棘孢木霉与30%霜霉·嘧菌酯协同防治烟草镰刀菌根腐病

为筛选防治烟草镰刀菌根腐病高效、安全的复配剂,采用菌丝生长速率法测定生防棘孢木霉Tr-0111、化学杀菌剂30%霜霉·嘧菌酯对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的毒力及两者的相容性,同时测定两者混配对尖孢镰刀菌的毒力系数,并通过盆栽试验评价其对烟草镰刀菌根腐病的防治效果。结果表明,30%霜霉·嘧菌酯和棘孢木霉Tr-0111对尖孢镰刀菌均具有较强的毒力,其EC50值分别为0.0643 mL/L、2.36×10^(2)cfu/mL,且两者相容性好。除V30%霜霉·嘧菌酯∶V_(Tr-0111)=4∶6时无增效作用,其他8个混配比例均具有增效作用,其中V_(30%霜霉·嘧菌酯)∶V_(Tr-0111)=7∶3时增效比率最高,为1.16,抑菌率为68.37%。盆栽试验结果表明,V_(30%霜霉·嘧菌酯)∶V_(Tr-0111)=5∶5时,对烟草镰刀菌根腐病的防效最好,为78.18%,其次为7∶3和1∶9,防效分别为77.27%和72.73%,均显著高于单一使用30%霜霉·嘧菌酯和棘孢木霉Tr-0111。因此,可以将0.0643 mL/L 30%霜霉·嘧菌酯和2.36×10^(2)cfu/mL棘孢木霉Tr-0111以5∶5比例混匀复配应用于烟田防治烟草镰刀菌根腐病,减少化学农药使用。

不同基因型烤烟对镰刀菌根腐病的抗性鉴定与评价

为明确不同基因型烤烟对烟草镰刀菌根腐病的抗性,利用10个烟草品种(系),采用粗毒素幼芽接种、带菌菌谷接种、孢子悬浮液培养等方法进行抗性鉴定。结果表明,供试品种对尖孢镰刀菌抗性表现出显著差异;对尖孢镰刀菌表现出抗的品种(系)有4个,分别是‘Y2001’、‘Y2002’、‘长脖黄’、‘664-01’;对尖孢镰刀菌表现出感的品种(系)有6个,分别是‘7710’‘、7713’‘、Y2007’‘、Y2008’‘、中烟100’、‘小黄金1025’。3种接种方法鉴定结果基本一致,共筛选出4个抗性品种(系)。

湖南烟草镰刀菌根腐病病原鉴定及防治药剂筛选

为明确湖南郴州和永州地区烟草根腐病的病原种类,针对主要病原菌筛选有效的防治药剂,分别利用组织分离法和平板稀释法对两地主要烟区采集的烟草根腐病病样和根际土壤进行病原分离,通过形态学观察、翻译延伸因子1A(EF-1α)序列进化分析以及致病性测定确定病原种类,采用生长速率法测定供试杀菌剂对主要病原菌菌丝生长的抑制效果,并通过活体盆栽防效试验验证候选杀菌剂对主要病原菌的防治效果。共分离到真菌128株,其中镰刀菌87株,包括共享镰刀菌Fusarium commune、甜瓜镰刀菌Fusarium incarnatum、藤仓镰刀菌Fusarium fujikuroi、茄镰刀菌Fusarium solani、层出镰刀菌Fusarium proliferatum、Fusarium falciforme、Fusarium humuli共7个种。其中,F.commune占比最高,为39.08%,其次为F.solani和F.incarnatum,占比均为14.94%。致病力测定结果表明,这些菌株都能引起烟草发病,明确其为烟草根腐病的病原物。F.commune对40%咪鲜胺EW、43 g/L戊唑醇SC和15%氰烯菌酯SC高度敏感,EC50分别为0.026、0.079和0.169μg/mL。盆栽试验结果表明,40%咪鲜胺EW的防治效果最为显著,相对防效达到94.43%±2.79%,其次为43 g/L戊唑醇SC和15%氰烯菌酯SC,相对防效为88.63%±1.68%和83.07%±2.55%。本研究表明,湖南郴州和永州地区烟草镰刀菌根腐病病原真菌以共享镰刀为主,供试药剂中,40%咪鲜胺EW对该病原菌的抑菌效果最好。

