黄芩汤加减联合补脾益肠丸对溃疡性结肠炎患者Toll样受体4/髓样分化因子88信号通路的影响

目的:研究黄芩汤加减联合补脾益肠丸对溃疡性结肠炎(UC)患者Toll样受体4/髓样分化因子88(TLR4/MyD88)信号通路的影响。方法:选取溃疡性结肠炎患者86例,随机数字表法分组,各43例。对照组采用西医常规治疗,观察组在对照组基础上给予黄芩汤加减加补脾益肠丸治疗;统计两组中医证候疗效及腹胀、腹泻、腹痛、黏液脓血便、里急后重等症状改善时间,并对比两组治疗前后血清免疫球蛋白水平、血清炎症因子及血清TLR4、MyD88水平情况。结果:观察组治疗总有效率90.70%高于对照组72.09%(P<0.05)。观察组腹胀、腹泻、腹痛、里急后重、黏液脓血便改善时间较对照组短(P<0.05)。治疗后观察组IgA、IgG较对照组低(P<0.05)。治疗后观察组血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平较对照组低(P<0.05)。治疗后观察组血清TLR4、MyD88水平较对照组低(P<0.05)。结论:黄芩汤加减联合补脾益肠丸治疗UC,临床治疗效果较好,可调节免疫球蛋白水平,其作用机制可能与抑制血清TLR4/MyD88信号通路活化,进而降低炎症因子水平有关。

优化溃结方对溃疡性结肠炎大鼠结肠Toll样受体/髓样分化因子88/核转录因子κB信号通路的影响

目的观察优化溃结方对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠Toll样受体/髓样分化因子88/核转录因子κB(TLR/MyD88/NF-κB)信号通路的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、优化溃结方组、柳氮磺吡啶组,每组10只。除空白组外,其余3组均参考三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇二次致炎法结合束缚法建立UC气滞血瘀型大鼠模型。造模成功后优化溃结方组大鼠予优化溃结方药液1.674 g/(kg·d)灌胃,柳氮磺吡啶组大鼠予柳氮磺吡啶药液0.54 g/(kg·d)灌胃,空白组、模型组不予任何治疗。14天后检测各组大鼠血清白细胞介素17A(IL-17A)、IL-10、IL-22水平,结肠组织MyD88、TLR2、TLR4、NF-κB p65蛋白和mRNA表达水平。结果与空白组相比,模型组血清IL-17A、IL-22水平显著升高(P<0.05),IL-10水平显著下降(P<0.05);与模型组相比,优化溃结方组、柳氮磺吡啶组IL-17A、IL-22水平显著降低(P<0.05),IL-10水平显著升高(P<0.05);优化溃结方组IL-17A、IL-22、IL-10水平与柳氮磺吡啶组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组相比,模型组结肠组织MyD88、TLR2、TLR4、NF-κB p65蛋白和mRNA表达均显著增加(P<0.05);与模型组相比,柳氮磺吡啶组、优化溃结方组MyD88、TLR2、TLR4、NF-κB p65蛋白和mRNA表达均显著下降(P<0.05);优化溃结方组MyD88、TLR2、TLR4、NF-κB p65蛋白和mRNA表达与柳氮磺吡啶组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论优化溃结方可能通过调节TLR/MyD88/NF-κB信号通路,降低炎症因子水平,减轻炎症反应,修复结肠组织的超微结构,从而修复UC大鼠结肠黏膜屏障功能。

