小鼠骨髓基质干细胞与脱细胞基质骨联合培养的实验研究

目的 研究小鼠股骨骨髓基质干细胞 (marrow stromal stem cells,MSCs)在同种异体脱细胞基质骨(acellular extra cellular matrix,AECM)上的生长情况。 方法 昆明种小鼠 8只共 16侧股骨 ,用 Triton X- 10 0处理后获 AECM。另将 1月龄昆明种小鼠 2 0只双侧股骨切断 ,用 4 ml PBS反复冲洗骨髓腔后 ,离心分瓶 ,取 MSCs进行原代培养 ,以 5× 10 6 /ml浓度将原代培养的小鼠 MSCs种植于 AECM中 ,进行体外联合培养 7d,通过相差显微镜、光镜、电镜等方法观察细胞在材料中的生长情况。 结果 在 AECM的孔隙中 ,有成团蓝染的 MSCs核团 ,周边部分大于中间部分 ,且靠近细胞培养液层面的 AECM中蓝染的核团数量明显比远离细胞培养液的层面多。 AECM具有良好的孔隙率 ,MSCs可在 AECM上良好生长。 结论 AECM可作为构建组织工程骨的一种较好的支架材料。

脱细胞真皮支架复合骨髓基质干细胞构建前交叉韧带的实验研究

[目的]研究骨髓基质干细胞(BMSCs)复合脱细胞真皮(ADM)构建组织工程膝前交叉韧带(ACL),以及特定浓度转化生长因子TGF-β1和碱性成纤维细胞因子bFGF对骨髓基质干细胞生长、粘附及分化的影响。[方法]用ADM制备4股编织柱形及4股束形支架材料,将兔BMSCs接种于ADM支架上,分别用普通培养液(对照组)及含有特定浓度的TGF-β1和bFGF因子培养液(实验组)培养,通过绘制细胞增殖MTT曲线,碱性磷酸酶ALP测定,荧光显微镜及激光共聚焦扫描显微镜观察,分析ADM支架力学性能,细胞在支架材料中的生长增殖情况,以及其在ADM上的粘附情况。[结果]ADM的一般力学性能符合ACL要求,实验组BMSCs在ADM上生长数量及粘附效果明显优于对照组(P<0.05),实验组相对于对照组细胞能够分泌更多的ALP(P<0.05)。[结论]BMSCs复合ADM支架可能成为组织工程ACL材料替代移植材料,本浓度的TGF-β1及bFGF因子培养液对骨髓基质干细胞在ADM上的生长、粘附及分化有明显的刺激增强效果。