烟草镰刀菌根腐病生防菌GDND-2的鉴定及防病效果

为烟草根腐病生防菌剂的研发储备菌株资源。以烟草根腐病菌为靶标,筛选拮抗菌,通过培养形态、生化特征和分子技术鉴定菌株。用平板划线测定拮抗菌耐受力,盆栽试验验证其对病害的防效。筛选出拮抗菌GDND-2,其10%和20%发酵滤液对病菌生长抑制率为53.09%和62.24%。鉴定GDND-2为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velenzensis),该菌抑菌谱广,耐极端温度、酸碱和盐碱,对多菌灵等7种常用杀菌剂不敏感。GDND-2发酵液处理15、30、45 d,对烟草根腐病的防效为70.00%、74.62%和79.51%,处理45 d的防效高于多菌灵。贝莱斯芽孢杆菌GDND-2抗菌谱广,性状优良,可有效防治烟草根腐病,有望开发为生防菌剂。

鄂西北烟草根腐病病原菌的分离及鉴定

镰刀菌属引起的根腐病是烟草的重要病害,根腐病危害严重可导致烟草产品质量和产量出现重大损失。为明确鄂西北烟草根腐病病原,从湖北十堰烟区采集典型症状标本分离病原菌,对其进行了形态学和分子生物学鉴定,结合基因系统发育学分析和致病性验证,确定鄂西北烟草根腐病的病原为尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、木贼镰刀菌和接骨木镰刀菌。

生物杀菌剂对烟草镰刀菌根腐病的防治效果及农艺性状的影响

【目的】筛选防治烟草镰刀菌根腐病的有效药剂,促进生物菌剂在烟草生产上应用。【方法】以10~9cfu/g NJ13WP(Bacillus methylotrophilus)、10^(10) cfu/g FG14 WP(B.amyloliquefaciens)、10~9 cfu/g NT35 WP(B.velezensis)和10^(10) cfu/g FS6WP(B.amyloliquefaciens)4种生物杀菌剂为材料,采用生长速率法测定4种生物杀菌剂对烟草镰刀菌根腐病菌的室内毒力,采用灌根法进行病害的田间药效试验,并测定烟草的农艺性状。【结果】10^(10)cfu/g FG14和10~9 cfu/g NJ13 2种生物杀菌剂对烟草镰刀菌根腐病菌的EC_(50)值分别为0.342和0.581mg/L,109cfu/g NT35和10^(10) cfu/g FS6 2种生物杀菌剂对烟草镰刀菌根腐病菌的毒力较强,其EC_(50)值分别为2.655和8.189mg/L。4种生物杀菌剂田间防效达42.97%～70.19%,其中10~9 cfu/g NT35 1 350～2 250g/hm^2处理防治效果较好,防效达63.60%～70.19%;防治效果超过50%的生物杀菌剂对烟草农艺性状产生了一定的影响,对烟草根、茎、叶生长均有不同程度的促进作用。【结论】10~9 cfu/g NT35 1 350～2 250g/hm^2、10~9 cfu/g NJ13 1 350～1 800g/hm^2、10^(10) cfu/g FG14 2 250g/hm^2和10^(10) cfu/g FS6 2 250g/hm^2处理对烟草镰刀菌根腐病的田间防治效果较好,防效在60%以上。

