骨缺损模型,分复合细胞组、单纯材料组、空白对照组。... 目的:研制理想的能够修复骨缺损的骨材料,为其在骨缺损修复领域中的临床应用提供实验依据。方法:体外扩增诱导兔骨髓基质干细胞,将其与去细胞牛松质骨复合培养。造成兔桡骨中段10mm骨缺损模型,分复合细胞组、单纯材料组、空白对照组。通过大体观察、放射学检查、组织学检查观察骨缺损的修复情况。结果:去细胞牛松质骨复合骨髓基质干细胞修复兔桡骨缺损,12周时缺损区完全被新骨代替,骨髓腔完全通畅,优于单纯材料组的修复效果,单纯材料组优于空白对照组。结论:去细胞牛松质骨具有良好的成骨能力,有可能成为理想的骨支架材料。 展开更多
关键词 骨修复材料 去细胞牛松质骨 组织工程
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组织工程心脏瓣膜构建研究:去细胞牛心包支架的制备
12
作者 杨岷 朱亚彬 +5 位作者 陆世春 贺建胜 束余声 石维平 史宏灿 陈长志 《实用临床医药杂志》 CAS 2008年第6期20-23,27,共5页
目的对比去污剂-酶消化法、胰蛋白酶消化法和去氧胆酸钠法去除新鲜牛心包组织上细胞的效果和保护基质的能力,为组织工程心脏瓣膜的构建提供较满意的支架材料。方法应用3种方法处理新鲜牛心包组织,用光学显微镜、扫描电镜观察脱细胞效果... 目的对比去污剂-酶消化法、胰蛋白酶消化法和去氧胆酸钠法去除新鲜牛心包组织上细胞的效果和保护基质的能力,为组织工程心脏瓣膜的构建提供较满意的支架材料。方法应用3种方法处理新鲜牛心包组织,用光学显微镜、扫描电镜观察脱细胞效果和胶原纤维、弹力纤维改变;热皱缩实验、拉力测试观察基质的物理性能变化;DNA抽提比较脱细胞前后细胞数量差异。结果3种方法均能完全去除细胞,但是与去污剂-酶消化法比较,其它两种方法对基质破坏明显。结论去污剂-酶消化法脱细胞效果好,且有良好的保护基质的能力。 展开更多
关键词 组织工程 心脏瓣膜 牛心包
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体外构建复合皮移植后对大鼠创面愈合的影响
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作者 梁志为 谭谦 +2 位作者 陈曦 黄泽春 林子豪 《中国美容医学》 CAS 2007年第12期1687-1689,共3页
目的:观察角质形成细胞和成纤维细胞与无细胞异种真皮基质构成的复合皮移植于全层皮肤缺损创面后的效果,寻找一种新的创面覆盖物。方法:54只SD大鼠作背部全层皮肤缺损创面后分为A、B、C三组,分别以A型复合皮(角质形成细胞+成纤维细胞+... 目的:观察角质形成细胞和成纤维细胞与无细胞异种真皮基质构成的复合皮移植于全层皮肤缺损创面后的效果,寻找一种新的创面覆盖物。方法:54只SD大鼠作背部全层皮肤缺损创面后分为A、B、C三组,分别以A型复合皮(角质形成细胞+成纤维细胞+无细胞异种真皮基质)、B型复合皮(角质形成细胞+无细胞异种真皮基质)和普通敷料进行移植,术后定期观察创面愈合情况并进行创面收缩率的计算,同时切取创面组织进行组织学检测。结果:三组中,A组的创面愈合及外观情况最好;A组创面收缩率明显低于B、C两组(P<0.05);组织学检测提示A组复合皮上皮分化充分,胶原增生有序,表皮-真皮连接结构重建明显,未见明显的急性期免疫排斥反应。结论:角质形成细胞和成纤维细胞与无细胞异种真皮基质构成的复合皮移植后能改善创面愈合质量,是一种较理想的、可探索的皮肤替代物。 展开更多
关键词 角质形成细胞 无细胞异种真皮基质 组织工程 皮肤
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不同预处理脱细胞牛骨基质复合成骨化骨髓间充质干细胞生物相容性研究
14
作者 李稚君 马信龙 +3 位作者 马剑雄 郭洪刚 张园 赵秀宝 《生物医学工程与临床》 CAS 2010年第1期10-14,F0002,共6页
