脱细胞跟腱复合人成纤维细胞共培养的实验研究

目的探讨脱细胞跟腱的制备及其与人成纤维细胞复合培养效果,为组织工程韧带的构建提供一种支架材料。方法取10只5月龄雄性新西兰大白兔(体重4～5 kg)双后肢跟腱,经胰蛋白酶、Triton X-100、SDS脱细胞处理后,行大体、组织学及扫描电镜观察。将脱细胞跟腱与人成纤维细胞复合培养,于培养1、3、5、7、9 d行细胞相容性检测,并于4周后取材行组织学、扫描电镜观察以及生物力学检测,并与脱细胞前、后跟腱进行比较。结果跟腱经脱细胞处理后腱膜完整,质柔软、韧性好,体积较处理前跟腱显著增大;跟腱腱束间未见疏松结缔组织及腱细胞,胶原纤维排列疏松,呈三维网状分布,腱束间残留较多孔隙;且细胞相容性良好。复合培养4周后,细胞迁移至纤维束间的孔隙内,三维网状结构消失。生物力学测试示,与脱细胞前跟腱组及细胞-支架复合组比较,脱细胞跟腱组拉伸强度及杨氏弹性模量均显著降低(P<0.05),细胞-支架复合组与脱细胞前跟腱组比较差异无统计学意义(P>0.05);各组间断裂伸长率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论兔脱细胞跟腱与人成纤维细胞生物相容性良好,可作为支架材料用于组织工程韧带构建。