烟草镰刀菌根腐病拮抗细菌的筛选鉴定及促生防病效果

为挖掘对烟草镰刀菌根腐病具有较强拮抗作用的生防菌株,采用稀释涂布平板法从健康烟株根际土壤中分离纯化对烟草镰刀菌根腐病(Fusarium root rot)主要病原具有一定拮抗作用的细菌,进行形态学、生理生化特征和16S rDNA序列分析鉴定,并测定促生防病效果。经平板对峙测定,筛选出2株对烟草镰刀菌根腐病病原具有较好抑制作用的菌株YX53和YX72,对茄病镰刀菌(F.solani)的抑制效率分别为83.66%和73.54%,对尖孢镰刀菌(F.oxysporum)的抑制效率分别为57.57%和55.89%;2菌株无菌发酵滤液对病原孢子萌发抑制率为84.82%~100%,其挥发性化合物可抑制病原菌丝生长或产孢,且对烟草疫霉菌(Phytophthora nicotianae)、根串珠霉菌(Thielaviopsis basicola)等也有抑制效果。鉴定结果表明,YZ53和YX72分别为蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus和枯草芽孢杆菌B. subtilis。经2菌株处理的烟苗胚根增长率分别达到了67.86%和161.61%,盆栽烟苗根长、最大叶面积、鲜质量等均有所增加;YX53盆栽防病效果在89.47%以上,YX72在99.53%以上。

烟草镰刀菌根腐病抗性鉴定方法研究

为获得不同烟草品种镰刀菌根腐病抗性的鉴定方法,采用镰刀菌粗毒素幼芽接种、孢子悬浮液培养、带菌菌谷接种、离体叶片菌饼接种、草酸局部注射等5种方法对4个品种(小黄金1025、中烟100、长脖黄、664-01)的镰刀菌抗病性进行了研究。结果表明,镰刀菌毒素液胁迫法可以鉴定品种的抗感程度,适宜体系毒素浓度为8%,处理时间6 d;镰刀菌孢子悬浮液接种法可以鉴定品种的抗感程度,适宜体系孢子液浓度为107个/mL,处理时间4 d;带菌菌谷接种也可以鉴定品种的抗感程度,适宜体系菌谷比例为20%,处理时间9 d;离体叶片用菌饼和草酸液处理,能区分品种的抗感性,但不能区分品种的抗感程度。研究结果认为孢子悬浮液接种法和带菌菌谷接种与其他3种方法相比可以准确评价品种对镰刀菌根腐病的抗感性。

广东韶关烟区烟草镰刀菌根腐病病原鉴定及致病性分析

为明确广东韶关烟草镰刀菌根腐病菌种类及致病力,在珠玑、始兴、南雄和乌茎采集根腐病样本,用组织分离法分离病原菌,盆栽接种带菌麦粒测定其致病性,观察菌株形态,基于EF-1α和β-Tub基因序列构建发育树鉴定病原菌。结果表明,获得45株镰刀菌,通过形态特征和分子技术鉴定为茄病镰刀菌Fusarium solani、共享镰刀菌F.commune、藤仓镰刀菌F.fujikuroi和尖孢镰刀菌F.oxysporum,分别占比42.22%,26.67%、20.00%和11.11%,对烟草均有致病性,强弱排列为F.commune≈F.fujikuroi>F.oxysporum>F.solani。本研究可为广东韶关地区烟草镰刀菌根腐病的防治提供依据。

烟草尖孢镰刀菌拮抗真菌的筛选鉴定及促生作用研究

为获得烟草镰刀菌根腐病拮抗真菌菌株,试验以河南省豫中烟区烟草根际土壤为试材,以主要致病菌尖孢镰刀菌Fusariumoxysporum为主要靶标,采用稀释涂布平板法分离获得土壤真菌371株,平板对峙培养法测定获得1株具有明显抑制效果的拮抗菌株,利用形态学和分子生物学的方法将其鉴定为棘孢木霉Trichoderma asperellum Tr-0111。抑制效果测定表明,该菌株对尖孢镰刀菌的抑制率最高可达93.13%,对根串珠霉菌、拟茎点霉、链格孢菌等其他8种烟草病原菌均具有较强的抑制效果。促生作用测定结果表明,菌株发酵液使烟草种子萌发率提高5.34%,烟苗根长增长率为62.39%,对盆栽烟草的最大叶面积和地上部鲜重也具有显著的促生效果。为进一步相关机理的研究和生防菌剂的研制奠定了基础。