目的将经成骨化诱导后大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)与脱细胞牛骨基质(ABECM)复合,构建组织工程骨。实验着重观察不同预处理方法对构建的组织工程骨的过程——细胞与ABECM复合和生长的影响,为有效快速构建组织工程化骨奠定理论基础。方法用... 目的将经成骨化诱导后大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)与脱细胞牛骨基质(ABECM)复合,构建组织工程骨。实验着重观察不同预处理方法对构建的组织工程骨的过程——细胞与ABECM复合和生长的影响,为有效快速构建组织工程化骨奠定理论基础。方法用Wistar大鼠2只,从股骨取MSC在体外扩增、纯化、诱导成骨化,做苏木精-伊红染色鉴定。实验组用胎牛血清(FBS)、多聚赖氨酸(PLL),对照组用磷酸盐缓冲溶液预处理的ABECM复合构建组织工程骨,体外培养。用流式细胞仪计数并计算细胞黏附率、测定碱性磷酸酶活性,倒置光学显微镜、扫描电子显微镜观察细胞生长、增殖情况。结果接种后6、12h实验组细胞黏附率高于对照组(P<0.05)。扫描电子显微镜观察:复合培养第3天,实验组细胞在材料表面已完全伸展,附着在材料表面;对照组细胞大多呈不规则形,未完全伸展。碱性磷酸酶活性测定:复合培养第3、6天,实验组的碱性磷酸酶活性均明显高于对照组(P<0.05)。结论用FBS和PLL分别预处理,可以改善ABECM材料表面特性,利于提高细胞接种效率,从而能更有效、更快速地构建组织工程骨。 展开更多
关键词 组织工程骨 骨髓间充质干细胞 脱细胞骨基质
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组织工程心脏瓣膜裸鼠体内移植的实验研究
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作者 成少飞 杨岷 +2 位作者 陈长志 叶清 薛松 《组织工程与重建外科杂志》 2008年第4期185-188,共4页
目的将人血管混合细胞体外动态种植于脱细胞牛心包构建的组织工程心脏瓣膜(Tissue engineered heart valves,TEHVs)并移植入裸鼠体内,观察其生物学特征变化。方法将体外动态构建的TEHVs移植入裸鼠体内,30d时取材,观察组织、细胞的超微... 目的将人血管混合细胞体外动态种植于脱细胞牛心包构建的组织工程心脏瓣膜(Tissue engineered heart valves,TEHVs)并移植入裸鼠体内,观察其生物学特征变化。方法将体外动态构建的TEHVs移植入裸鼠体内,30d时取材,观察组织、细胞的超微结构变化,种子细胞的生长行为和生物学特征变化,种子细胞与支架材料的黏附性,TEHVs的生物相容性等参数。结果组织学观察见:细胞数量、分层数较移植前增多,并有大量细胞浸润入TEHVs深层组织内;免疫组化显示:TEHVs上细胞的内皮细胞Ⅷ因子、平滑肌细胞α-肌动蛋白、成纤维细胞Fibronectin相关抗原呈阳性表达;扫描电镜见:裸鼠体内移植后细胞数量较移植前增多,细胞表面和细胞之间的网状胶原结构较埋置前增多明显;透射电镜可见:W-P小体、质膜小泡、密斑、密体、微丝等特征性结构。结论TEHVs细胞能够在裸鼠体内定向分化、增殖,生物学特征无改变,TEHVs生物相容性良好。 展开更多
关键词 组织工程 心脏瓣膜 脱细胞 牛心包 血管混合细胞 裸鼠
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嵌合型组织工程牛心包片在大鼠皮下包埋效果的初步研究 被引量:2
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作者 辛志飞 万居易 +6 位作者 马小龙 李殿坤 辛毅 龚达 周子凡 许秀芳 李温斌 《心肺血管病杂志》 2016年第3期223-228,共6页
目的:探索"体外去细胞-明胶再基质化-碳化二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺(以下均简称EDC/NHS)交联-体内自体细胞植入"的"嵌合型组织重构理论"在牛心包片处理过程中的科学性和可行性,以寻找组织工程生物瓣膜理想的支架材... 目的:探索"体外去细胞-明胶再基质化-碳化二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺(以下均简称EDC/NHS)交联-体内自体细胞植入"的"嵌合型组织重构理论"在牛心包片处理过程中的科学性和可行性,以寻找组织工程生物瓣膜理想的支架材料。方法:采用"明胶再基质化-EDC/NHS交联"对脱细胞牛心包组织进行嵌合处理后植入大鼠皮下,通过HE染色对比新鲜组、脱细胞组、戊二醛组、嵌合组植入前后组织形态学改变,并对各组牛心包片进行厚度检测、含水量和力学检测、钙含量测定试验,判断该嵌合方法对牛心包基质的影响。结果:基线水平抗张强度测定结果显示,嵌合组牛心包抗张强度与戊二醛组(P=0.09)及脱细胞组(P=0.56)相比较并无显著差异远低于新鲜组(P=0.001);钙含量远低于新鲜组(P<0.001)及戊二醛组(P<0.001)。包埋2月后,嵌合组牛心包钙含量远低于新鲜组(P<0.001)及戊二醛组(P<0.001)。大鼠机体对明胶嵌合组处理牛心包的浸润程度最轻,然后是戊二醛组、脱细胞组,而新鲜组的浸润程度最重。在大鼠皮下降解率明显低于脱细胞组,炎症细胞浸润程度显著低于新鲜组,与戊醛组相当。结论:作为瓣膜组织工程支架材料,嵌合型牛心包膜比戊二醛交联效果具有更好生物相容性,钙化降解低,是较好的交联方法。 展开更多
