异基因组织工程骨修复猪胫骨缺损术后外周血T淋巴细胞亚群的检测

目的通过检测异基因组织工程骨移植修复猪胫骨缺损术后T淋巴细胞亚群CD4+和CD8+细胞的变化,探索异基因组织工程骨的免疫原性。方法骨髓间充质干细胞(MSCs)体外培养,扩增,诱导成骨后与磷酸三钙(TCP)复合为组织工程骨,分自体和同种异体组,植入构建好的猪胫骨中段2.0cm的缺损处,对照组为纯TCP组,流式检测术前,术后3、7、14、28、56d外周血T淋巴细胞亚群变化。结果小型猪外周血T淋巴细胞亚群分别为CD4+(9.37±1.65)%,CD8+(38.43±1.62)%,CD4+CD8+(7.23±1.24)%;术后组内不同时间点CD4+和CD8+细胞测定值无显著变化,CD4+CD8+双阳性细胞在3d和7d增加明显(P<0.05);组间各时间点CD4+、CD8+和CD4+CD8+细胞无显著变化。结论术后T细胞亚群检测结果显示无明显的免疫排斥,推论异基因组织工程骨免疫原性低。

以生物衍生材料为支架的组织工程骨移植早期兔外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的检测体外构建的组织工程骨移植后兔外周血T细胞亚群的变化,对移植组织进行组织学观察,探讨以生物衍生材料作为骨组织工程支架材料的可行性。方法组织工程骨以兔骨膜来源的成骨细胞为种子细胞,经抗原自消化、部分脱钙、冻干后的异体骨为支架材料于体外构建。将健康新西兰白兔48只制成1cm长桡骨缺损模型后,随机分成A^D4组,每组12只,分别用部分脱钙冻干骨(partial demineralized freeze-dried bone,PDFDB)、组织工程骨、自体骨、同种异体骨植入兔桡骨节段性缺损。术后1、2、4周取材,用流式细胞仪检测4种材料移植早期兔外周血T淋巴细胞亚群的变化;通过常规组织学检测观察2、4、8、12周时4种材料的成骨作用。结果B组术后2周材料孔隙内有成骨细胞和成软骨细胞,可见骨、软骨混合性新生物形成,周边分布有破骨细胞,部分网架呈蚕食状被破坏吸收。术后4周,形成的新生骨过渡为编织骨。A、B组材料植入后1、2周外周血CD4+和CD8+T细胞较术前明显升高(P<0.05);术后4周CD4+T细胞较术前轻度偏高,但无统计学差异(P>0.05)。C组术后CD4+和CD8+T细胞升高不明显(P>0.05)。D组术后1、2、4周外周血CD4+和CD8+T细胞较术前及其他各组同期均明显增高(P<0.05)。结论PDFDB为支架材料构建的细胞-材料复合物移植后外周血T淋巴细胞增高,但不影响其良好的修复骨缺损能力,生物衍生骨可作为支架材料应用于骨组织工程研究。

兔组织工程化骨异体植入修复骨缺损中外周血T淋巴细胞亚群的检测

目的通过对T淋巴细胞亚群的检测,从免疫学方面探讨同种异体骨髓基质细胞组织工程化骨植入兔体内修复长段骨缺损的可行性。方法用骨髓基质细胞(MSCs)、重组人骨形态蛋白2(rhBMP2)与纤维蛋白胶(FG)复合培养,体外构建组织工程化骨,植入5只异体兔的桡骨1.5cm节段骨缺损作为实验组;另5只兔用单纯FG植入同样大小骨缺损作为对照组;分别于术后1、2、3、6、8周抽取静脉血,应用流式细胞术检测样本中T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+阳性率并计算CD4+/CD8+比值。结果术后实验组和对照组的1、2、3、6、8周各时间点T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值分别与术前的T淋巴细胞亚群两两相比,两者阳性率差异均无显著性(P>0.05)。结论FG、rh-BMP2和兔MSCs复合构建组织工程化骨植入异体兔体内其术后8周内免疫反应水平低,可用以修复兔节段骨缺损。

猕猴组织工程化骨异体植入修复骨缺损T淋巴细胞亚群的检测

目的 通过对T淋巴细胞亚群的检测 ,从免疫学方面探讨同种异体细胞来源的组织工程化骨植入猕猴体内修复长段骨缺损的可行性。方法 用骨髓基质干细胞 (MSCs)经诱导分化为成骨样细胞后与生物衍生骨材料复合培养 ,体外构建组织工程化骨 ,植入 15只异体猕猴体内桥接桡骨 2 .5cm节段骨缺损作为实验组 ;用单纯生物衍生骨材料桥接对侧同样大小骨缺损作为对照组 ;分别于术后 1、2、3、6、12周抽取静脉血和作双侧局部组织取材 ,样本应用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群CD3 + /CD4+ /CD45+ 、CD3 + /CD8+ /CD45+ 和CD2 8+ 阳性率。结果 术后第 1、2、3、6、12周实验组和对照组T淋巴细胞亚群CD3 + /CD4+ /CD45+ 、CD3 + /CD8+ /CD45+ 和CD2 8+ 阳性率两者差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 生物衍生骨材料和猕猴MSCs复合构建组织工程化骨植入异体猕猴体内其术后 12周内免疫反应水平低 ,可用以修复猕猴节段骨缺损。