云南烟草内生细菌菌群密度及分布特征

采用研磨组织稀释分离法分离烟草植株中的内生细菌,对云南省不同品种、不同种植地区、不同组织器官、不同生长期的烟草内生细菌的菌群密度进行研究.结果表明,烟株的根、茎、叶中均存在大量的内生细菌,烟草内生细菌的分布存在品种差异、生长期差异、组织部位差异.有的内生细菌为常住菌群,有的为暂居菌群.在整个生育期中,以成熟期的内生细菌的数量最多.内生细菌的数量在云烟85、KRK26、K326、红花大金元植株不同器官中的分布规律依次为：根＞叶＞茎,叶＞根＞茎,叶＞根＞茎,根＞叶＞茎.4个品种烟草生长期总带菌量平均值波动幅度为2.6 ～4.96 log cfu/g.fw.种植在不同地区的同一烟草品种,内生细菌数量不尽相同.在分离到的所有内生细菌中以Baccillus属细菌分布最广,巳鉴定出8个种,包括Bacillm pumilm,B.amyloliquefaciens,B.licheniformis,B.subtilis,B.megaterium,B.flexus,B.simplx,B.cereus.对烟草这一重要经济作物内生细菌菌群密度动态变化进行研究,可为科学认知和利用这类微生物资源奠定基础.

烟草内生细菌种群动态研究

经过对 7个田间种植的烟草品种不同栽培时期、不同组织内生细菌种群动态研究表明 ,不同品种内生细菌种群有一定程度差异。同一品种中有的内生细菌为常住菌群 ,有的为暂居菌群 ,带菌量根中最高 ,茎次之 ,叶中最低。在整个生育期中 ,7个品种内生细菌数量表现出从种子到出苗期大幅增加 ,从出苗期到十字期又大幅度下降 ,随后从缓苗期到伸根期再一次急剧增加并维持在一个较高水平。通过对烟草这一重要经济作物内生细菌种群动态变化研究 ,可为烟草病虫害生物防治和促生增产研究提供理论基础。

烟草内生细菌种群特征分析

为探明烟草内生细菌种群特征及其与烟草的关系,采用研磨组织稀释分离法分离不同品种、不同生长期、不同器官的烟草内生细菌,以各菌群出现与否为指标,用类平均法进行系统聚类分析,对内生细菌的种类组成,分布特征进行了研究。结果表明,烟草内生细菌种类组成存在品种差异、生长期差异和组织部位差异;优势菌群随分离部位和生长时期的不同而变化。Bacillus sp.和Rhizobium sp.是4个品种烟草叶片共有的优势类群,从苗期到团棵期,内生细菌的种类在增加,B.pumilus广泛存在于成熟期烟草的根、茎、叶中,且为主要菌群。部分内生细菌具有组织偏好性,Micrococcus sp.和Staphylococcus sp.对烟草的茎部具有偏好性,B.cereus对烟草叶片具有偏好性。研究结果为烟草有益内生细菌的筛选奠定了基础,并为内生细菌在其它植物中的开发利用提供理论依据。

番茄内生细菌种群动态分析及拮抗菌株的筛选

采用研磨组织稀释分离法对3个种植地区的番茄内生细菌的种群分布、数量变化规律进行了初步探讨。共分离、纯化得到内生细菌374株,经形态及理化特征鉴定,分属10个不同的属,13个种。其中假单孢菌属Pseudomonas sp.,黄单孢菌属Xanthomonas sp.;肠杆菌属Entenobacter sp.和芽孢杆菌属Bacillus sp.为优势种群。内生细菌在番茄植株体内种群数量从0.21×104～13.82×104cfu/g鲜重之间,但不同品种、组织、生育期及种植地,内生细菌的种群和数量各不相同,各组织中内生细菌的种群及数量根中最多,其次是茎和叶,成株期内生细菌无论种类和数量都明显高于苗期。采用平板对峙法从分离的内生细菌中筛选出对番茄灰霉病菌具有体外拮抗活性的菌株32个,占菌株总数的8.56%;25个菌株对番茄叶霉病菌有抑制作用,占菌株总数的6.68%;对灰霉病菌和叶霉病菌都具有拮抗作用的菌株20个,占菌株总数的5.35%。对灰霉病菌有强拮抗作用的菌株12个,对叶霉病菌有强拮抗作用的菌株仅1个,其中芽孢杆菌是主要的类群。

广西烟草内生细菌的动态分布及其对烟草疫霉的拮抗作用

从广西百色市的9个烟草品种中分离出470株内生细菌菌株,经常规细菌鉴定方法和16S rDNA序列分析,获得的菌株分别属于肠杆菌属(Enterobacter)、沙雷氏菌属(Serratia)、芽孢杆菌属(Bacillus)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、寡养单胞菌属(Stenotro-phomnas)和假单胞菌属(Pseudomonas),其中土壤杆菌属和肠杆菌属为烟草内生细菌中的优势种群。烟草内生细菌的类群和数量随烟草种植地点、品种、器官和生育期的不同而不同。烟草内生细菌在根部数量最多,其次是茎和叶。内生细菌的总量从缓苗期到旺长期增加,之后显著下降。从470株烟草内生细菌菌株中筛选出对烟草疫霉有拮抗作用的菌株56株,其中芽孢杆菌菌株Y10的抑制效果最好,抑制率达91.48%,室内盆栽防治效果为68.72%。

宁南霉素对烟草叶片内生细菌多样性的影响

为了明确施用宁南霉素和生防菌对烟草内生菌群落的影响,采用宁南霉素和烟草内生解淀粉芽孢杆菌YN201732(Y32)不同先后喷施组合,提取处理后不同时间段烟草叶片,运用高通量测序技术测定内生细菌16S rDNA序列,分析菌群多样性。结果表明,仅喷施Y32发酵液(10^(7) cfu/mL)的叶片内细菌物种多样性高于其他处理。先喷施Y32发酵液,24 h后再喷施宁南霉素的叶片内细菌物种丰富度高于先喷施宁南霉素,24 h后再喷施Y32发酵液的处理。所有样品中优势细菌属均为泛菌属、沙雷氏菌属、芽孢杆菌属和假单孢菌属,它们的相对丰度之和大于80%。Y32发酵液能有效提高烟草叶片新陈代谢等生命活动,加快生命进程。宁南霉素能降低烟草内生细菌物种多样性,而烟草内生细菌Y32能够提高烟草叶片内生细菌物种多样性,这一结果对利用内生菌开展生物防治具有重要指导意义。

内生枯草芽孢杆菌B-001对烟草幼苗的促生作用及其生长动态

为了明确内生枯草芽孢杆菌B-001对烟草的促生机制和对烟草青枯病的防治效果,采用温室盆栽试验、内源激素检测及处理烟草植株B-001菌量追踪测定等方法研究内生枯草芽孢杆菌B-001的作用机制及其自身在烟草体内的群体数量动态等。结果表明:施用B-001菌株后,烟草幼苗鲜重增加了43.01%～57.70%;烟草中吲哚乙酸、赤霉素和玉米素核苷的含量增加,而脱落酸的含量降低;苗期至旺长期的烟草K326中B-001数量大幅增加,但到成熟期数量大幅下降;1×107、1×108、1×109、1×1010cfu/mL的菌悬浮液对烟草青枯病的防治效果分别为50.3%、62.8%、70.2%、70.3%。