萝卜硫素对慢性阻塞性肺疾病患者巨噬细胞Toll样受体4/髓样分化因子88信号通路的影响

目的 探讨萝卜硫素对慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）患者Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）和下游炎性因子的影响.方法 选择2012年1月至2013年3月兰州大学第一医院慢阻肺稳定期患者32例为慢阻肺组,同期健康体检者30名为非慢阻肺组,分离外周血单核细胞,诱导形成单核细胞源性巨噬细胞（MDM）.将慢阻肺组MDM分为空白对照组、脂多糖组、萝卜硫素组和萝卜硫素联合脂多糖组（简称联合组）,非慢阻肺组不用任何药物干预,每组3×106个细胞.实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测MDM中TLR4、MyD88 mRNA和蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和IL-6含量.多组间比较采用单因素方差分析和LSD-t检验.结果 空白对照组TLR4、MyD88 mRNA和蛋白表达（3.7±0.5、1.9±0.4和0.45±0.18、1.11 ±0.65）及细胞培养上清液中TNF-α和IL-6浓度[（31±4）和（43 ±5） μg/L]显著高于非慢阻肺组[（1.00、1.00和0.26 ±0.14、0.58 ±0.40、（19±2）和（29±4）μg/L],差异均有统计学意义（t值为2.19～12.11,P＜0.05或P＜0.01）;脂多糖组上述指标[5.5±1.1、3.4±1.6和0.65±0.20、1.66±0.64、（47±4）和（54 ±5）μg/L]显著高于空白对照组,差异均有统计学意义（t值为2.39～11.9,P＜0.05或P＜0.01）;萝卜硫素组上述指标[2.2±0.4、1.0±0.6和0.25±0.09、0.62±0.34、（20±3）和（27±4） μg/L]显著低于空白对照组,差异均有统计学意义（t值为2.13 ～8.46,P＜0.05或P＜0.01）;联合组上述指标[3.2±0.5、1.5±0.8和0.33 ±0.11、0.77 ±0.25、（31±3）和（33±4） μg/L]显著低于脂多糖组,差异均有统计学意义（t值为3.87 ～ 12.24,均P＜0.01）.结论 慢阻肺患者的巨噬细胞TLR4/MyD88信号通路活化,下游炎性因子分泌增加.萝卜硫素可抑制TLR4/MyD88通路,减少下游炎性因子的释放,可能对慢阻肺患者有抗炎作用.

脂氧素A4受体激动剂及白介素-1β在Toll样受体2/髓样分化因子88/核因子-κB信号通路对哮喘小鼠气道炎症的调控作用

目的:研究脂氧素(LX)A4受体激动剂及白介素-1β抗体在Toll样受体2(TLR2)/髓样分化因子88(My D88)/核因子-κB(NF-κB)信号通路中对哮喘小鼠气道炎症的调控机制。方法:以卵清蛋白(OVA)致敏激发法制备小鼠哮喘模型,60只二级雄性Balb/c小鼠随机分为6组,分别给予脂氧素A4受体激动剂(BML-111)、白介素(IL)-1β抗体、BML-111载体、兔Ig G治疗。末次激发后留取血清和肺组织标本,光镜下观察支气管周围炎症浸润情况;测定血清IL-1β、IL-4、IL-8、干扰素(IFN)-γ水平;检测肺组织TLR2、My D88、NF-κB的表达。结果:OVA致敏的小鼠血清IL-1β、IL-4、IL-8水平升高,IFN-γ浓度降低;OVA致敏导致明显的支气管周围炎症细胞浸润,使支气管炎症分级指数有明显提高;BML-111或IL-1β抗体治疗均能明显阻止上述OVA介导的炎症变化(χ2=28.14,P<0.01)。OVA致敏使肺组织TLR2、My D88表达及NF-κB活性升高,BML-111及抗IL-1β抗体可抑制由OVA引发的上述表达变化。结论:OVA可诱导产生气道炎症,这一作用可能受TLR2/My D88/NF-κB信号通路调控,IL-1β在这一过程中起了至关重要的作用。BML-111和IL-1β抗体可能通过对TLR2/My D88/NF-κB信号通路的负调控而实现抑制OVA诱发的呼吸道炎症的作用。