基于FUNGuild的镰刀菌根腐病发病烟株根际真菌群落研究

为了解镰刀菌根腐病发病烟株与未发病烟株在根际真菌群落结构与功能上的差异,联合应用高通量测序和FUNGuild技术研究了镰刀菌根腐病发病烟株与未发病烟株根际土壤中的真菌群落,结果表明:(1)镰刀菌根腐病发病烟株根际真菌群落的Shannon指数为4.14,而未发病烟株则高达4.71,未发病烟株根际真菌群落多样性显著高于发病烟株,镰刀菌根腐病发病烟株与未发病烟株根际土壤中的真菌群落在组成上有显著差异;(2)镰刀菌根腐病发病烟株根际真菌以病理营养型为主,占54.64%,而未发病烟株根际真菌则以腐生营养型为主,占46.10%;(3)镰刀菌根腐病发病烟株根际的病原菌相对丰度为30.73%,显著高于未发病烟株的1.12%,镰刀菌在病原菌群落中占绝对优势地位。高通量测序与FUNGuild联用可对土传病害感病烟株的根际优势病原真菌群落进行准确鉴定,可为烟草病害的防控提供科学参考。

烟草镰刀菌根腐病防治药剂的筛选

为筛选防治烟草镰刀菌根腐病高效、安全的复配剂或包衣剂,采用菌丝生长速率法测定了10种内吸性化学杀菌单剂和10种生物杀菌单剂(共20种)对烟草主要致病菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的室内生物活性,并通过盆栽试验验证其防治效果。毒力测定结果表明,20种杀菌剂均对烟草尖孢镰刀菌有不同程度的抑制作用,化学杀菌剂的抑制效果整体较生物杀菌剂的抑制效果显著,化学杀菌剂中500 g/L氟啶胺SC、25%戊唑醇WP、40%苯醚甲环唑SC、20%抑霉唑EW的EC;分别为0.0571、0.1187、0.3280、0.4459μg/mL;生物杀菌剂中1.8%阿维菌素EC、5%香芹酚AS、0.01%芸苔素内酯EC的EC;分别为10.3870、18.8732、32.3437μg/mL。盆栽试验结果表明,氟啶胺8000倍液、戊唑醇2000倍液、苯醚甲环唑1200倍液和芸苔素内酯原液的盆栽防效较高,分别为51.51%、75.75%、62.12%和62.12%。因此,可选择氟啶胺、戊唑醇、苯醚甲环唑和芸苔素内酯用于复配剂、包衣剂的研发以及田间烟草镰刀菌根腐病常规化学药剂的轮换使用和综合防控。

烟草镰刀菌根腐病病原菌的鉴定及其对5种杀菌剂的敏感性分析

为筛选防治烟草镰刀菌根腐病的有效农药,降低该病害对烟叶产量和质量的影响,采用显微观察、进化树分析以及接种鉴定的方法,对从河南省襄城县烟草镰刀菌根腐病发病烟株根部分离出的病原菌NC-11进行形态学鉴定、分子鉴定及致病性鉴定,并选用5种杀菌剂对其进行毒力测定,对其中抑菌效果最好的杀菌剂进行田间防效验证。结果表明,从烟草镰刀菌根腐病发病烟株根部分离出的病原菌NC-11为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporium)。供试5种杀菌剂对NC-11菌丝生长的抑制作用存在显著差异,以62.5 g/L精甲·咯菌腈悬浮种衣剂的抑制效果最好,其EC50为0.186 2 mg/L,对病原菌的菌丝生长抑制率最高可达97.27%;68%精甲霜·锰锌水分散粒剂的抑制效果最差,其EC50为203.152 2 mg/L,质量浓度为1 000.00 mg/L时对病原菌的菌丝生长抑制率最高为66.53%。田间验证结果表明,62.5 g/L精甲·咯菌腈悬浮种衣剂在首次施药46 d后相对防效达72.69%。因此,可将62.5 g/L精甲·咯菌腈悬浮种衣剂作为防治烟草镰刀菌根腐病的首选药剂。

