氮密互作对优质食味水稻盐粳939产量和品质的影响

研究了不同氮肥施用量(纯氮0、90、150、210、270 kg/hm^(2))和种植密度(30 cm×18 cm、30 cm×14 cm、30 cm×10 cm)互作对优质食味水稻盐粳939产量和品质的影响。结果表明:不同施氮量和种植密度对盐粳939的产量和品质影响显著。低密高氮依然是产量显著提高的手段;在兼顾产量的前提下:在密度30 cm×18 cm、施氮量10 kg/667 m^(2)的条件下可获得较好的外观品质;在密度30 cm×10 cm、施氮量10 kg/667 m^(2)的条件下可获得较好的食味品质。低氮条件下水稻的氮素利用率等指标会显著提高。

血清mi R939-和mi R15b-表达与糖尿病视网膜病变患者微血管损伤的相关性分析

目的 分析血清miR-939和miR-15b表达与糖尿病视网膜病变(DR)患者微血管损伤的相关性。方法 选取2021年1月至2022年10月在保定市第二医院进行诊治的2型糖尿病患者176例作为研究对象。根据研究对象根据是否发生DR及病变程度分为无DR患者74例(NDR组)、非增殖型DR患者62例(NPDR组)、增殖型DR(PDR)患者40例(PDR组)。采用实时荧光定量PCR检测各组血清miR-939、miR-15b相对表达水平,酶联免疫吸附试验法检测各组血管内皮生长因子(VEGF)水平,流式细胞术检测内皮细胞(ECs)、内皮祖细胞(EPCs)和循环祖细胞(CPCs)计数百分比。比较3组患者血清miR-939、miR-15b、VEGF水平和ECs、EPCs、CPCs。采用Pearson相关性分析血清miR-939、miR-15b与VEGF、ECs、EPCs、CPCs的相关性。采用多因素Logistic回归分析2型糖尿病患者发生DR的影响因素。结果 PDR组、NPDR组血清miR-939、miR-15b相对表达水平低于NDR组,而血清VEGF水平高于NDR组,差异有统计学意义(P<0.05)。PDR组、NPDR组ECs高于NDR组,而EPCs和CPCs低于NDR组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-939与VEGF、ECs呈负相关(r=-0.407、-0.613,P<0.05),与EPCs、CPCs呈正相关(r=0.481、0.486,P<0.05),血清miR-15b与VEGF、ECs呈负相关(r=-0.539、-0.625,P<0.05),与EPCs、CPCs呈正相关(r=0.451、0.483,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,2型糖尿病病程、糖化血红蛋白、餐后2 h血糖、VEGF、miR-939和miR-15b为2型糖尿病患者发生DR的影响因素(P<0.05)。结论 DR患者血清miR-939、miR-15b表达与VEGF、ECs、EPCs和CPCs密切相关,DR患者血清miR-939、miR-15b表达能够为其微血管损伤程度的早期判断与评估提供一定参考。

小檗碱和XAV939联合应用可抑制骨肉瘤细胞MG-63的迁移与凋亡

目的:探讨小檗碱(BBR)联合XAV939对骨肉瘤MG-63细胞迁移与凋亡的影响及其可能的机制。方法:培养MG-63细胞,分别加入20~120μmol/L的BBR和5~60μmol/L的XAV939,通过CCK-8法测定BBR和XAV939的细胞毒性,采用Chou-Talalay分析法计算两药的联合指数,确定后续实验的干预剂量;将MG-63细胞随机分为空白对照(NC)组、BBR组、XAV939组和BBR+XAV939联合组,采用划痕愈合实验、Transwell小室法检测BBR与XAV939单独或联合处理对MG-63细胞迁移能力的影响,Hoechst 33258染色、JC-1染色及AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测对细胞线粒体膜电位和凋亡的影响,免疫荧光法检测BAX蛋白的表达,WB法检测对细胞中MMP-2表达的影响,qPCR法检测对MMP-2基因表达的影响。结果:BBR和XAV939以剂量依赖方式抑制MG-63细胞的增殖,选定30μmol/L BBR、7.5μmol/L XAV939用于后续实验。与NC组相比,BBR(30μmol/L)、XAV939(7.5μmol/L)及BBR+XAV939联合处理细胞24 h后,MG-63细胞迁移能力显著降低、凋亡细胞显著增加(均P<0.05),线粒体膜电位下降(P<0.01),MMP-2的基因表达和MMP-2、BAX蛋白水平均降低(均P<0.05),并且,联合组的效应明显强于单药处理且(P<0.05或P<0.01)。结论:BBR和XAV939单独或联合应用可以抑制骨肉瘤MG-63细胞的迁移、促进凋亡,其机制可能与迁移相关蛋白MMP-2的表达降低,凋亡相关蛋白BAX的水平增加有关。

水稻优良食味品种通系939特征特性及高产栽培措施

通系939是通化市农科院于1999年利用通8583-3为母本,秋田32为父本杂交育成的水稻品种,于2014年通过吉林省农作物品种审定委员会审定。阐述了通系939的特征特性,并从培育壮秧、栽培密度、水分管理、病虫害防治等方面总结其高产栽培技术。

Wnt通路抑制剂XAV-939对牙髓干细胞成脂分化的影响

目的通过体外实验探讨Wnt通路抑制剂XAV-939对牙髓干细胞增殖及成脂分化的影响。方法酶消化法培养牙髓干细胞,鉴定后采用CCK8试剂盒检测XAV-939对牙髓干细胞增殖的影响,油红O染色检测XAV-939对牙髓干细胞成脂分化的影响,q RT-PCR检测成脂分化过程中,XAV-939对Wnt通路相关基因糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK3β)和β-catenin以及成脂分化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(peroxisome proliferator activated receptor-γ2,PPARγ2)和CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα)的影响。结果牙髓干细胞成脂诱导14 d后,XAV-939上调GSK3β、PPARγ2和C/EBPα的表达,同时下调β-catenin的表达。结论 XAV-939可以通过抑制Wnt通路促进牙髓干细胞的成脂分化。

