刺糖多糖调控Toll样受体4对免疫抑制活性的影响

揭示刺糖多糖对Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)的调控机制。构建C57BL/6J免疫抑制小鼠模型及TAK-242抑制剂诱导的RAW 264.7模型,小鼠模型给予刺糖多糖组800 mg/kg以及RAW 264.7模型给予不同浓度的刺糖多糖(25、50、75、100μg/mL)进行干预。酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分别测定小鼠血清中细胞因子、RAW 264.7细胞因子分泌水平。蛋白免疫印迹(Western blot)与实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)法检测TLR4和髓样分化因子88(myeloiddifferentiationfactor88,MyD88)与肿瘤坏死因子相关的分子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)在相关组织和细胞中的表达。结果表明刺糖多糖显著提高了免疫抑制小鼠的脾脏指数、胸腺指数,以及血清中白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)和免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)的含量。在TAK-242抑制剂诱导的细胞模型中,刺糖多糖增加了白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)、TNF-α、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的分泌。此外,刺糖多糖逆转了TLR4和MyD88/TRAF6的表达下调。刺糖多糖可以通过调节MyD88途径激活TLR4受体的免疫应答。

藏猪与杜长大三元猪免疫器官和组织中Toll样受体与抗菌肽基因的表达差异分析

【目的】在哺乳动物中,Toll样受体和抗菌肽基因是先天免疫系统的重要组成部分,在对抗病原体侵袭过程中起至关重要的作用。针对藏猪和杜长大三元猪的Toll样受体和抗菌肽基因在不同免疫器官或组织中的表达差异进行探索,以揭示这些基因对于抗病能力和免疫反应的潜在贡献,为筛选抗病分子标记提供理论支撑。【方法】通过qPCR对6月龄藏猪和杜长大三元猪肺脏、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结、颌下淋巴结和脾脏中Toll样受体基因(TLR1~TLR9)和两种抗菌肽基因(PBD-1和PR-39)的mRNA丰度进行检测。【结果】在藏猪的免疫器官或组织中Toll样受体与抗菌肽基因的m RNA表达大多数显著高于杜长大三元猪。其中,肺脏中TLR1、TLR2的m RNA表达量均提高50%左右,PR-39提高2.6倍;肠系膜淋巴结中TLR4的表达提高40%,TLR1、PR-39的表达分别提高88%和3倍;腹股沟淋巴结中TLR1、TLR2的表达提高约2倍,TLR9、PR-39的表达提高70%,PR-39的表达更是提高了7倍多;颌下淋巴结中TLR1、TLR2、TLR4、TLR7的表达均高出2倍以上,PR-39的表达也高出近7倍,它与腹股沟淋巴结中的水平相近;脾脏中TLR1的表达上升3.5倍,与在颌下淋巴结中的表达结果相似。TLR4、TLR9的表达上升50%左右,PR-39的表达上升2.5倍。【结论】藏猪相对于杜长大三元猪,在多个免疫器官或组织中的Toll样受体和抗菌肽基因表现出更高的表达水平。暗示藏猪可能拥有更强大的先天免疫能力,能够产生更有效的局部或系统免疫反应对抗病原微生物的感染。研究结果为识别抗病分子标记提供了重要的理论支持,有望为进一步改良藏猪和其他猪种的抗病性提供科学依据。

