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HMGN1激活TLR4/MyD88/NF-κB p65/IKK-β信号通路诱导小鼠BV2小胶质细胞活化上调其促炎介质表达
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作者 毛燕 俞佳丽 +3 位作者 袁静 达静静 余福勋 查艳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期135-141,共7页
目的 探究高迁移率族核小体结合蛋白1(HMGN1)对小鼠BV2细胞炎症反应的影响并探究其可能的机制。方法使用(0、 100、 200、 500、 1000、 2000)ng/mL的重组HMGN1孵育BV2细胞6 h。用显微镜观察细胞形态变化,实时定量PCR检测细胞中肿瘤坏... 目的 探究高迁移率族核小体结合蛋白1(HMGN1)对小鼠BV2细胞炎症反应的影响并探究其可能的机制。方法使用(0、 100、 200、 500、 1000、 2000)ng/mL的重组HMGN1孵育BV2细胞6 h。用显微镜观察细胞形态变化,实时定量PCR检测细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、 IL-1β、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1) mRNA水平。随后把小胶质细胞随机分成对照组、模型组、抑制剂组和拮抗剂组。模型组用500 ng/mL的HMGN1处理BV2细胞,拮抗剂组在模型组的基础上加入瑞沙托维(resatorvid)/TAK-242进行干预,使用实时定量PCR和免疫荧光细胞化学染色检测细胞中的M1/M2型标志物的表达情况,Western blot法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、 Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB p65(NF-κB p65)和NF-κB抑制物激酶β(IKK-β)的蛋白表达。结果 HMGN1处理后,BV2细胞形态发生明显变化,呈阿米巴样;与0 ng/mL HMGN1组相比,TNF-α、 IL-6、 IL-1β、 MCP-1的mRNA水平随HMGN1剂量的增加而升高;M1型标志物iNOS的mRNA水平随HMGN1剂量的增加而升高,M2型标志物CD206的水平随HMGN1剂量的升高而降低。与模型组相比,拮抗剂组M1型标志物iNOS的mRNA水平显著降低,M2型标志物CD206的水平显著升高。免疫荧光细胞化学染色结果也显示MI型标志物iNOS在拮抗剂组中的表达降低。Western blot的结果提示,拮抗剂组iNOS、 TLR4、 MyD88、 NF-κB p65和IKK-β的蛋白表达显著降低。结论 HMGN1可能通过激活TLR4/MyD88/NF-κB p65/IKK-β信号通路诱导BV2小胶质细胞活化来上调其促炎介质的水平。 展开更多
关键词 高迁移率族核小体结合蛋白1(HMGN1) BV2小胶质细胞 下丘脑 炎症 Toll样受体4(tlr4)
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苦豆碱通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3通路改善香烟烟雾诱导的人支气管上皮细胞损伤
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作者 王慧 闫晓培 徐莉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期411-418,共8页
目的探究苦豆碱(Alo)对香烟烟雾诱导的人支气管上皮细胞损伤的作用及其可能的作用机制。方法16HBE人支气管上皮细胞经100 mL/L香烟烟雾提取物(CSE)和(50、100、200)μmol/L Alo共处理后,CCK-8法检测细胞活力,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)... 目的探究苦豆碱(Alo)对香烟烟雾诱导的人支气管上皮细胞损伤的作用及其可能的作用机制。方法16HBE人支气管上皮细胞经100 mL/L香烟烟雾提取物(CSE)和(50、100、200)μmol/L Alo共处理后,CCK-8法检测细胞活力,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)活性;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)、Western blot法检测细胞凋亡,ELISA检测炎性因子水平;2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针和相关试剂盒检测氧化应激水平;Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)/含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)通路相关蛋白表达水平。16HBE细胞经100 mL/L CSE和200μmol/L Alo共处理后,采用上述方法检测过表达TLR4对TLR4/NF-κB/NLRP3通路、细胞LDH活性、凋亡、炎症反应及氧化应激的影响。结果CSE暴露可降低16HBE细胞活力,增加LDH释放和细胞凋亡,增强炎症反应和氧化应激水平,且激活TLR4/NF-κB/NLRP3通路;经Alo处理后,细胞活性升高,LDH释放减少、凋亡降低、炎症减轻、氧化应激水平下降,且TLR4/NF-κB/NLRP3通路失活;TLR4过表达可逆转Alo处理对CSE诱导的16HBE细胞损伤的保护作用。结论Alo可通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3通路减轻CSE诱导的人支气管上皮细胞损伤。 展开更多
关键词 支气管上皮细胞 香烟烟雾 苦豆碱 Toll样受体4(tlr4) 核因子κB(NF-κB) 含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)
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银杏叶提取物基于TLR4/NF-κB通路对骨质疏松大鼠的干预效果及作用机制
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作者 詹兴洪 章国荣 +3 位作者 罗鸿波 柯学英 魏俊杰 YANG Xudong 《河北医药》 CAS 2024年第2期219-222,共4页