膝骨性关节炎模型大鼠接受推拿治疗后软骨Toll样受体4/髓样分化因子88信号转导通路的变化

背景:研究表明,Toll样受体4/髓样分化因子88信号转导通路可诱导各类炎症反应,且膝骨关节炎的发生与Toll样受体4/髓样分化因子88信号转导通路密切相关,而推拿可以降低白细胞介素6及肿瘤坏死因子α等炎症因子的表达水平,起到消炎止痛的作用,且对膝骨关节炎防治有一定的疗效。目的:对建立的大鼠膝骨关节炎模型行推拿治疗,观察其软骨Toll样受体4、髓样分化因子88、肿瘤坏死因子受体相关因子6、核转录因子κBp65 mRNA及蛋白表达,来探讨推拿治疗膝骨关节炎的效果及其机制。方法:采用随机化的原则,抽取10只大鼠为空白组,余下40只大鼠采用木瓜蛋白酶关节注射建立大鼠膝骨关节炎模型,待造模成功后,再将造模大鼠随机分为模型组、推拿组、塞来昔布组、推拿加塞来昔布组,每组10只。空白组、模型组常规饲养,推拿组一指禅手法治疗,塞来昔布组塞来昔布灌胃,推拿加塞来昔布组予以上2种治疗,各组均治疗4周。结果与结论:①与模型组相比,推拿和/或塞来昔布治疗均能显著降低大鼠软骨Mankin评分;②与模型组相比,推拿和/或塞来昔布治疗均能明显下调大鼠软骨组织中Toll样受体4、髓样分化因子88、核转录因子κΒp65以及肿瘤坏死因子受体相关因子6 mRNA与蛋白的表达水平,且推拿加塞来昔布组软骨组织中Toll样受体4、髓样分化因子88以及核转录因子κΒp65 mRNA与空白组接近;③提示推拿防治膝骨关节炎的机制可能是通过下调Toll样受体4、髓样分化因子88、肿瘤坏死因子受体相关因子6、核转录因子κΒp65 mRNA和蛋白的表达,从而延缓膝骨关节炎的发展进程。

金丝桃苷抑制Toll样受体4/髓样分化因子88/核因子-κB 信号通路减轻牙周炎大鼠牙周组织损伤实验研究

目的:探究金丝桃苷调控Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对牙周炎大鼠牙周组织损伤的影响。方法:构建牙周炎大鼠模型,建模成功大鼠随机分为模型组、金丝桃苷(30 mg/kg)组、金丝桃苷(30 mg/kg)+TLR4激活剂(脂多糖,0.4 mg/kg)组,每组15只,另取15只健康大鼠作为对照组,建模结束后,各组大鼠按对应方式给药,1次/d,连续4周。HE染色及抗酒石酸酸性磷酸酶染色分别观察各组大鼠牙周组织病理变化及破骨细胞数量;ELISA法检测各组大鼠血清骨保护素(OPG)、NF-κB受体活化因子配体(RANKL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平;荧光定量PCR法检测各组大鼠牙周组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达水平;蛋白印迹法检测各组大鼠牙周组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达水平。结果:对照组大鼠牙周组织结构正常;与对照组相比,模型组大鼠牙周组织炎性细胞浸润明显,伴随骨吸收陷窝数量增多,牙周组织破骨细胞数量、TLR4、MyD88、NF-κB mRNA和蛋白表达水平、血清RANKL、TNF-α、IL-6水平显著升高(均P<0.05),血清OPG水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,金丝桃苷组大鼠牙龈上皮较完整,炎性细胞浸润程度较轻,骨吸收陷窝减少,牙周组织破骨细胞数量、TLR4、MyD88、NF-κB mRNA和蛋白表达水平、血清RANKL、TNF-α、IL-6水平显著降低(均P<0.05),血清OPG水平显著升高(P<0.05);与金丝桃苷组相比,金丝桃苷+TLR4激活剂组大鼠牙周组织炎性细胞浸润程度加深,骨吸收陷窝增多,牙周组织破骨细胞数量、TLR4、MyD88、NF-κB mRNA和蛋白表达水平、血清RANKL、TNF-α、IL-6水平显著升高(均P<0.05),血清OPG水平显著降低(P<0.05)。结论:金丝桃苷可缓解牙周炎大鼠牙周组织损伤,抑制大鼠炎性反应,其机制与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。

甲钴胺联合胰岛素对妊娠期糖尿病Toll样受体4/髓样分化因子88信号通路及母婴结局的影响

目的探讨甲钴胺联合胰岛素治疗妊娠期糖尿病(GDM)患者的疗效及对Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)信号通路及母婴结局的影响。方法选取保定市第四中心医院132例GDM患者作为研究对象,根据分层随机设计、对照设计试验原则进行分为两组,每组66例。对照组采取胰岛素治疗,观察组采取甲钴胺联合胰岛素治疗。比较两组疗效和治疗前后空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PBG)、TLR4、MyD88、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平及母婴结局。结果观察组总有效率高于对照组[95.45%(63/66)比84.85%(56/66)],差异有统计学意义(χ^(2)=4.181,P<0.05)。观察组治疗后1、2、3周FBG、2 h PBG水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后1、2、3周血清TLR4、MyD88、TNF-α、IL-1β水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组剖宫产、羊水过多、巨大儿、新生儿早产发生率低于对照组[7.58%(5/66)比21.21%(14/66)、4.55%(3/66)比16.67%(11/66)、1.52%(1/66)比13.64%(9/66)、3.03%(2/66)比7.58%(5/66)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲钴胺联合胰岛素可调控TLR4/MyD88信号通路,有助于达到控制血糖、改善母婴结局的目的。

