TLR2配体肽聚糖对骨髓间充质干细胞增殖和细胞周期的影响

本研究探讨不同剂量的Toll样受体2(TLR2)的配体肽聚糖(peptidoglycan,PGN)在体外对人骨髓间充质干细胞(BM-MSC)增殖和细胞周期的影响。采用Ficoll淋巴细胞分离液、密度梯度离心法分离BM-MSC,体外扩增,并通过流式细胞术检测其表面标志以鉴定纯度;将分离培养的BM-MSC按一定浓度接种于96孔板中,以1、10、20μg/ml的PGN与BM-MSC共培养为实验组,不加PGN的BM-MSC为对照组;培养第1至第7天,MTT法检测BM-MSC的增殖情况;以上述浓度的PGN与BM-MSC共培养72小时后,流式细胞术检测BM-MSC的细胞周期。结果表明,BM-MSC与PGN共培养后,BM-MSC的增殖指数明显增加,呈时间、剂量依赖性,以10μg/mlPGN促BM-MSC增殖作用最明显。与对照组比较,PGN干预组G0/G1期细胞比例降低,S期和G2/M期细胞比例增加,以10μg/ml组最明显。结论:在培养条件下PGN可以促进更多的BM-MSC进入DNA合成期,从而有更多的细胞分裂,产生大量的增殖细胞,并且这种影响呈时间、剂量依赖性。

缺血预处理对缺血再灌注损伤大鼠肾组织TLR2表达的影响

目的观察缺血预处理对缺血／再灌注损伤大鼠肾组织Toll样受体2（TLR2）表达的影响。方法将24只雄性SD大鼠随机分为3组：假手术对照组（SHAM组）、单纯缺血再灌注组（I／R组）和缺血预处理组（IPC组），每组8只。于术后24h留取各组大鼠血标本和肾组织。检测各组大鼠血肌酐（SCr）和尿素氮（BUN），肾组织切片行HE染色后观察其病理学改变，酶联免疫吸附法（ELISA）检测肾组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量，实时荧光定量多聚酶链反应检测肾组织TLR2mRNA表达，Westernblot检测肾组织TLR2蛋白表达。结果与SHAM组相比，I／R组大鼠SCr和BUN升高，肾组织TNF-α含量和TLR2蛋白表达升高，差异均有统计学意义（P〈0．01）；与I／R组相比，IPC组大鼠SCr和BUN降低，肾组织TNF-α含量和TLR2蛋白表达降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论缺血预处理可能通过抑制大鼠。肾组织TLR2表达及其信号通路，下调TNF-α的表达，发挥其肾脏保护作用。