目的分析银杏叶提取物基于TLR4/NF-κB通路对骨质疏松大鼠的干预效果及作用机制。方法选取周龄在4~6周的SPF健康雌性SD大鼠40只,随机分对照组(A组)、骨质疏松组(B组)、阳性药物己烯雌酚组(C组)和银杏叶提取物(D组),适应性饲养1周后,第2... 目的分析银杏叶提取物基于TLR4/NF-κB通路对骨质疏松大鼠的干预效果及作用机制。方法选取周龄在4~6周的SPF健康雌性SD大鼠40只,随机分对照组(A组)、骨质疏松组(B组)、阳性药物己烯雌酚组(C组)和银杏叶提取物(D组),适应性饲养1周后,第2周进行建模,饲养3个月后起给予药物干预,C组大鼠每日给予己烯雌酚0.05 mg·kg^(-1)·d^(-1),D组大鼠给予银杏叶提取物,以200 mg·kg^(-1)·d^(-1)的剂量给药,给药方式均采用灌胃给药。C组、D组进行药物干预6周,与此同时,A组、B组给予10 mL·kg^(-1)·d^(-1)0.9%氯化钠溶液灌胃。给药周期满6周后,麻醉大鼠成功,处死大鼠,取出股骨组织,检测并观察各组大鼠碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、25-羟基维生素D 3(25-hydroxyvitamin D_(3),25OHD)、抗酒石酸盐酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRACP)、钙离子(calcium ion,Ca^(2+))、镁离子(magnesian ion,Mg^(2+))、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)水平及toll样受体4(toll-like receptoR4,TLR4)、核因子κB(nucleaRfactoRkappa-B,NF-κB)蛋白表达。结果与A组比较,B组、C组、D组ALP、TRACP、MDA、TLR4、NF-κB水平升高,OPG、25OHD、Ca^(2+)、Mg^(2+)、SOD、GSH-Px、CAT水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C组、D组ALP、TRACP、MDA、TLR4、NF-κB水平降低,OPG、25OHD、Ca^(2+)、Mg^(2+)、SOD、GSH-Px、CAT水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与C组比较,D组ALP、TRACP、MDA、TLR4、NF-κB水平降低,OPG、25OHD、Ca^(2+)、Mg^(2+)、SOD、GSH-Px、CAT水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论银杏叶提取可能会通过抑制TLR4/NF-κB通路活化来改善骨质疏松大鼠骨代谢水平及氧化应激反应,影响破骨细胞吸收,同时会调节机体Ca^(2+)、Mg^(2+)水平,未来对临床骨质疏松的治疗有重要意义。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 骨质疏松大鼠 tlr4/NF-κB通路 氧化应激 骨代谢
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天麻素对缺血缺氧诱导的小胶质细胞中TLR4表达的影响
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作者 李顺达 赵永强 +3 位作者 杨雪珂 陈澍雨 杨艳 袁云 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期50-56,共7页
目的:探究天麻素(GAS)对缺血缺氧性损伤(HIBD)后小胶质细胞toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:体内创建新生大鼠HIBD模型,将30只3 d龄SD大鼠随机组成3组:假手术组(sham)、HIBD模型组、HIBD模型+GAS干预组(HIBD+G);体外创建BV2细胞氧糖... 目的:探究天麻素(GAS)对缺血缺氧性损伤(HIBD)后小胶质细胞toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:体内创建新生大鼠HIBD模型,将30只3 d龄SD大鼠随机组成3组:假手术组(sham)、HIBD模型组、HIBD模型+GAS干预组(HIBD+G);体外创建BV2细胞氧糖剥夺(OGD)模型,实验随机设置对照组(control)、OGD组、OGD+GAS干预组(OGD+G)。Western Blot和免疫荧光双标染色技术均检测体外各组细胞及体内大鼠模型左侧大脑胼胝体区TLR4的表达。结果:OGD诱导的小胶质细胞中TLR4表达显著增加;GAS干预后TLR4表达显著减少(P<0.05)。结论:GAS激活的小胶质细胞TLR4的表达具有抑制效应,从而对HIBD发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 缺血缺氧性脑损伤 天麻素 toll样受体4 氧糖剥夺 小胶质细胞 大鼠
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苍附导痰汤对肥胖型PCOS-IR模型大鼠卵巢TLR4/NF-κB p65信号通路的影响 被引量:8
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作者 徐海燕 杜青 +2 位作者 陈娟 王红梅 谭小宁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期787-793,共7页
目的 探讨苍附导痰汤对肥胖型PCOS-IR (polycystic ovarian syndrome-insulin resistance, PCOS-IR)模型大鼠卵巢Toll受体4(TLR4)/核转录因子κB p65(NF-κB p65)信号通路的调控作用。方法 48只♀大鼠随机分为正常组8只和模型组40只。... 目的 探讨苍附导痰汤对肥胖型PCOS-IR (polycystic ovarian syndrome-insulin resistance, PCOS-IR)模型大鼠卵巢Toll受体4(TLR4)/核转录因子κB p65(NF-κB p65)信号通路的调控作用。方法 48只♀大鼠随机分为正常组8只和模型组40只。来曲唑(1 mg·kg^(-1))联合高脂饮食建立肥胖型PCOS-IR大鼠模型,快速革兰染色法观察动情周期,挑选24只模型大鼠随机分为:模型组、阳性药(二甲双胍135 mg·kg^(-1))组、苍附导痰汤高、低剂量(57.96、14.49 g·kg^(-1))组,每组各6只,药物干预21 d。观察动情周期、卵巢和子宫指数变化;血液生化仪测定空腹血糖(FBG)和血脂(甘油三酯TG和总胆固醇TC)变化;酶联免疫吸附(ELISA)法测定空腹胰岛素(FINS)水平;免疫组化法和荧光定量PCR法检测卵巢中TLR4和NF-κB p65蛋白及基因的表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,卵巢多囊性改变明显,FBG、TG、TC含量和FINS、HOMA-IR水平上调,卵巢中TLR4和NF-κB p65蛋白及mRNA表达均增加(P<0.05);与模型组比较,苍附导痰汤高剂量组大鼠排卵周期得到改善,卵巢多囊性改变减轻,上述指标出现明显逆转(P<0.05)。结论 苍附导痰汤能有效改善肥胖型PCOS-IR大鼠卵巢排卵和糖脂代谢功能,作用机制可能与调控卵巢TLR4/NF-κB p65信号通路有关。 展开更多
关键词 苍附导痰汤 多囊卵巢综合征 胰岛素抵抗 慢性炎症 TOLL样受体4 核转录因子-κB p65