青藤碱对兔膝骨关节炎模型软骨Toll样受体2、4及髓样分化因子88表达的影响

目的观察不同剂量青藤碱对兔膝骨关节炎模型关节软骨中Toll样受体(TLR)2、4和髓样分化因子88(My D88)表达的影响,探讨其相关作用机制。方法采用Hulth法建立膝骨关节炎模型。实验兔随机分为空白组、模型组和青藤碱低、中、高剂量组,空白组不予任何处理,模型组和青藤碱低、中、高剂量组膝关节腔分别注射生理盐水和0.2 mL(5 mg)、0.35 mL(8.75 mg)、0.5 mL(12.5 mg)青藤碱,共干预10次。实时荧光定量PCR和Western blot检测关节软骨TLR2、TLR4和My D88的mRNA和蛋白表达。结果模型组TLR2、TLR4、My D88的mRNA和蛋白表达较空白组均显著升高(P<0.01);与模型组比较,青藤碱中、高剂量组TLR2、TLR4、My D88的mRNA和蛋白表达均显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论青藤碱可通过下调TLR/My D88通路中关键分子的表达抑制兔膝骨性关节炎软骨免疫反应。

Toll样受体4信号通路中髓样分化因子88和β干扰素Toll/IL-1受体结构域衔接蛋白在皮肤恶性黑素瘤中的表达及意义

目的探讨Toll样受体4(tol-likereceptor4,TLR4)信号通路下游的髓样分化因子88(myeloid differentiation factor88,MyD88)和β干扰素Toll/IL-1受体结构域衔接蛋白(toll-like receptor-associated activator of interferon,TRIF)在皮肤恶性黑素瘤(cutaneous malignant melano ma,CMM)中的表达及与临床特征之间的关联。方法应用免疫组化方法检测40例CMM患者肿瘤组织、10例痣细胞痣患者皮损组织和10例健康皮肤组织中MyD88和TRIF的表达水平,采用SPSS22.0统计学软件进行t检验及Pearson检验处理分析。结果CMM中的MyD88及TRIF的表达强度显著高于痣细胞痣与正常皮肤组织(P<0.05);MyD88、TRIF的表达与CMM患者的年龄、性别等因素无明显相关性,而与发病部位、Clark分级、Breslow厚度、溃疡等因素相关,其中发生于肢端相较于非肢端的恶性黑素瘤表达更显著(P-0.002,0.001);随着Clark分级的增加,原位与浸润肿瘤之间,MyD88、TRIF的表达水平也增加(P=0.001,0.012);随着Breslow厚度的增加,两者表达水平也增加(P=0.004,0.026);合并溃疡的CMM中,MyD88表达增加,有统计学意义(P=0.019);TRIF表达强度无统计学差异(P>0.05);MyD88和TRIF均与CMM患者的淋巴结转移无相关性(P0.05)。结论TLR4下游的MyD88和TRIF相互协同,共同参与CMM的发生与发展。

白蛋白治疗对小鼠脑缺血早期脑组织Toll样受体4和骨髓分化因子88mRNA表达的影响

目的研究人血白蛋白治疗对局灶性脑缺血再灌注小鼠脑组织Toll样受体4(TLR4)和骨髓分化因子88(MyD88)mRNA表达的影响。方法健康雄性成年昆明小鼠54只,随机分为假手术组(14只)、生理盐水组(20只)和白蛋白组(20只),每组又均分为再灌后6、24 h 2个时间点。采用左侧大脑中动脉线栓法制备小鼠局灶性脑缺血再灌注模型,RT-PCR法检测左侧脑组织TLR4、MyD88 mRNA的表达水平,并进行神经功能缺损评分。结果生理盐水组和白蛋白组脑缺血再灌注后6、24 h TLR4、MyD88 mRNA表达水平明显高于假手术组,且24 h表达水平升高更明显(P<0.05);但白蛋白组6、24 h TLR4、MyD88 mRNA表达量明显低于生理盐水组(P<0.05);24 h白蛋白组小鼠的神经功能缺损评分与生理盐水组比较有明显改善(P<0.05);24 h TLR4、MyD88 mRNA表达水平与神经功能缺损评分呈正相关(r=0.92,r=0.85,P<0.05)。结论白蛋白治疗可以下调脑缺血早期脑组织高表达的TLR4、MyD88 mRNA的水平,改善脑缺血后小鼠神经功能缺损。

