可溶性组织因子的基因克隆、表达与性质研究

组织因子是外源性凝血途径的启动因子,为膜受体蛋白,胞外区的促凝血功能几乎与完整分子相同,因此采用重组DNA技术制备组织因子的胞外区分子,并对其活性进行研究,以便替代兔脑粉用于PT检测。以人胎盘总RNA为模板,用RT-PCR扩增组织因子胞外区cDNA基因,经序列分析证实后在大肠杆菌中表达,产物形成包涵体。表达产物经复性、离子交换和凝胶过滤色谱纯化后与磷脂结合,进行促凝血试验。结果表明在磷脂存在下,可溶性TF有明显的促凝血活性,可以取代兔脑粉用于PT检测。