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泼尼松联合阿奇霉素序贯疗法治疗儿童重症肺炎支原体肺炎的疗效及对血清TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白和下游炎性因子水平的影响 被引量:6
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作者 严慧 王兰英 +2 位作者 吴小磊 洪源 彭建霞 《中国临床新医学》 2023年第5期474-478,共5页
目的探讨泼尼松联合阿奇霉素序贯疗法治疗儿童重症肺炎支原体肺炎的疗效及对血清Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白和下游炎性因子水平的影响。方法招募2019年1月至2022年6月唐山市妇幼保健... 目的探讨泼尼松联合阿奇霉素序贯疗法治疗儿童重症肺炎支原体肺炎的疗效及对血清Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白和下游炎性因子水平的影响。方法招募2019年1月至2022年6月唐山市妇幼保健院收治的儿童重症肺炎支原体肺炎患者120例,采用随机数字表法将其分为对照组(采用阿奇霉素治疗,60例)和观察组(采用泼尼松联合阿奇霉素治疗,60例)。治疗4周后,比较两组治疗效果、临床肺部感染量表(CIPS)评分、TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白以及下游炎性因子的水平。结果观察组患者的体温恢复时间、咳嗽缓解时间、咳痰缓解时间、喘息缓解时间、肺部啰音消失时间较对照组更快,住院时间更短,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组的体温、白细胞计数、气道分泌物、氧合情况、胸部X射线、痰培养等CIPS项目评分以及总分均较治疗前降低,且观察组评分较对照组更低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组TLR4、MyD88、NF-κB、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)水平均降低,且观察组水平较对照组更低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论泼尼松联合阿奇霉素序贯疗法对人体血清TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白及下游炎性因子水平有显著下调作用,可提高儿童重症肺炎支原体肺炎患者的临床疗效。 展开更多
关键词 儿童重症肺炎支原体肺炎 泼尼松 阿奇霉素 Toll样受体4/髓样分化因子88/核因子κB信号通路 炎性因子
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乌司他丁抑制TLR4/NF-κB信号通路对心肺复苏大鼠心功能的改善作用
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作者 陈建春 思永玉 +2 位作者 李元 李福全 蒋俊 《河北医药》 CAS 2023年第22期3377-3381,3387,共6页
目的旨在探究乌司他丁对心肺复苏大鼠的影响。方法通过窒息构建心脏骤停大鼠模型,窒息9.5 min后,对大鼠静脉注射肾上腺素,并对大鼠胸部进行按压以实施心肺复苏。Kaplan-Meier存活曲线分析大鼠存活率,神经系统缺损评分(NDS)评估大鼠神经... 目的旨在探究乌司他丁对心肺复苏大鼠的影响。方法通过窒息构建心脏骤停大鼠模型,窒息9.5 min后,对大鼠静脉注射肾上腺素,并对大鼠胸部进行按压以实施心肺复苏。Kaplan-Meier存活曲线分析大鼠存活率,神经系统缺损评分(NDS)评估大鼠神经系统缺损,转棒疲劳实验评估大鼠运动协调及平衡能力。ELISA法检测血清炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-6水平,western blotting检测大脑皮层TLR4/NF-κB信号通路的表达。结果乌司他丁治疗提高大鼠存活率,改善心脏骤停后的心功能及大鼠神经认知功能、运动协调能力。乌司他丁降低心脏骤停/心肺复苏后促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平,降低TLR4蛋白及p-p65/p65水平。结论乌司他丁抑制TLR4/NF-κB通路活性,对心肺复苏大鼠心功能及运动协调能力具有改善作用。 展开更多
关键词 心肺复苏 乌司他丁 心功能 循环功能 tlr4/NF-κB信号通路
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铁皮石斛多糖与Toll样受体4互作机制的计算模拟
8
作者 崔萌菲 张悦 +8 位作者 张志宇 许慧敏 刘翠 成颖 李居行 刘欢欢 贺超 郭庆彬 刘岯 《食品研究与开发》 CAS 2024年第5期15-21,共7页
为研究铁皮石斛多糖(Dendrobium officinale polysaccharide,DOP)具有免疫活性片段的结构特征及与Toll样受体4(Toll⁃like receptor 4,TLR4)的相互作用机制,基于对TLR4结合腔的亲疏水性分析,将DOP寡糖的分为疏水片段筛选和亲水片段筛选,... 为研究铁皮石斛多糖(Dendrobium officinale polysaccharide,DOP)具有免疫活性片段的结构特征及与Toll样受体4(Toll⁃like receptor 4,TLR4)的相互作用机制,基于对TLR4结合腔的亲疏水性分析,将DOP寡糖的分为疏水片段筛选和亲水片段筛选,通过分子对接和分子动力学模拟,分析作用最强的DOP片段的结构特征及与TLR4的相互作用机制。结果表明,找到作用最强的DOP七糖片段,具有与经典底物脂多糖相似的结合模式,其中疏水性四糖片段结合在疏水结合腔,亲水性三糖片段结合在电正性区域。具有潜在免疫活性的铁皮石斛多糖可以由乙酰基修饰的疏水四糖片段和没有乙酰基修饰的亲水三糖片段组成,主要通过氢键和疏水作用与TLR4进行相互作用,发挥免疫活性。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 铁皮石斛多糖 分子对接 分子动力学模拟 互作机制
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肠黏膜TLR4/NF-κB通路激活与伪无菌IgA肾病小鼠肾损害有关
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作者 唐余燕 孙蔚倩 +5 位作者 贺海东 胡屏 金玫萍 刘萍 黄鲁生 徐旭东 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期865-871,共7页