新生儿窒息后Toll样受体4及髓样分化因子88表达变化在多器官功能障碍综合征中的意义

目的研究窒息新生儿外周血单个核细胞(PBMCs)Toll样受体4(TLR4)及其信号转导途径中髓样分化因子88(MyD88)的变化与新生儿窒息后多器官功能障碍综合征(MODS)的关系。方法对窒息后24h之内入院的50例窒息新生儿和10例健康足月新生儿,应用免疫组化的方法检测窒息后第1、3、7天(PBMCs)TLR4及MyD88的表达情况,并与窒息后全身炎症反应综合征(SIRS)和MODS的发生及预后情况进行比较。结果①窒息新生儿外周血单个核细胞的TLR4和MyD88的表达在窒息后第1天增强,第3天开始减弱,第7天左右恢复正常。②在窒息后第1天,TLR4和MyD88的表达与新生儿危重症评分呈显著负相关(r=-0.74、-0.73,P均<0.01),TLR4和MyD88两者呈显著正相关(r=0.70,P<0.01);发生SIRS、MODS和预后差的病例,其窒息后第1天TLR4和MyD88的表达呈++～+++的比例增多,与未发生SIRS、MODS和预后好的病例相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论新生儿窒息早期可能激活了TLR4及其信号转导通路MyD88,引起单核巨噬细胞系统释放一系列炎症因子,导致了SIRS和MODS的发生。TLR4及其信号转导通路MyD88可以作为诊断新生儿窒息后SIRS和MODS的早期指标和估计预后的指标之一。

二甲双胍对2型糖尿病大鼠骨骼肌Toll样受体/髓样分化因子88信号通路的影响及机制

目的 2型糖尿病的发病机制复杂,分子水平发病机制仍不明确。文章从免疫炎症的角度探究二甲双胍对2型糖尿病大鼠骨骼肌Toll样受体(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)信号通路的影响及作用机制,阐述二甲双胍的抗炎机制。方法 SD雄性大鼠按随机数字表法分为4组,每组10只:正常饮食组、模型组、胰岛素组、二甲双胍组,正常饮食组给予饲喂普通饲料,后3组给予高脂高糖饮食并于第8周末联合腹腔注射STZ(30 mg/kg)构建2型糖尿病大鼠模型。造模成功后给予胰岛素组胰岛素(1 IU/d)皮下注射4周,二甲双胍组给予二甲双胍灌胃[200 mg/(d·kg)]4周。计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。ELISA法检测血清中IL-23含量;Western blot法测骨骼肌AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)、TLR4、MyD88、NFκB;RT-PCR法测骨骼肌组织MyD88mRNA、TLR4 mRNA。结果与正常饮食组HOMA-IR(1.56±0.04)相比,模型组、胰岛素组、二甲双胍组(4.55±0.22、4.32±0.32、1.79±0.15)升高(P<0.05);与模型组相比,二甲双胍组HOMA-IR显著降低(P<0.05);与胰岛素组相比,二甲双胍组HOMA-IR下降(P<0.05)。与正常饮食组IL-23[(0.788±0.193)μg/L]相比,模型组、胰岛素组、二甲双胍组[(2.279±0.472、1.886±0.233、1.205±0.398)μg/L]升高(P<0.05);与模型组相比,二甲双胍组IL-23表达降低(P<0.05);与胰岛素组相比,二甲双胍组IL-23表达下降(P<0.05)。模型组HOMA-IR与血清IL-23呈正相关(r=0.716,P<0.05);二甲双胍组HOMA-IR与血清IL-23呈正相关(r=0.725,P<0.05)。与正常饮食组TLR4-mRNA、MyD88-mRNA TLR4、MyD88、NFκB比较,模型组、胰岛素组、二甲双胍组的表达增加(P<0.05);与模型组相比,胰岛素组、二甲双胍组表达均降低(P<0.05);与胰岛素组相比,二甲双胍组表达下降(P<0.05)。与正常饮食组、模型组、胰岛素组的AMPK相比,二甲双胍组表达增加(P<0.05)。结论二甲双胍通过激活AMPK抑制骨骼肌TLR4/MyD88/NFκB通路,下调炎症因子IL-23表达水平,起到抗炎及改善骨骼肌胰岛素抵抗的作用。