巨型艾美耳球虫感染对鸡Toll样受体的影响

为了探究巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)感染对宿主局部免疫组织盲肠扁桃体和系统免疫组织(脾脏和外周血)中Toll样受体(Toll like receptor,TLR)的影响,用巨型艾美耳球虫感染雏鸡,感染后第0、3、7和11天,采集鸡盲肠扁桃体、外周血和脾脏淋巴细胞,用实时荧光定量PCR检测上述组织中8种鸡TLR的mRNA水平变化。结果显示:TLR4和TLR21 mRNA水平在3种组织中无显著变化;TLR2 mRNA水平在感染后第3天开始在外周血和脾脏中显著下降(P<0.05),在盲肠扁桃体中第3和7天无显著变化,在第11天显著上升(P<0.01)。TLR1、TLR3、TLR5、TLR7和TLR15 mRNA水平在3种组织中显著上升(P<0.05),但应答时间有所差异,具体为TLR1和TLR3 mRNA水平在盲肠扁桃体中在第3天开始上升,而在外周血和脾脏中第7天开始上升;TLR5和TLR15 mRNA水平在外周血和脾脏中第3天开始上升,而在盲肠扁桃体中第7天开始上升。结果表明:巨型艾美耳球虫感染上调宿主3种组织中的TLR1、TLR3、TLR5、TLR7和TLR15 mRNA水平,下调外周血和脾脏中的TLR2 mRNA水平;盲肠扁桃体TLR1和TLR3 mRNA水平上升早于外周血和脾脏,而其TLR5和TLR15 mRNA水平上升晚于外周血和脾脏。本研究为揭示鸡TLR在抗球虫感染中的作用提供依据,也为揭示鸡球虫先天性免疫机制提供参考。

鼻内针刺治疗病毒感染后嗅觉障碍的临床疗效及对Toll样受体3表达水平和炎症免疫反应的影响

目的探讨鼻内针刺治疗病毒感染后嗅觉障碍(post-viral olfactorydysfunction,PVOD)的临床疗效及对Toll样受体3(Toll-like receptor3,TLR3)表达水平和炎症免疫反应的影响。方法选取2020年1月—2021年10月黑龙江中医药大学附属第二医院收治的116例PVOD患者,采用随机数值表法分为对照组、鼻内针刺组各58例,分别予鼻用激素、鼻内窥镜下鼻内针刺治疗,连续治疗2周,评估两组临床疗效,记录不良反应情况;于治疗前后,进行Sniffin’Sticks主观嗅觉心理测试、嗅觉功能客观测试,检测外周血TLR3 mRNA、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)水平。结果治疗后,鼻内针刺组的总有效率为91.38%(53/58),明显高于对照组的77.59%(45/58)。治疗后,两组患者的Sniffin’Sticks测试结果均明显好转(P<0.05);且鼻内针刺组治疗后Sniffin’Sticks测试结果整体优于对照组(P<0.05)。鼻内针刺组治疗后的P2波潜伏期显著短于本组治疗前及对照组同期,P2波振幅显著大于本组治疗前及对照组同期(P<0.05)。鼻内针刺组治疗后的外周血TLR3 mRNA及炎性因子TNF-α、IL-6水平均显著低于本组治疗前及对照组同期(P<0.05)。治疗期间,两组均未出现严重不良反应。结论鼻内针刺治疗PVOD疗效显著,有助于改善患者的嗅觉功能,其机制可能与下调TLR3表达水平,减轻炎症免疫反应水平有关。

Toll样受体在冠心病中的研究进展及靶向药物分析

冠心病(CHD)是一种以慢性炎症刺激和斑块聚集为特征的心血管疾病(CVD),严重威胁着成千上万患者的生命安全。研究发现Toll样受体(TLRs)通过介导免疫激活参与多种炎性因子的产生,进而在CHD的发生发展中发挥着复杂的双向调节作用。靶向TLRs的治疗具有抗动脉粥样硬化的潜在作用。本文就TLRs信号在CHD中的作用机制及TLRs相关抗动脉粥样硬化药物的最新研究进展做一综述。

Toll样受体及其抗病原感染作用的研究进展

Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)是最早发现的天然免疫受体家族,也是研究最为全面的模式识别受体(Pattern recognition receptors,PRR)。PRR识别病原体相关分子模式(Pathogen-associated molecule patterns,PAMP)诱导的天然免疫应答是宿主抵抗病原微生物感染的第一道防线。PRR主要由TLR、C-型凝集素受体、细胞质DNA感受器(如Cyclic GMP-AMP synthase),以及RIG-I样受体(RIG-I-like receptors)和NOD样受体(Nod-like receptors)等组成[1-2]。