目的探讨肠黏膜Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)信号通路对伪无菌IgA肾病(IgAN)小鼠肾脏损害的影响。方法C57BL/6小鼠随机分为实验组(伪无菌小鼠造模组)、对照组(正常小鼠造模组)、伪无菌小鼠空白组、正常小鼠空白组。采用四联抗生... 目的探讨肠黏膜Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)信号通路对伪无菌IgA肾病(IgAN)小鼠肾脏损害的影响。方法C57BL/6小鼠随机分为实验组(伪无菌小鼠造模组)、对照组(正常小鼠造模组)、伪无菌小鼠空白组、正常小鼠空白组。采用四联抗生素灌胃,每天1次,连续14 d,构建伪无菌小鼠。在伪无菌小鼠的基础上,采用牛血清白蛋白(BSA)联合葡萄球菌肠毒素(SEB)建立IgAN模型,通过免疫荧光染色及过碘酸希夫(PAS)染色观察肾组织病理形态学变化,ELISA分析肠黏膜屏障损伤指标脂多糖(LPS)、可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)和右旋乳酸(D-LAC)的含量,生化分析检测24 h尿蛋白、血肌酐及尿素氮,反转录PCR及Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB(NF-κB)mRNA及蛋白水平。结果伪无菌IgAN小鼠的肾脏损伤程度较IgAN小鼠更严重,并且伪无菌IgAN小鼠的肠道黏膜LPS、sICAM-1和D-LAC表达显著升高。此外,在IgAN伪无菌小鼠的肠组织中,TLR4、MyD88、NF-κB水平的表达均上调。结论肠道菌群紊乱导致肠黏膜屏障损伤诱导TLR4信号通路的激活介导IgAN的肾脏损伤。 展开更多
关键词 IgA肾病(IgAN) 伪无菌IgA肾病小鼠 Toll样受体4(tlr4) 核因子κB(NF-κB) 肠道菌群
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血清TLR4和VEGFA表达对糖尿病视网膜病变的临床诊断及预后价值评估 被引量:3
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作者 闫秀丽 王钦 陆相庆 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期1709-1713,共5页
目的:探讨Toll样受体4(TLR4)、血管内皮生长因子A(VEGFA)在糖尿病视网膜病变(DR)患者血清中的表达情况及临床意义。方法:选取2021-01/2022-01本院收治的183例2型糖尿病(T2DM)患者为研究对象,分为非糖尿病视网膜病变(NDR)组(54例),增殖... 目的:探讨Toll样受体4(TLR4)、血管内皮生长因子A(VEGFA)在糖尿病视网膜病变(DR)患者血清中的表达情况及临床意义。方法:选取2021-01/2022-01本院收治的183例2型糖尿病(T2DM)患者为研究对象,分为非糖尿病视网膜病变(NDR)组(54例),增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)组(68例)和非增殖性糖尿病视网膜病变(NPDR)组(61例)。同期按照年龄、性别分层随机选择70例于本院进行健康体检志愿者作为对照组。出院后随访1a,根据DR患者是否发生视力残疾,分为预后不良组(40例)与预后良好组(89例)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中TLR4、VEGFA水平;通过Logistic回归分析DR发生的影响因素;利用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清TLR4、VEGFA水平诊断DR及预测预后的临床价值。结果:对照组、NDR组、PDR组和NPDR组间TLR4、VEGFA水平比较均具有差异(F=935.753、516.936,均P<0.05),各组两两比较均具有差异(P<0.05)。预后不良组患者血清中TLR4、VEGFA表达水平均高于预后良好组(P<0.01)。Logistic回归分析结果显示,TLR4、VEGFA、病程、HbA1c均是DR发生的危险因素(P<0.05);ROC结果显示,血清TLR4、VEGFA水平及二者联合预测DR的AUC分别为0.869、0.862、0.931,血清TLR4、VEGFA水平及二者联合预测DR患者视力残疾的AUC分别为0.864、0.863、0.938。结论:DR患者血清中TLR4、VEGFA表达均上调,二者联合检测可作为评估DR发生及预后不良的潜在指标。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 血清Toll样受体4(tlr4) 血管内皮生长因子A(VEGFA)
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miR-146a靶向TLR4对糖尿病所致足细胞能量代谢障碍的保护作用
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作者 张硕 聂兴 崔薇 《河北医药》 CAS 2023年第17期2589-2593,共5页
目的探讨糖尿病肾病足细胞(podocyte)能量代谢的调控机制。方法购买人源肾足细胞,高糖诱导建立糖尿病体外模型,转染miR-146a mimic或pcDNA3.1-TLR4及其阴性对照物。qRT-PCR检测miR-146a与TLR4的表达。通过检测细胞外酸化率(ECAR)、检测... 目的探讨糖尿病肾病足细胞(podocyte)能量代谢的调控机制。方法购买人源肾足细胞,高糖诱导建立糖尿病体外模型,转染miR-146a mimic或pcDNA3.1-TLR4及其阴性对照物。qRT-PCR检测miR-146a与TLR4的表达。通过检测细胞外酸化率(ECAR)、检测糖酵解关键酶HK2的mRNA评估足细胞的糖酵解能力;通过JC-1荧光染色与ATP试剂盒检测了线粒体膜电位的变化以及ATP的含量。Starbase网站(https://starbase.sysu.edu.cn/)预测、双荧光素酶报告实验检测miR-146a与TLR4的靶向结合。结果高糖诱导的足细胞中miR-146a表达下调,TLR4表达上调,糖酵解能力下降,细胞膜电位下降,ATP产生减少;上调miR-146a的表达可以改善这种变化,而同时上调TLR4的表达则抑制了高表达miR-146a的改善作用。miR-146a靶向抑制TLR4的表达。结论糖尿病肾病足细胞中miR-146a低表达,促进了TLR4的表达,抑制了足细胞的糖酵解、膜电位及ATP的含量,最终导致足细胞的能量代谢障碍。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 足细胞 能量代谢障碍 MIR-146A tlr4 JC-1 ECAR
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火炭母通过调控TLR4-TBK1信号通路改善鼠伤寒沙门菌感染小鼠空肠的炎症反应
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作者 张易安 郭琰娜 +5 位作者 刘妍 刘涵笑 沈幸玲 刘逸雷 唐陆平 何永明 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期132-139,共8页