盘龙七片调控Toll样受体4-骨髓样分化因子88-核因子-κB通路保护佐剂性关节炎大鼠滑膜组织

目的研究盘龙七片通过调控Toll样受体4(TLR4)-骨髓样分化因子88(MyD88)-核因子-κB(NF-κB)信号通路保护类风湿关节炎(RA)大鼠滑膜组织的作用机制。方法将50只SD大鼠以随机数字表法分为正常组,模型组,低、中、高盘龙七片组,每组10只,除正常组外,其余组均采用风、寒、湿环境结合弗氏完全佐剂注射的方式制备RA模型,RA大鼠模型制备成功后,低、中、高盘龙七片组分别灌胃给予盘龙七片溶液150 mg/kg、300 mg/kg、600 mg/kg,对照组与模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃,连续灌胃处理15 d后,切片观察滑膜组织病理形态,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)水平,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组大鼠滑膜组织细胞中TLR4 mRNA、MyD88 mRNA以及肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测滑膜组织中NF-κB p65蛋白表达情况。结果与正常组相比,模型组滑膜组织可见明显变性坏死,滑膜处可见中度充血水肿,且有大量炎细胞并伴随轻度滑膜增生,与模型组相比,不同剂量盘龙七片处理后关节变性坏死情况明显改善,滑膜组织充血水肿情况减轻,炎细胞浸润情况极大的改善,且呈浓度依赖;模型组大鼠血清中TNF-α、IL-1分别为(1.26±0.11)μg/L、(0.35±0.08)μg/L,显著高于正常组的(0.68±0.05)μg/L、(0.11±0.02)μg/L,滑膜组织中TLR4、MyD88、TRAF-6的mRNA相对表达水平分别为(2.56±0.21)、(3.83±0.26)、(2.78±0.23),显著高于正常组(1.00±0.02)、(1.01±0.02)、(1.00±0.01)(P<0.05),NF-κB p65蛋白磷酸化水平为(1.37±0.22),显著高于正常组(0.21±0.06)(P<0.05),与模型组相比,不同剂量盘龙七片组大鼠血清中TNF-α、IL-1水平显著降低(P<0.05),滑膜组织中TLR4、MyD88、TRAF-6的mRNA相对表达水平显著降低(P<0.05),NF-κB p65蛋白磷酸化水平也显著降低(P<0.05)。结论盘龙七片通过抑制TLR4-MyD88-NF-κB信号转导通路,降低滑膜组织处炎症反应,改善滑膜细胞增生,从而保护滑膜组织。

地塞米松对结核性脑膜炎患者脑脊液单核细胞Toll样受体4髓系分化因子88表达的影响

目的:分析地塞米松辅助治疗结核性脑膜炎(TBM)的临床疗效及对确诊的TBM患者脑脊液中单核细胞Toll样受体4、髓系分化因子88表达的影响。方法:60例通过改良抗酸染色确诊的TBM患者分为辅助治疗组和对照组,辅助治疗组36例给予常规抗结核联合地塞米松治疗,对照组仅给予抗结核治疗,同时选择20例非颅内感染患者脑脊液标本为阴性对照组,分析临床疗效及三组患者脑脊液中单核细胞Toll样受体4、髓系分化因子88的mRNA及蛋白表达水平。结果:辅助治疗组总有效率为91.67%,要显著好于对照组(χ2=5.17,P <0.05);阴性对照组脑脊液单核细胞Toll样受体4、髓系分化因子88的mRNA及蛋白表达水平明显低于TBM患者;地塞米松治疗能够显著降低脑脊液中单核细胞Toll样受体4、髓系分化因子88的mRNA及蛋白表达水平。结论:地塞米松辅助治疗能显著提高TBM治疗有效率,Toll样受体4-髓系分化因子88通路在地塞米松辅助治疗TBM过程中有重要作用。