Toll样受体家族在IgA肾病中的研究进展

越来越多的研究证实Toll样受体(TLR)家族在IgA肾病(IgAN)的发病机制中发挥重要作用,且TLRs与IgAN的临床表型及肾脏病理改变密切相关,因此,TLRs可能成为新的无创性生物学标志物和新的治疗靶点。然而,TLR家族成员众多,其在IgAN发病与进展不同阶段的作用尚未完全阐明。因此,该文就TLRs在IgAN中的作用机制,以及其作为潜在生物学标志物及治疗靶点的研究进展进行综述,以期为TLRs在IgAN中的进一步研究提供科学依据。

结核分枝杆菌靶向Toll样受体4对免疫细胞功能影响的研究进展

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)与宿主细胞相互作用往往决定结核病的发生及病程发展。结核分枝杆菌及其分泌蛋白与宿主免疫细胞如巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞等表面广泛表达的Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)结合,相应激活或抑制免疫细胞相关信号通路,影响细胞因子表达、细胞吞噬和抗原呈递等功能,引发炎症或死亡,表现为抗结核免疫或免疫逃逸。本文主要综述了TLR4信号通路在介导结核杆菌调控免疫细胞功能过程中可能发挥的作用,旨在为进一步揭示Mtb致病机制及结核病治疗药物研发提供新思路。

Toll样受体激活对间充质干细胞免疫调节功能的影响

目的探讨Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)激活对骨髓和脐带两种不同来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)免疫调节功能的影响,同时比较骨髓MSC与脐带MSC中TLR的表达情况。方法从关节置换术患者废弃的关节中取得骨髓,分离培养骨髓MSC。从健康产妇废弃的脐带中分离培养脐带MSC。采用TLR4激动剂脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)、TLR3激动剂聚肌胞苷酸[polyinosinic-polycytidylic acid,Poly(I:C)]分别预处理骨髓MSC或脐带MSC,然后与健康志愿者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)共培养,共培养结束后流式细胞术检测PBMC增殖情况。以实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测骨髓MSC和脐带MSC中TLR4、TLR3的基因表达水平。流式细胞术检测骨髓MSC和脐带MSC中TLR4、TLR3的蛋白表达水平。结果骨髓MSC与PBMC共培养实验结果显示,LPS预处理可以明显降低骨髓MSC对PBMC增殖的抑制效应,Poly(I:C)预处理对骨髓MSC免疫调节功能无显著影响。脐带MSC与PBMC共培养实验结果显示,LPS或Poly(I:C)预处理对脐带MSC抑制PBMC增殖的影响均不显著。与骨髓MSC比较,脐带MSC中TLR4、TLR3的基因和蛋白表达水平均明显更低。结论TLR4激活可以干扰骨髓MSC的免疫调节功能,但是TLR4或TLR3激活对脐带MSC免疫调节功能的影响并不显著,可能与脐带MSC中TLR4、TLR3的基础表达量低有关。

Toll样受体8及其免疫学功能研究进展

Toll样受体8(toll-like receptor8,TLR8)不但能识别某些人工合成的具有抗病毒和抗肿瘤作用的小分子化合物,还可识别单链RNA病毒、鸟嘌呤核苷酸衍生物、特定合成的单链寡核苷酸(oligoribonucleotide,ORN)及双链小干扰RNA序列。活化TLR8启动髓系分化因子88(myoloid differentiation factor 88,MyD88)依赖的信号通路,介导相应免疫应答。对TLR8及其免疫学功能深入系统的研究将对机体抗病毒感染和肿瘤治疗开辟新途径。本文对TLR8及其免疫学功能近年研究进展做了简要总结。