为了探讨火炭母对鼠伤寒沙门菌感染小鼠空肠的免疫保护作用及其潜在机制。本试验将48只雌性BALB/c小鼠随机分为6个组:空白对照组、模型组、阳性药物组和火炭母高、中、低剂量组,每组8只。阳性药物组小鼠灌胃庆大霉素[20 mg/(kg·bw... 为了探讨火炭母对鼠伤寒沙门菌感染小鼠空肠的免疫保护作用及其潜在机制。本试验将48只雌性BALB/c小鼠随机分为6个组:空白对照组、模型组、阳性药物组和火炭母高、中、低剂量组,每组8只。阳性药物组小鼠灌胃庆大霉素[20 mg/(kg·bw)],火炭母高、中、低剂量组小鼠分别按16、8和4 g/(kg·bw)剂量灌胃火炭母,空白对照组和模型组小鼠给予等体积的灭菌生理盐水,共连续给药8 d。预防性给药2 d后,每只小鼠(空白对照组除外)灌胃0.2 mL半数致死量(LD 50)鼠伤寒沙门菌(5×10^(4) CFU/mL)致病。给药结束后,处死小鼠取空肠用于组织病理学检查和Western blot。结果显示,鼠伤寒沙门菌感染后,小鼠空肠杯状细胞和肠腺红细胞增多、肠绒毛结构松散,火炭母各剂量组小鼠空肠杯状细胞和肠腺红细胞明显减少,火炭母减轻了小鼠空肠组织损伤。Western blot结果显示,与空白对照组相比,模型组小鼠空肠中免疫因子β干扰素(IFN-β)蛋白表达显著上升(P<0.05),γ干扰素(IFN-γ)蛋白表达显著下降(P<0.05),干扰素调节因子3(IRF3)、磷酸化TANK结合激酶1(p-TBK1)和Toll样受体4(TLR4)蛋白表达显著上调(P<0.05),炎性因子白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)和核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达显著上升(P<0.05);与模型组相比,不同剂量火炭母可以不同程度降低炎症因子IL-6(P<0.05或P>0.05)、IL-1β(P<0.05)和NF-κB p65(P<0.05)蛋白表达,显著提高TLR4、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)蛋白的表达和TANK结合激酶1(TBK1)蛋白表达及其磷酸化水平(P<0.05),提高下游信号IRF3蛋白的表达(P<0.05)及其磷酸化水平(P<0.05或P>0.05),进而提高空肠中IFN-β(P<0.05或P>0.05)和IFN-γ(P<0.05)蛋白的表达。结果表明,火炭母通过调控TLR4-TBK1信号通路改善鼠伤寒沙门菌感染小鼠空肠的炎症反应。 展开更多
关键词 火炭母 鼠伤寒沙门菌 空肠 Toll样受体4(tlr4) TANK结合激酶1(TBK1)
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槲皮素通过抑制TLR4/NLRP3信号通路挽救缺血再灌注诱发的大鼠心肌细胞凋亡的研究
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作者 陶真茂 杨振 +1 位作者 郭春峰 刘秀红 《解剖学研究》 CAS 2023年第4期307-313,321,共8页
目的探讨槲皮素(QCT)通过抑制Toll样受体4(TLR4)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)信号通路对缺血再灌注诱发的大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法60只SD雄性大鼠,随机选择15只作为sham假手术组,剩余45只大鼠构建心肌缺血再灌注损伤模型... 目的探讨槲皮素(QCT)通过抑制Toll样受体4(TLR4)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)信号通路对缺血再灌注诱发的大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法60只SD雄性大鼠,随机选择15只作为sham假手术组,剩余45只大鼠构建心肌缺血再灌注损伤模型,造模后大鼠随机分为I/R模型组、QCT治疗组(50 mg/kg QCT)、QCT+BMS⁃986299(NLRP3激动剂)组(50 mg/kg QCT+10 mg/kg BMS⁃986299),每组15只大鼠。取材后将心肌组织固定切片,TTC染色直接观察梗死区域大小;固定心肌组织后进行HE及Masson染色观察心肌病理结构改变;收集大鼠血清进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清心肌损伤标志物(CK⁃MB、cTnI)及促炎因子(TNF⁃α、IL⁃6)水平;心肌组织切片进行TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况;心肌组织切片进行NLRP3的免疫组化染色观察NLRP3表达;Western blot(WB)法测定大鼠心肌组织凋亡及TLR4/NLRP3通路蛋白表达。结果与sham组比较,缺血再灌注心肌损伤组大鼠心肌组织可观察到大片梗死区域,血清中CK⁃MB、cTnI、TNF⁃α、IL⁃6水平更高,心肌组织中TUNEL+凋亡细胞比例增高同时伴随NLRP3表达增高,WB检测发现心肌组织Bax、NLRP3、ASC、Cleaved⁃caspase 1、TLR4表达增高而Bcl⁃2表达降低(P<0.05)。给药QCT治疗后,治疗组大鼠心肌梗死区域面积减小,血清中CK⁃MB、cTnI、TNF⁃α、IL⁃6水平下降,心肌组织中凋亡细胞比例及NLRP3表达均下降,心肌组织中Bax、NLRP3、ASC、Cleaved⁃caspase 1、TLR4表达下降而Bcl⁃2表达增高(P<0.05)。但给药QCT的同时给药BMS⁃986299(NLRP3激动剂)会部分抵消QCT对于I/R大鼠心肌的保护作用,使大鼠心肌梗死面积扩大并加重心肌损伤和炎症反应。结论槲皮素可能通过抑制TLR4/NLRP3通路对I/R大鼠发挥心肌保护作用。 展开更多
关键词 槲皮素 心肌缺血再灌注损伤 TOLL样受体4 核苷酸结合寡聚化结构域样受体3
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冷暴露对内毒素性急性肺损伤小鼠TLR4信号通路的影响
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作者 齐佳悦 李妍 +7 位作者 吴明达 冯宪敏 万朋 骆晓峰 朱文赫 吕士杰 谢维 高俊涛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期20-25,共6页
为了研究冷暴露对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤的影响及其与Toll样受体4(TLR4)信号通路的关系,本试验将40只健康BALB/c雄性小鼠,随机分为正常对照组(N组)、冷暴露组(C组)、LPS组(L组)和冷暴露+LPS组(C+L组),每组10只,其中L组和C+L组小... 为了研究冷暴露对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤的影响及其与Toll样受体4(TLR4)信号通路的关系,本试验将40只健康BALB/c雄性小鼠,随机分为正常对照组(N组)、冷暴露组(C组)、LPS组(L组)和冷暴露+LPS组(C+L组),每组10只,其中L组和C+L组小鼠鼻滴LPS溶液[0.5 mg/(kg·bw)],N组和C组鼻滴等体积无菌PBS溶液,滴鼻后将N组和L组小鼠置于室温环境下,C组和C+L组小鼠置于(4±2)℃通风冷室中,6 h后采用BCA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白浓度和白细胞数量;ELISA法检测BALF中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)含量;取肺组织称重,计算肺组织的湿干重比(W/D),苏木精-伊红(H.E.)