GAD抗原肽抗体对IDDM糖尿病基因治疗研究

目的 探讨GAD抗原肽抗体诱导特异性免疫耐受对IDDM糖尿病的基因治疗。方法 构建Ig MBAE、GAD Ig MBAE融合蛋白表达载体 ,制备产重组病毒的病毒包装细胞 ,经逆转录病毒载体介导基因转染B细胞 ,对非胖型糖尿病小鼠 (NOD)进行基因治疗 ,以血糖指标和病理组织学分析评价疗效。结果 1.酶切鉴定证实Ig MBAE、GAD Ig MBAE表达载体构建正确。 2 .RT PCR可检测到转染 4 8hGAD Ig B细胞中的GAD Ig融合基因表达 ;Westernblot和双夹心ELISA可检测到转染细胞胞浆和细胞上清中的GAD Ig融合蛋白 ;3.在治疗第 36周 ,GAD Ig B细胞治疗组的糖尿病发病率由B细胞和Ig B细胞组的10 0 %降低至 5 5 .5 % ,胰腺组织病理分析提示 ,GAD Ig B细胞治疗组的胰岛组织形态接近正常 ,胰岛组织中淋巴单核细胞的浸润得到有效控制。结论 GAD抗原肽抗体通过逆转录病毒介导的基因治疗 ,可有效地延迟NOD小鼠的糖尿病发病及明显降低发病率。