关键词 嵌合型牛心包 戊二醛 组织工程 钙含量 生物相容性
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再细胞化牛心包纤维支架试片体内移植:1年的动物实验研究(英文)
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作者 龙小毛 龚光甫 +2 位作者 胡建国 林辉 李香伟 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期262-266,270,共6页
目的进一步观察移植后内皮细胞(EC)抗切应力和抗钙化能力以及肌成纤维细胞迁移和自身修复能力。方法新鲜牛心包片经脱细胞、鞣制、改性后备用;A、B组试片上依序种植宿主肌成纤维细胞和EC,C组试片上不种植细胞,随后将3组试片分别移植于... 目的进一步观察移植后内皮细胞(EC)抗切应力和抗钙化能力以及肌成纤维细胞迁移和自身修复能力。方法新鲜牛心包片经脱细胞、鞣制、改性后备用;A、B组试片上依序种植宿主肌成纤维细胞和EC,C组试片上不种植细胞,随后将3组试片分别移植于猪的腹主动脉壁上;2个月后对A组试片,12个月后对B、C组试片进行厚度、钙含量、扫描电镜及组织学的检测。结果A、B组试片钙含量显著低于C组(P<0.05),但显著高于新鲜牛心包(P<0.05);A、B组试片钙含量差异无显著性(P>0.05);A、B组试片显著厚于C组试片(P<0.05),A、B组试片的厚度差异无显著性(P>0.05);B组试片80%~90%的表面覆盖EC,肌成纤维细胞已迁移至表层下支架的3/4;C组试片表面无细胞,肌成纤维细胞已迁移至表层下支架的1/4~1/3,大部分胶原纤维间隙消失。结论人工EC化使生物材料抗钙化能力增强;种植肌成纤维细胞使生物材料具有自身修复能力。但增厚的瓣叶是否影响其功能,尚有待进一步研究。 展开更多
关键词 生物假体 再细胞化 牛心包 组织工程 体内研究
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氯化镁对组织工程牛心包片的抗钙化研究
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作者 杨昭 李温斌 +4 位作者 杨英杰 李阳阳 刘诫 张燕 马小龙 《心肺血管病杂志》 2020年第8期994-998,1023,共6页
目的:通过浸泡法使氯化镁(MgCl2)与组织工程牛心包片充分结合并进行动物实验,探索该种补片的各种性能,以期制备出具有良好机械性能、生物相容性及抗钙化的组织工程补片,从而更好的服务于临床。方法:采用Triton X-100及DNA/RNA核酶法脱... 目的:通过浸泡法使氯化镁(MgCl2)与组织工程牛心包片充分结合并进行动物实验,探索该种补片的各种性能,以期制备出具有良好机械性能、生物相容性及抗钙化的组织工程补片,从而更好的服务于临床。方法:采用Triton X-100及DNA/RNA核酶法脱细胞、明胶再基质化、EDC/NHS交联处理牛心包,采用浸泡法使MgCl2与经过上述处理的心包结合并进行大鼠皮下包埋,对各组补片进行机械性能、HE染色及钙镁含量测定等相关测试。结果:MgCl两组在机械强度上与去细胞组和交联组无明显差异,组织浸润较轻且短期内钙含量较其他两组明显减少。结论:使用MgCl2浸泡法处理的牛心包,在维持机械性能及组织学性能的基础上具有一定的抗钙化作用,为以后进一步的研究奠定了理论和实验基础。 展开更多
关键词 牛心包 抗钙化 组织工程 氯化镁
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口腔黏膜细胞与膀胱黏膜下脱细胞基质复合物构建组织工程化尿道的实验研究 被引量:37
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作者 李超 徐月敏 +3 位作者 宋鲁杰 傅强 崔磊 尹烁 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期368-372,共5页