染色法观察肺组织病理改变;Western blot法测定肺组织TLR4蛋白表达量。结果显示,与N组比较,C组总蛋白浓度、白细胞数量,TNF-α、IL-6含量,肺组织W/D及肺组织TLR4蛋白表达量各项指标均无明显变化,差异没有统计学意义(P>0.05);N组和C组肺组织H.E.染色结果均正常,没有明显的差别;与N组比较,L组上述各项指标均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);L组肺组织发生组织病理学改变,出现了炎性细胞浸润、肺水肿、肺泡出血和肺泡间隔增厚,肺泡结构受损;与C组比较,C+L组上述各项指标均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),并且肺组织发生与L组相似的组织病理学改变;与L组比较,C+L组上述各项指标均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),并且肺组织的组织病理学改变加重。结果表明,冷暴露可加重LPS诱导的急性肺损伤,损伤作用可能与TLR4信号通路机制有关。 展开更多
关键词 急性肺损伤 冷暴露 Toll样受体4(tlr4) 信号通路 炎症因子
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HMGB1-TLR4信号通路及其调控物在抗肝纤维化中的应用价值
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作者 曾华华 马敏 +2 位作者 孙宇杰 胡嘉敏 黄德斌 《药学研究》 CAS 2023年第6期398-402,共5页
肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)的病理生理机制非常复杂,目前始终缺乏理想的治疗药物与方法。本文从高迁移率族蛋白(HMGB1)-Toll样受体4(TLR4)的结构、相关因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)等... 肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)的病理生理机制非常复杂,目前始终缺乏理想的治疗药物与方法。本文从高迁移率族蛋白(HMGB1)-Toll样受体4(TLR4)的结构、相关因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)等]与功能[调节核转录因子-κB(NF-κB)、激活促丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等]分析得知,高迁移率族蛋白-Toll样受体4主要是通过活化肝显状细胞(HSC)和促丝裂原活化蛋白激酶,并增强核转录因子-κB的促炎因子释放作用而加重肝纤维化。故此认为,通过调控高迁移率族蛋白-Toll样受体4信号通路对于减轻肝纤维化的发生发展具有重要价值。尽管在现有高迁移率族蛋白-Toll样受体4调控物中(如Toll样受体本抗体、核转录因子-κB抑制剂,中药汤剂柴芪益肝方、中成药三草颗粒、单味中药黄芪等),其抗肝纤维化作用未达到临床期望值,但以高迁移率族蛋白-Toll样受体4信号通路为路径,筛选抗肝纤维化先导化合物(尤其是多成分多靶位互补效应的中药)仍然是今后努力的方向。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白 TOLL样受体4 肝纤维化
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哮喘儿童TLR4基因多态性与其外周血炎症因子及肺功能水平的相关性研究
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作者 王字卉 李权伦 散琴 《中国妇幼健康研究》 2023年第12期63-69,共7页
目的分析TLR4基因多态性与儿童哮喘患者外周血炎症因子及肺功能水平的相关性。方法选择2019年4月至2022年10月湖北省十堰市妇幼保健院收治的172例急性发作期哮喘患儿为实验组,并根据发病严重程度分为轻度、中度、重度和危重级,另选取同... 目的分析TLR4基因多态性与儿童哮喘患者外周血炎症因子及肺功能水平的相关性。方法选择2019年4月至2022年10月湖北省十堰市妇幼保健院收治的172例急性发作期哮喘患儿为实验组,并根据发病严重程度分为轻度、中度、重度和危重级,另选取同期于本院健康体检的136例儿童作为对照组,测定各组受试者肺功能指标一秒率(FEV_(1)/FVC)和呼出气一氧化氮(FeNO),采集外周静脉血,检测白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、嗜酸性粒细胞百分率(Eos)、免疫球蛋白E(IgE)等,应用聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RELP)技术检测TLR4基因Asp299Gly(A/G)和Thr399Ile(C/T)位点单核苷酸多态性,分析其与儿童哮喘的相关性。结果实验组外周血中IL-4、Eos、IgE及FeNO的水平高于对照组,而IFN-γ及FEV_(1)/FVC(%)水平低于对照组,差异均有统计学意义(t值介于8.90~29.04之间,P<0.05);两组Asp299Gly的基因型和等位基因分布相比差异不具有统计学意义(P>0.05);实验组Thr399Ile单核苷酸多态性位点TT基因型分布频率高于对照组,T等位基因分布频率高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)值分别为10.19、11.50,P<0.05);携带Thr399Ile TT基因型哮喘患儿的IL-4和FeNO水平高于CC和CT基因型,IFN-γ的水平低于CC和CT基因型(F值分别为44.95、24.29、8.51,P<0.05);秩和检验显示携带Thr399Ile单核苷酸多态性位点基因型与哮喘发病程度不相关(P>0.05);二元Logistic回归分析结果显示TT基因型人群是CC型人群患病风险的2.353倍(P<0.05)。结论TLR4基因Thr399Ile位点多态性与儿童哮喘的发生具有相关性,影响哮喘患儿IL-4、IFN-γ、FeNO的表达水平,但与患儿的肺功能水平和发病的严重程度无关。 展开更多
关键词 儿童哮喘 TOLL样受体4 基因多态性 肺功能 白细胞介素-4、γ干扰素
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Effects of Propofol on The mRNA Expression of Toll-like Receptor 4 in BV-2 Cells During Mimic Ischemia-Reperfusion Injury In Vitro 被引量:7
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作者 张清 孙鹏 +2 位作者 张诗海 田元 张景辉 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2008年第6期711-713,共3页