脂多糖对类风湿关节炎外周血单核细胞Toll样受体4、髓样分化因子88蛋白表达的影响

目的观察脂多糖(LPS)对类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(My D88)蛋白表达的影响。方法采用活动期RA患者外周血进行单核细胞的分离培养,并与健康志愿者做对照。分为以下5组观察:健康对照组、健康+LPS组、RA对照组、RA+LPS组、RA+LPS+TAK-242组,并采用Western blot法检测各组TLR4、My D88蛋白的表达。结果健康+LPS组或RA+LPS组TLR4、My D88蛋白表达与健康对照组或RA对照组比较均明显升高(均P<0.01);RA对照组或RA+LPS组TLR4、My D88蛋白表达与健康对照组或健康+LPS组比较均明显升高(均P<0.01);RA+LPS+TAK-242组TLR4、My D88蛋白表达与RA+LPS组比较明显降低(均P<0.01)。结论 RA活动期单核细胞可能存在TLR/My D88信号通路的激活,且对LPS的刺激反应性增强。

末端回肠炎大鼠模型Toll样受体2、4及髓样分化因子88的变化及其意义

目的:探讨Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)在实验性慢性末端回肠炎(CTI)发病过程中表达水平的变化及其相关意义。方法:60只雄性清洁级SD大鼠随机分成造模组、缝线组、对照组。分别利用肉眼及镜下观察、Western Blot方法,分析3种因子在CTI发病中的变化及其相关性。结果:(1)术后2周及8周,肉眼及镜下观见造模组表现分别为急性及慢性炎症反应。(2)术后8周与2周对比,结果表明TLR2、TLR4、MyD88在末端回肠炎的发病过程中有明显的升高。TLR4表达水平的升高率更显著。(3)在实验性末端回肠炎发病过程中TLR2、TLR4、MyD88表达呈正相关。结论:(1)TLR2、TLR4、MyD88在CTI中表达增加,均与组织炎症程度呈正相关;(2)TLR4表达水平在CTI发病时较TLR2及MyD88升高更显著,推测革兰阴性菌感染可能是CTI发病的启动因子。

白细胞介素18经toll样受体4/髓样细胞分化因子88/核转录因子-κB通路促进支气管平滑肌细胞增殖与迁移

目的 探讨白细胞介素18 (IL-18)经toll样受体4 (TLR4)/髓样细胞分化因子88 (MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路促进支气管平滑肌细胞(BSMC)增殖与迁移。方法 采用不同浓度IL-18、不同时间处理BSMC,确定实验条件。细胞计数试剂盒(CCK-8)测定细胞活性,Transwell小室检测细胞迁移,Western blot法检测相关蛋白的表达。抑制剂Eritoran特异性阻断TLR4/MyD88/NF-κB通路,检测TLR4/MyD88/NF-κB通路阻断后对细胞周期、细胞增殖、细胞迁移及TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白的表达的影响。结果 IL-18可促进支气管平滑肌细胞细胞增殖,提高细胞迁移能力,上调TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平(P<0.05)。Eritoran可抑制IL-18引起的BSMC细胞增殖,上调G1期细胞百分比,下调S期、G2期细胞百分比,抑制细胞迁移,降低TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白水平(P<0.05)。结论 IL-18可能通过上调TLR4/MyD88/NF-κB通路中信号分子的表达,促进了平滑肌细胞增殖和迁移。

