烟草品种RAPD分子标记多态性与品种鉴定

用235个引物对来源于中国，美国等国的23个烤烟和地方晒晾烟品种基因组进行了RAPD分子标记分析。结果表明：235个不同的随机引物中有25个（占10．64％）可以扩增出至少在两个品种间表现多态性的产物，利用其中16个引物扩增出128条带，其中46条品种间具有多态性。建议将RAPD技术应用于烟草品种鉴定。

烟草RAPD反应体系优化及品种多态性标记研究

利用鲜烟叶材料对RAPD反应体系进行了优化,建立了一个适合烟草的比较稳定的RAPD反应体系,并对影响RAPD反应的主要因素进行了探讨。利用该稳定体系,对具有两对相对性状差异的两个烤烟品种进行了多态性标记研究熏从500个引物中筛选到4个有多态性的引物,这4个引物扩出的多态性片段可作为鉴定两个品种的分子标记。初步分析认为,两个品种的多态性标记可能与香气性状和抗病性状连锁。

中烟特香301特异SNP指纹图谱构建及应用

指纹图谱可以用于品种真实性鉴定,为品种的推广种植和工业利用提供技术保障。本研究采用全基因组重测序技术,对包括烤烟新品种中烟特香301在内的33份烟草种质资源进行了单核苷酸多态性(SNP)变异分析,从中鉴定获得中烟特香301特异SNP位点268个。利用包括烤烟、雪茄烟、香料烟、白肋烟、晒烟在内的62份不同类型烟草种质资源进行了筛选,初步获得有效SNP标记21个。以2022—2023年山东产区的中烟特香301及其他5个主栽品种的大田新鲜烟叶和初烤烟叶为材料,利用上述21个SNP标记进行品种真实性检测,结果显示,18个SNP标记在所有烟叶中可全部检测到中烟特香301特异SNP位点。利用这18个SNP标记构建的指纹图谱可以用于中烟特香301品种真实性鉴定。

烟草品种的SCAR标记鉴别

利用6对SCAR引物对12个烟草(Nicotiana tabacum L.)品种复烤叶片的基因组DNA进行SCAR-PCR扩增分析。根据6个SCAR标记在不同烟草品种中的扩增差异,建立了12个烟草品种的分子ID和鉴别路线,分析了SCAR标记鉴别遗传差异较小烟草品种的可行性。结果表明:利用组合标记策略,6个SCAR标记可准确地区分12个烟草品种中具有相同抗感性,亲缘关系较近的烟草品种,并可用于复烤叶片的品种鉴定。

烟草品种的DNA指纹图谱和品种鉴定

随机扩增多态性DNA(RAPD)是目前常用的DNA指纹图谱技术。采用改进的“ROSE法”提取DNA ,并建立了重复性较好的RAPD标准分析条件。在此标准条件下 ,检测了烟草 10个品种材料基因组的多态性。经 10个引物扩增 ,在得到的 53条扩增带中 ,有 10个片段为 10个材料所共有 ,多态性达81.1%。其中引物P7的扩增图谱 ,各品种间可以互相区别 ,差异明显 ,可用作烟草

二元表法和MCID法快速鉴定烟草品种

为建立快速鉴定烟草品种的方法,利用RAPD分子标记方法对13个烟草品种进行鉴定,分别应用二元表法和人工绘制品种树图(Manual cultivar identification diagram,MCID)法2种分析方法对烟草品种DNA指纹图进行分析。结果表明:从150条特异性引物中共筛选出4条稳定性好、特异性高的随机引物,得到4张DNA指纹图,利用2种分析方法对指纹图分析后成功得到13个品种的分子ID,并构建出13个烟草品种的MCID。研究发现,2种分析方法均可有效鉴定烟草品种,其中,MCID法的直观性和可加性优于二元表法,操作性更强,当供试品种较多时MCID法更简单实用,可用于大量烟草品种的快速鉴定。

银耳干品的DNA提取及随机扩增多态性分析

银耳子实体中因含有大量的多糖和蛋白质,严重干扰其基因组DNA的提取。本实验建立一种银耳干品(子实体)中DNA的提取方法,利用此法可直接以银耳干品为材料提取DNA,不需芽孢分离和菌丝培养步骤,而且DNA产量高、质量好,可用于随机扩增多态性(random amplified polymorphic,RAPD)DNA分析。RAPD分析的结果显示,本实验所选取的银耳样品间存在DNA多态性。研究结果将有助于当前食品分析检测中直接以银耳干品为材料进行DNA提取及品种鉴别等分析工作。