This study investigated the effects of propofol on the mRNA expression of Toll-like receptor-4 (TLR4) in BV-2 cells during mimic ischemia-reperfusion (I/R) injury in vitro. BV-2 cells, a mouse microglia line, were... This study investigated the effects of propofol on the mRNA expression of Toll-like receptor-4 (TLR4) in BV-2 cells during mimic ischemia-reperfusion (I/R) injury in vitro. BV-2 cells, a mouse microglia line, were cultured and divided into 4 groups at random: control group (group C), ischemia/reperfusion group (group I/R), low-dose propofol (25 μmol/L) intervention group (group PF25) and high-dose propofol (100 μmol/L) intervention group (group PF100). The mRNA expression of TLR4 and NF-κB was measured by means of RT-PCR. TNF-α levels in the supernatants of BV-2 cells were detected by ELISA. The results showed that the mRNA expression of TLR4 and NF-κB was significantly higher in groups I/R, PF25 and PF100 than in group C (P〈0.01). And the TNF-α level in the supernatants was elevated in groups I/R, PF25 and PF100 as compared with that in group C (P〈0.01). After pre-treatment with propofol, the mRNA expressions of TLR4 and NF-κB and the TNF-α level were significantly decreased in groups PF25 and PF100 in comparison to those in group I/R (P〈0.01). And the decrease in those indicators was more significant in group PF100 than in group PF25 (P〈0.01). It was concluded that propofol exerted brain-protecting effects during I/R injury by suppressing the mRNA expressions of TLR4 and NF-κB and deceasing the TNF-α level. 展开更多
关键词 PROPOFOL toll-like receptor-4 ISCHEMIA/REPERFUSION MICROGLIA
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TGF-β1 treated murine dendritic cells are maturation resistant and down-regulate Toll-like receptor 4 expression 被引量:3
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作者 牟海波 林茂芳 +2 位作者 岑洪 俞静 孟筱坚 《Journal of Zhejiang University Science》 CSCD 2004年第10期1239-1244,共6页
Objective: To explore the effects of transforming growth factor β1(TGF-β1) on dendritic cells (DC). Methods: Murine bone marrow cells were cultured with GM-CSF and TGF-β1 to develop TGF-β1-treated DC (TGFβ-DC). T... Objective: To explore the effects of transforming growth factor β1(TGF-β1) on dendritic cells (DC). Methods: Murine bone marrow cells were cultured with GM-CSF and TGF-β1 to develop TGF-β1-treated DC (TGFβ-DC). Then they were stimulated by lipopolysaccharide (LPS). Their phenotypes were assessed by flow cytometry (FCM). The allogeneicstimulating capacity of DC was measured by mixed lymphocyte reaction (MLR) using BrdU ELISA method and IL-12p70 protein was detected by ELISA. The expression of Toll-like receptor 4 (TLR4) was analyzed by semi quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) and FCM. Results: Compared to immature DC (imDC) cultured by GM-CSF alone, the TGFβ-DC express lower CD80, CD86, I-A^b and CD40. The TGFβ-DC were resistant to maturation with LPS. Maturation resistance was evident from a failure to up-regulate co-stimulatory molecules (CMs), to stimulate larger T cells proliferation and to enhance secretion of IL-12p70. We also found that TGF-β1 could down-regulate TLR4 expression on TGFβ-DC. Conclusion: TGFβ-DC are resistant to maturation stimulus (LPS) and might have some correlation with the down-modulation of TLR4 expression. 展开更多