抵当汤对高速泳动族蛋白B1/Toll样受体4/核因子κB通路的调控作用

目的:探讨抵当汤及其拆方对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)炎症反应的影响及作用机制。方法:将体外培养的HUVECs随机分为空白血清组、LPS组、LPS+抵当汤组、LPS+植物药组、LPS+动物药组;抑制Toll样受体4(TLR4)后分为TAK-242组、抵当汤TAK-242组、植物药TAK-242组、动物药TAK-242组,给予相应处理后,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清中高速泳动族蛋白B1(HMGB1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量;蛋白质免疫印迹法检测HUVECs中HMGB1、TLR4和核因子κB p65的蛋白表达水平,实时定量PCR(RT-qPCR)法检测HMGB1、TLR4和核因子κB p65的基因表达情况,免疫荧光法测定HMGB1、TLR4和核因子κBp65的荧光强度。结果:与A组比较,LPS组细胞上清液及HUVECs中HMGB1、IL-6、TNF-α、TLR4和核因子κB p65表达均增强(均P<0.01)。与LPS组比较,LPS+抵当汤组细胞上清液及HUVECs中的HMGB1、IL-6、TNF-α、TLR4和核因子κBp65的表达均减弱(P<0.05,P<0.01)。与LPS+抵当汤组比较,LPS+植物药组和LPS+动物药组细胞上清液及HUVECs中的HMGB1、IL-6、TNF-α、TLR4和核因子κBp65表达显著增强(P<0.05,P<0.01)。LPS+植物药组中的HMGB1、IL-6和TNF-α表达低于LPS+动物药组(P<0.05,P<0.01),TLR4和核因子κBp65表达高于LPS+动物药组(P<0.05)。抑制TLR4后,与LPS组比较,TAK-242组的HMGB1、TLR4、核因子κBp65表达减弱(P<0.05,P<0.01)。与TAK-242组比较,抵当汤TAK-242组各指标表达低于TAK-242组(P<0.05,P<0.01)。与抵当汤TAK-242组比较,植物药TAK-242组和动物药TAK-242组各指标表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论:抵当汤及其拆方可通过抑制细胞炎症反应对HUVECs发挥保护和改善作用,其作用机制可能与抑制HMGB1/TLR4/核因子κB信号通路活化有关。

早产儿窒息后Toll样受体4及髓样分化因子88表达变化在多器官功能障碍综合征中的意义

目的探讨Toll样受体4与髓样分化因子88表达变化与早产儿窒息后多器官功能障碍综合征之间的关系。方法选取我院在2017年7月-2018年7月期间收治的20例健康足月早产儿及窒息后24 h内入院的40例窒息早产儿作为研究对象,对Toll样受体4与髓样分化因子88表达水平采用免疫组化方式予以检测。结果窒息早产儿TLR4与My D88表达在窒息后第1 d增强,差异具有统计学意义(P<0.05);第7 d恢复至正常水平,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TLR4与My D88能够作为早产儿窒息后多器官功能障碍综合征的早期诊断及预后评估指标之一。

未足月胎膜早破孕妇胎盘中Toll样受体4/髓样分化因子/核因子-κB通路表达及临床意义

目的 探究并分析未足月胎膜早破(PPROM)孕妇胎盘中Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)通路表达及临床意义。方法 选取2017年6月—2020年6月湖北省妇幼保健院收治的PPROM患者90例,按照是否合并宫内感染将患者分为感染组(32例)和非感染组(58例),另选同期正常分娩孕妇50名作为对照组。对感染组患者阴道分泌物进行病原菌鉴定,收集PPROM患者临近破膜处胎盘组织和对照组正常胎盘组织,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot法分别检测胎盘组织中TLR4/MyD88/NF-κB通路的mRNA表达和蛋白表达水平,受试者工作特征(ROC)曲线评估TLR4/MyD88/NF-κB通路对于PPROM并发宫内感染的诊断效能,并对影响PPROM并发宫内感染的危险因素进行分析。结果 32例感染患者阴道分泌物中检出78株病原菌,其中革兰阳性菌36株,占46.2%,革兰阴性菌33株,占42.3%,真菌9株,占11.5%。与对照组相比,非感染组和感染组患者胎盘组织中TLR4、MyD88和NF-κB的mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05),且感染组患者TLR4、MyD88和NF-κB的mRNA水平和蛋白显著高于非感染组(P<0.05)。ROC曲线结果发现,当TLR4 mRNA水平表达高于13.8、MyD88 mRNA水平表达高于24.0、NF-κB mRNA水平表达高于26.6时,诊断PPROM并发宫内感染有较高的效能(P<0.05)。PPROM并发宫内感染与患者的破膜孕周和阴道检查次数有关(P<0.05),而与破膜后待产时间、流产史和引产史无关(P>0.05)。logistic多因素回归分析结果显示,TLR4/MyD88/NF-κB通路异常高表达、破膜孕周越小、阴道检查次数越多,并发宫内感染的风险越高(P<0.05)。结论 PPROM并发宫内感染孕妇胎盘中TLR4/MyD88/NF-κB表达显著升高,破膜孕周低于33周、阴道检查次数多于5次及TLR4/MyD88/NF-κB通路异常活化与PPROM并发宫内感染的发生与发展有关。