云南省烟草镰刀菌根腐病病原鉴定

【背景和目的】烟草镰刀菌根腐病(Fusarium root rot)影响烟叶产量和品质,为明确云南省烟草镰刀菌根腐病病原种类。【方法】采用组织分离法分离病原并进行单孢纯化;结合形态学和分子生物学rDNA-ITS与EF-1α序列鉴定病原;采用灌根接种法测定病原菌的致病性。【结果】获得的300个菌株在PDA平板上均呈絮状,菌丝白色、紫色或粉红色,大型分生孢子无色、多孢、多为镰刀形;小型分生孢子无色、多无隔,呈椭圆形或纺锤形。经序列比对将300菌株鉴定为7个种,其中227株为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),占比75.7%;43株为茄病镰刀菌(F. solani);16株为共享镰刀菌(F. commune);8株为木贼镰刀菌(F. equiseti);3株为层出镰刀菌(F. proliferatum);2株芬芳镰刀菌(F. redolens)和1株轮枝镰刀菌(F. verticillioides)。【结论】云南省烟草镰刀菌根腐病病原为尖孢镰刀菌、茄病镰刀菌、共享镰刀菌、木贼镰刀菌、层出镰刀菌、芬芳镰刀菌和轮枝镰刀菌,其中尖孢镰刀菌为优势菌。

云南省烟草镰刀菌根腐病菌遗传多样性分析

【背景和目的】尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)引起的根腐病是烟草主要的土传病害,在云南烟区普遍发生。为分析云南省不同地理来源尖孢镰刀菌的遗传差异性和亲缘关系。【方法】采用ISSR(inter-simple sequence repeat)和SRAP(sequence-related amplified polymorphism)分子标记技术分析40株菌株遗传多样性。【结果】(1)采用ISSR技术,供试的7条引物共扩增出53条条带,其中多态性条带44条,平均多态性条带83.02%。菌株间的遗传相似系数为0.49~0.96,存在遗传背景差异。遗传相似系数为0.68时,40株菌株可分为3个类群。(2)采用SRAP技术,供试的7对引物共扩增出44条条带,其中多态性条带32条,平均多态性条带72.73%,菌株间的遗传相似系数为0.55~0.96。遗传相似系数为0.70时,40株菌株可分为3个类群,结果与ISSR一致。【结论】云南省烟草尖孢镰刀菌菌株间遗传差异大,ISSR和SRAP分子标记技术可用于烟草尖孢镰刀菌的遗传多样性分析。

烟草镰刀菌根腐病的病原鉴定

为了探明烟草镰刀菌根腐病的病原菌分类地位,2015—2017年从福建省三明市主要烟区采集的烟草根腐病病样中分离获得31个镰孢菌属菌株(F1~F31)。对所分离的菌株进行形态学甄别、系统进化分析、种特异分子鉴定及致病性测定,结果表明分离菌株显微形态特征与尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和共享镰刀菌(F.commune)相似;采用贝叶斯法(Bayesian Analysis)对4株分离菌F-04、F-18、F-19和F-28的rDNA基因内间隔区(IGS)基因作系统发育分析,结果显示这4个菌株同F.commune聚为一类并与F.oxysporum明确区分;特异性引物扩增鉴定结果表明分离菌株均为F.commune。通过室内与田间接种试验验证了分离菌株F.commune的致病性,明确其为烟草根腐病的主要病原物,这是我国首次报道共享镰刀菌F.commune引起烟草根腐病。