关键词 TGF-Β1 DC TGFΒ tlr4 toll-like LPS IL-12
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Effect of remifentanil on toll-like receptor 4, NF-κB and IL-6 in rabbit myocardial ischemia/reperfusion model 被引量:1
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作者 Wang Wei Tian Fuhong +1 位作者 Zhao Xinjing Jing Guixia 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2012年第3期134-142,共9页
Objective:To investigate whether remifentanil induced cardioprotecting effect is associated with expression of toll-like receptor 4(TLR4),nuclear factor κB(NF-κB) and serum interleukin-6(IL-6).Methods:Fifty rabbits ... Objective:To investigate whether remifentanil induced cardioprotecting effect is associated with expression of toll-like receptor 4(TLR4),nuclear factor κB(NF-κB) and serum interleukin-6(IL-6).Methods:Fifty rabbits were randomly divided into 5 groups(n=10) according to the treatment:sham operation group(group A),ischemia-reperfusion group(group B),low-dose remifentanil group(group C),mediate-dose remifentanil group(group D),and high-dose remifentanil group(group E).Myocardial TLR4 mRNA levels,NF-κB protein expression and serum levels of IL-6 were observed in 120 min after reperfusion.Results:The myocardial expressions of TLR4 mRNA,NF-κB protein and IL-6 level in sera of groups B,C,D and E were elevated compared with group A.However,remifentanil significantly reduced the levels of TLR4 mRNA,NF-κB protein expression and serum IL-6 in groups C,D and E compared with group B.There were remarkable differences between the groups(P<0.01).Conclusion:Intravenous remifentanil has protective effect against rabbit myocardial ischemia/reperfusion injury.This effect may be associated with TLR4,NF-κB expressions on myocytes and serum level of IL-6 in a dose-dependent manner. 展开更多
关键词 缺血/再灌注损伤 TOLL样受体4 IL-6 芬太尼 NF-KB MRNA表达水平 心肌 白细胞介素-6
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右美托咪定抑制单肺通气兔肺组织炎性细胞TLR4、NF-κB和ICAM-1mRNA的表达 被引量:14
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作者 卞清明 顾连兵 +3 位作者 许仄平 李彭依 钱燕宁 朱东亚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1197-1201,共5页
目的观察右美托咪定对兔单肺通气期间肺组织损伤及Toll样受体4(TLR4)、核因子κB p65(NF-κB p65)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)mRNA表达的影响。方法 30只新西兰白兔随机分为3组:双肺通气组(T组)、单肺通气组(O组)、右美托咪定联合单肺通... 目的观察右美托咪定对兔单肺通气期间肺组织损伤及Toll样受体4(TLR4)、核因子κB p65(NF-κB p65)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)mRNA表达的影响。方法 30只新西兰白兔随机分为3组:双肺通气组(T组)、单肺通气组(O组)、右美托咪定联合单肺通气组(D-O组),每组10只。T组行双肺通气3.5 h,O组、D-O组于双肺通气30 min后行右单肺通气3 h。D-O组于气管切开前静脉泵注右美托咪定1μg/kg(10 min泵注完毕),随后以1μg/(kg·h)的速度持续泵注;T组、O组则持续泵注等容量的生理盐水。各组于实验结束后处死动物,取下左侧肺组织,进行肺组织湿/干(W/D)质量比测量;采用HE染色,光镜下观察双侧肺组织病理学改变;并采用实时定量PCR法检测左侧肺组织TLR4、NF-κB p65、ICAM-1 mRNA的表达。结果与T组比较,O组和D-O组左肺W/D比均显著增加;与O组比较,D-O组左肺W/D比显著降低。与T组比较,O组、D-O组肺组织病理学损伤程度均明显加重,但D-O组肺损伤程度明显较O组减轻。与T组比较,O组肺组织中TLR4、NF-κB p65、ICAM-1 mRNA的表达均显著升高,而D-O组肺组织中TLR4、NF-κB p65、ICAM-1 mRNA表达则显著低于O组。结论右美托咪定通过抑制TLR4、NF-κB p65 mRNA的水平,减轻炎症和兔单肺通气所致的肺组织损伤。 展开更多
关键词 右美托咪定 Toll样受体4(tlr4) 核因子κB p65(NF-κB p65) 细胞间黏附分子1(ICAM-1) 单肺通气
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