目的探讨以兔口腔黏膜细胞与同种异体膀胱黏膜下脱细胞基质(BAMG)复合物构建组织工程化尿道的可行性。方法新西兰雄性兔24只,距尿道外口2.0cm剥离尿道黏膜(2.0cm×0.8cm)后,随机分实验组和对照组,每组12只。切取实验组兔... 目的探讨以兔口腔黏膜细胞与同种异体膀胱黏膜下脱细胞基质(BAMG)复合物构建组织工程化尿道的可行性。方法新西兰雄性兔24只,距尿道外口2.0cm剥离尿道黏膜(2.0cm×0.8cm)后,随机分实验组和对照组,每组12只。切取实验组兔口腔黏膜组织分离细胞,在有灭活的3T3细胞培养皿上进行培养扩增,将培养获得的第2代口腔黏膜细胞种植于BAMG(2.2cm×1.0cm)上,植入实验组兔尿道缺损区域;对照组单纯采用无细胞植入的BAMG修复尿道。分别于术后1、2、6个月观察动物排尿情况,行尿道造影,8F尿管插管确定有无狭窄;随后处死实验兔,取修复段尿道黏膜组织行组织学检查。结果细胞培养获得的口腔黏膜细胞形态均一,生长良好;组织形态学、扫描电镜观察见口腔黏膜细胞与BAMG具有良好的相容性。实验组兔术后1、2、6个月伤口愈合良好、排尿通畅,无尿瘘发生,组织学和尿道造影检查显示带细胞修复的尿道形态完整、清晰宽敞,无狭窄发生;术后6个月植入的口腔黏膜细胞仍然存在,并明显扩增。对照组兔则出现排尿困难、尿道狭窄,光镜下发现黏膜及黏膜下存在严重的炎症反应。结论兔口腔黏膜细胞与同种异体BAMG复合后,可成功用于尿道缺损的修复,构建组织工程化尿道。 展开更多
关键词 尿道 组织工程 口腔黏膜细胞 膀胱脱细胞基质
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荷载角质细胞生长因子纳米微囊组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损 被引量:3
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作者 杨斌 丘日井 +1 位作者 洪清琦 冀晨阳 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期200-204,共5页
目的研究荷载角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)纳米微囊的新型组织工程皮肤对裸鼠皮肤缺损的修复效果及特点。方法采用超声乳化-溶剂挥发法及低温干燥法,制备KGF纳米微囊,并构建KGF-脱细胞真皮基质(acellular de... 目的研究荷载角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)纳米微囊的新型组织工程皮肤对裸鼠皮肤缺损的修复效果及特点。方法采用超声乳化-溶剂挥发法及低温干燥法,制备KGF纳米微囊,并构建KGF-脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM);分离培养和鉴定人表皮干细胞群和成纤维细胞;接种表皮干细胞群于KGF—ADM之上,观察其生长情况;将荷载KGF纳米微囊的组织工程皮肤移植于裸鼠皮肤缺损处,以无KGF纳米微囊的组织工程皮肤为空白组,以其自体皮肤移植作对照组。于术后2-6周时分别观察修复区组织学愈合及皮片挛缩情况,并应用抗人角蛋白10及β-整合素免疫荧光检测修复区表皮和真皮层细胞来源、分化及生长情况。结果表皮干细胞群在KGF—ADM表面生长良好,粘贴紧密,可见到多角形的终末表皮细胞及小圆形的表皮干细胞,活性良好,有连接成片的趋势,部分形成克隆团块。以荷载KGF纳米微囊组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损,2、6周时修复效果均优于空白组及对照组,移植的组织工程皮肤边缘可与邻近皮肤完全融合,但存在一定的挛缩。镜下可见修复区组织工程皮肤表皮细胞分层良好,与ADM紧密结合,能产生正常角质层。6周时实验组修复区组织工程皮肤切片免疫荧光检测,基底层仍存有少量β-整合素阳性的表皮干细胞或短暂扩充细胞。结论所构建的荷载KGF纳米微囊组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损的效果,优于无KGF纳米微囊的普通组织工程皮肤及裸鼠自体全厚皮片移植修复效果。 展开更多
关键词 表皮干细胞 角质细胞生长因子 脱细胞真皮基质 纳米微囊 组织工程
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