大蒜根系分泌物对烟草镰刀菌根腐病的控制作用

为探讨大蒜根系分泌物对烟草尖孢镰刀菌的抑菌活性,采用琼脂法培养大蒜,利用气相色谱-质谱技术(GC-MS)测定其主要成分,研究大蒜根系分泌物对烟草尖孢镰刀菌根腐病的影响。对菌丝生长速率和孢子萌发的测定表明,当大蒜根系分泌物粗提物浓度为1 g/mL时,其菌丝生长抑制率为30.56%,孢子萌发抑制率高达100.00%。大蒜根系分泌物主要成份2,6-二异丙基苯酚和邻苯二甲酸二丁酯分别对其菌丝生长和孢子萌发具有较强的抑菌作用。邻苯二甲酸二丁酯的防控效果较好,其浓度为5 mmol/L,接菌21 d后其病情指数为55.00,防控效果达32.38%。大蒜根系分泌物及主要成分对尖孢镰刀菌所引起的烟草根腐病有显著的抑制作用,这为研制含大蒜成分的植物保护剂和间作套种大蒜防控烟草尖孢镰刀菌根腐病提供科学参考。

连作烟田健株与根腐病感病烟株根际土壤微生物多样性研究

为探明连作烟田健株与根腐病感病烟株根际土壤细菌、真菌群落的变化规律,利用高通量测序技术,以撂荒2 a以上土壤为对照(CK),对比分析了连作2、4、8 a烟田健株(HT2、HT4、HT8)和根腐病感病烟株(ST2、ST4、ST8)根际土壤微生物多样性及土壤环境因子对微生物群落结构的影响。结果表明,连作烟田健株和病株根际土壤细菌优势菌群相对丰度趋向性增加,增幅分别为9.2%~29.5%和26.4%~29.8%,真菌优势菌群相对丰度趋向性降低,降幅分别为53.4%~65.7%和19.0%~67.8%;细菌优势菌群相对丰度以芽单胞菌属(Gemmatimonas)、弗拉托氏菌属(Frateuria)和出芽菌属(Gemmata)增幅最大,真菌优势菌群相对丰度以青霉菌属(Penicillium)降幅最大,除HT2样本病原菌镰刀菌属(Fusarium)相对丰度降低外,健株(HT4和HT8)和病株(ST2、ST4和ST8)样本病原菌镰刀菌属相对丰度大幅增加(123.4%~576.8%)。健株和病株根际土壤细菌群落丰富度和多样性整体上随烟田连作年限的增加而增加,真菌群落丰富度和多样性随连作年限的延长呈先降后升趋势。不同连作年限烟田健株样本间及病株样本间根际土壤的细菌和真菌群落组成差异较大。土壤速效钾含量和pH值是影响土壤细菌群落分布的核心化学因子,贡献值分别为8.80%和8.62%,土壤速效磷含量是影响真菌群落分布的核心化学因子,贡献值为11.64%。综上,烤烟连作和感染根腐病烟株根际土壤细菌群落丰富度、多样性及优势种群的丰富度提高,但真菌优势种群丰富度和真菌有益菌群相对丰度均降低,病原菌菌群相对丰度增加。在生产实践中,降低连作年限、及时清除烟株病残体是解决烟田微生物群落结构失衡的关键。

洛阳市烟草黑胫病与根腐病概述

烟草黑胫病和根腐病是洛阳地区危害最为严重的根茎病害。本文通过总结国内外文献,从病害症状、病原菌、致病机理几个方面概述了2种病害的特征和特性,为病害防治的研究提供理论依据。

烟草镰刀菌根腐病研究进展

镰刀菌根腐病是烟草苗期的一种次级病害,在烟草苗期到大田生长期均可发病,控制其危害对烤烟的可持续发展相当重要。详细介绍了烟草镰刀菌根腐病的病害症状、病原菌、侵染循环、发病机制,并对目前烟草镰刀菌根腐病的防治方法及防治展望进行阐述,旨在为研究此病提供参考。