Toll样受体和树突状细胞:免疫激活传感器——2011年诺贝尔生理学或医学奖简介

Toll最早由德国科学家克里斯汀·纽斯兰芙哈(Christiane Nüsslein-Volhard)等于1985年发现,其功能为调控果蝇体节发育。1996年法国斯特拉斯堡国立研究中心的朱尔斯.霍夫曼(Jules Hoffmann)发现Toll基因产物与果蝇感受病原微生物入侵相关,其激活为进行有效防御所必需;1998年美国斯克里普斯研究所布鲁斯.博伊特勒(Bruce Beutler)发现对细菌致病产物脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)耐受的小鼠存在一个与果蝇Toll基因非常类似的突变受体基因,并证实这一Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)就是识别LPS的受体。这些发现表明哺乳动物与果蝇的先天性免疫激活采用类似的分子。他们两位也因发现了激活先天性免疫应答反应的传感器而分享2011年诺贝尔生理学或医学奖一半的奖金,另一半奖金由美国洛克菲勒大学的拉尔夫.斯坦曼(Ralph Steinman)独享。斯坦曼于1973年发现树突状细胞(dendritic cells,DCs),并证实其可激活T细胞,引发获得性免疫应答。进一步研究表明树突状细胞可感受由先天性免疫应答产生的信号并控制T细胞的激活,使免疫系统只对致病微生物产生应答从而避免对自身内源分子进行攻击。这些发现使我们对免疫系统的激活和调控机制有了深入的了解,有助于开发全新的疾病预防和治疗手段。

Toll样受体4对牙周膜干细胞免疫学特性的影响

背景:Toll样受体4及其配体脂多糖与牙周疾病的发生、发展密切相关,牙周膜干细胞的免疫学特性在牙周组织修复重建、牙周病的治疗中发挥重要作用,而Toll样受体4及其配体对牙周膜干细胞免疫学特性的影响还不清楚。目的:探讨Toll样受体4对牙周膜干细胞免疫学特性的影响。方法:分离、培养牙周膜干细胞,与10 mg/L的Toll样受体4配体脂多糖共同培养3 d。以未经脂多糖处理的牙周膜干细胞作为对照,观察脂多糖处理的牙周膜干细胞能否引起同种异体淋巴细胞的增殖,以及对混合淋巴细胞反应和植物血凝素引起的淋巴细胞增殖的影响。通过建立Transwell培养系统建立牙周膜干细胞+植物血凝素+异体外周血单个核细胞的反应体系,测定细胞上清液中的前列腺素E2浓度。在上述反应体系进行中和实验,观察被牙周膜干细胞抑制了的淋巴细胞重新发生增殖的情况。结果与结论:无论是否与脂多糖共培养,牙周膜干细胞都没有引起等量异体外周血单个核细胞增殖,都能够抑制植物血凝素引起的淋巴细胞增殖和混合淋巴细胞反应,但是脂多糖预处理牙周膜干细胞的免疫抑制作用显著低于无脂多糖组。在牙周膜干细胞+植物血凝素+异体外周血单个核细胞的反应体系中,前列腺素E2浓度显著升高。中和实验发现,前列腺素E2的拮抗剂吲哚美辛基本恢复了被牙周膜干细胞抑制的淋巴细胞增殖。提示,脂多糖减弱了牙周膜干细胞的免疫抑制特性,该效应由前列腺素E2减少引起。

Toll样受体4与儿童自身免疫性疾病关系的研究进展

Toll样受体4(TLR4)是一种在巨噬细胞、内皮细胞等多种细胞中广泛表达的跨膜识别受体,其在识别细菌、病毒后激活相关信号通路,可诱发机体适应性、固有免疫应答。幼儿时期免疫系统发育尚不完善,免疫应答过程中存在不同程度障碍,当免疫功能亢进时易诱发自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、化脓性脑膜炎等,不利于患儿生长发育,且给家庭造成较大的经济负担。而TLR4作为固有免疫的一个重要介质,在儿童自身免疫性疾病的发生、发展中具有重要作用,未来需进一步深入研究。

病原菌对NOD样受体及Toll样受体信号通路介导的固有免疫逃逸机制研究进展

作为机体抵抗病原微生物的第一道防线,固有免疫细胞通过模式识别受体(PRR)识别病原体相关模式分子(PAMP)继而启动下游信号通路,以发挥固有免疫效应,清除入侵的病原体和异物。固有免疫细胞主要的信号通路有NOD样受体(NLR)及Toll样受体(TLR)信号通路,病原菌经过长期的选择进化产生了针对NLR及TLR信号通路的对抗机制,以利于其在宿主体内的生存增殖。病原菌主要通过产生毒力因子或降低刺激炎症小体活化的PAMP的表达,干扰、抑制或避免固有免疫细胞内炎症小体的活化,实现对NLR介导的信号通路的免疫逃逸。而对TLR信号通路的免疫逃逸主要通过产生毒力因子,抑制丝裂原活化蛋白激酶级联反应、抑制NF-kB活化以及通过产生含有TIR结构域的蛋白,直接与TLR或者TLR信号通路中的接头蛋白结合,干扰下游信号转导三种机制。

桥本甲状腺炎合并甲状腺乳头状癌患者中Toll样受体3和核转录因子-κB的表达及相关性分析

目的分析桥本甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis,HT)合并甲状腺乳头状癌(PTC)患者Toll样受体3(toll-like receptor 3,TLR3)和核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)表达及相关性。方法收取邯郸市中心医院2020年3月~2022年3月收治的130例行手术切除的甲状腺标本,其中正常甲状腺组织标本43例,HT标本47例,HT合并PTC标本40例,分析TLR3和NF-κB在正常甲状腺组织、HT组、HT合并PTC组中的表达,分析HT合并PTC组中TLR3和NF-κB表达与临床病理参数关系,Pearson相关性分析TLR3和NF-κB的关系。结果TLR3在正常甲状腺组织、HT组、HT合并PTC组中的阳性表达率分别为0(0/43)、80.85%(38/47)、90.00%(36/40);NF-κB在以上三组中的阳性表达率分别为0(0/43)、68.09%(32/47)、85.00%(34/40)。TLR3和NF-κB在HT组、HT合并PTC组中的阳性表达率均高于正常甲状腺组织(P<0.05),TLR3和NF-κB表达与性别、年龄、HT合并PTC病理学特征、病灶类型、淋巴结转移、甲状腺包膜侵犯差异比较均无统计学意义(P均>0.05)。TLR3和NF-κB呈显著正相关(r=0.589,P<0.05)。结论TLR3和NF-κB在HT合并PTC组织中的阳性率高于正常甲状腺组织,且二者表达呈正相关。

动物Toll样受体8的免疫学功能研究进展

Toll样受体是天然免疫中最早发现的模式识别受体,是生物界最古老的免疫系统组成部分之一,在识别病原和影响免疫应答方面具有非常关键的作用。Toll样受体8(TLR8)属于Toll样受体中的TLR7/8/9亚家族,通过识别配体激活信号级联反应,导致促炎细胞因子的产生,发挥抗病毒和抗细菌感染作用。论文就TLR8的结构与活化、配体识别、细胞分布、信号通路、细胞因子产生和疾病相关性等进行简要综述,可使人们更加全面地认识TLR8,对于动物免疫系统的研究以及动物疫病的防控具有一定的参考意义。

抗生素诱导小鼠肠道菌群失调对免疫功能和Toll样受体2、4基因表达的影响

目的:探讨抗生素诱导小鼠肠道菌群失调后对机体免疫功能和Toll样受体2、4的影响。方法:60只BALB/c小鼠分为2组:抗生素组和对照组,抗生素组连续7天口服头孢哌酮,7天后经口给予白色念珠菌。结果:抗生素组小鼠肠道内肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌、乳酸杆菌较对照组减少,白色念珠菌增加;脾指数、PHA诱导的淋巴细胞转化率、迟发型变态反应、抗体生成细胞数和脾脏的TLR2和TLR4基因表达水平均低于对照组。结论:抗生素诱导肠道菌群失调后小鼠免疫功能和TLR2、TLR4 mRNA表达均降低。

Toll样受体的信号转导及抗感染免疫研究进展

Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是进化中比较保守的一个受体家族,至少包括13个成员,Toll样受体能特异识别病原相关分子模式(PAMP),在天然免疫和获得性免疫中都发挥着重要的作用,是连接天然免疫和获得性免疫的桥梁。近年来,对TLRs信号转导的研究,特别是对TLRs负反馈的研究,进展非常迅速,它们在抗感染中起着重要的作用,特别是负反馈机制对信号的平衡调节在抗感染免疫中有重要作用。