XAV-939对三阴性乳腺癌抑制的作用

目的：探索XAV-939对三阴性乳腺癌的生长产生抑制作用及其机制。方法：体外检测XAV-939对MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用，并检测Axin 1、Axin 2、β-catenin和p-β-catenin蛋白的表达以及VEGF-A的分泌水平。在体观察XAV-939对裸鼠移植瘤的体积和瘤重变化情况，并检测肿瘤组织中Axin 1、Axin 2、β-catenin和p-β-catenin蛋白的表达，以及VEGF表达、微血管密度、增殖指数及凋亡指数。结果：XAV-939可以抑制MDA-MB-231细胞的生长，其抑制作用呈浓度依赖型；同时XAV-939抑制了MDA-MB-231细胞分泌VEGF-A的能力。体内实验中，XAV-939可以明显抑制肿瘤组织生长；肿瘤组织的VEGF表达量下降，微血管密度下降；肿瘤组织的凋亡指数显著上升；增殖指数没有明显变化。体外体内实验均显示XAV-939处理组的Axin1、Axin2和p-β-catenin表达量明显上升而β-catenin显著下降。结论：XAV-939可以通过抑制Wnt／β-catenin通路在体内外抑制三阴性乳腺癌细胞／组织的增殖。

羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤PS2、COX-2的影响

目的探讨羟基喜树碱对人胆管癌QBC939裸鼠移植瘤的乳癌相关肽(PS2)、环氧合酶-2(COX-2)的影响,分析PS2、COX-2与肿瘤发生、发展的关系。方法建立人胆管癌QBC939细胞株裸鼠皮下移植瘤模型,将30只裸鼠随机分成对照组、羟基喜树碱低剂量组和羟基喜树碱高剂量组,观察移植瘤体生长情况,RT-PCR法检测瘤体内PS2、COX-2 mRNA表达。结果与对照组比,羟基喜树碱低、高剂量组都可使移植瘤体的PS2 mRNA表达增高;COX-2 mRNA表达降低,且瘤体生长减慢,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论羟基喜树碱可降低移植瘤COX-2 mRNA表达,增高移植瘤体的PS2 mRNA表达,并使人胆管癌裸鼠移植瘤生长减慢。

miR-939在人肺癌中的表达及对细胞周期的影响

目的:探讨miR-939在人肺癌细胞株A549中的表达及增强miR-939表达对肺癌细胞周期的影响。方法:提取15对肺癌、癌旁正常组织标本的RNA,用qPCR法检测miR-939的表达。将miR-939前体转染入A549中,实验分为三组,即前体转染组(P组)、转染试剂阴性对照组(N组)、转染试剂空白对照组(C组),分别以qPCR法检测miR-939前体转染后三组细胞内miR-939的表达水平。用MTT法测定细胞生长曲线。PI染色法检测转染后三组细胞周期变化情况。结果:相对肺癌癌旁正常组织,86.7%肺癌组织中miR-939呈低表达(P<0.01)。P组中miR-939表达水平较N组、C组都显著升高(P<0.01)。转染48h后,P组较N组、C组,G1期细胞百分比明显增多,S期细胞百分比明显减少(P<0.05)。结论:miR-939在肺癌组织中呈低表达,上调A549细胞中miR-939的表达,能够诱导细胞周期阻滞。提示miR-939在肺癌的发生发展过程中有可能起着重要作用。

蟾毒灵抑制胆总管癌细胞QBC-939增殖和诱导凋亡的实验研究

目的观察蟾毒灵对人胆管癌细胞QBC-939增殖和凋亡的影响,以及凋亡相关蛋白表达量的变化。方法体外培养人胆管癌QBC-939细胞,运用MTT检测蟾毒灵对胆管癌细胞增殖的影响,采用流式细胞仪检测蟾毒灵对胆管癌细胞凋亡率和线粒体膜电位的影响;并采用Western blotting检测凋亡相关蛋白Caspase3、激活型的Caspase3(Cleaved-Caspase3)和Cleaved-PARP的表达量变化。结果蟾毒灵对人胆管癌细胞QBC-939增殖具有明显抑制作用,在一定浓度下表现出时间、剂量依赖性。流式细胞仪检测显示:细胞的凋亡率明显增加;线粒体膜电位随蟾毒灵浓度增加,膜电位发生下调。Western blotting结果显示:蟾毒灵处理QBC-939细胞48h后,Caspase3蛋白被剪接活化,激活型的Caspase3(Cleaved-Caspase3)表达量升高;同时,Caspase3的作用底物多聚聚合酶PARP的降解产物(Cleaved-PARP)表达明显升高,且呈浓度依赖性。结论蟾毒灵能够明显抑制人胆管癌QBC-939细胞的增殖,并呈时间和浓度依赖性;线粒体凋亡途径在蟾毒灵的抗癌过程中发挥了作用。

c-Met siRNA对肝细胞生长因子诱导的人胆管癌QBC939细胞增殖的影响

目的:近年来胆管癌的发病率和病死率呈上升的趋势,5年生存期低于5%,因此亟需利用现代生物技术探索新的治疗方法。探讨针对肝细胞生长因子(HGF)受体c-Met的RNA干扰对人胆管癌(CCA)QBC939细胞增殖的影响。方法:构建针对人c-Met基因的小干扰RNA(siRNA),转染体外培养的人CCA QBC939细胞,应用MTT法检测细胞增殖,Western blot检测c-Met、细胞周期素(Cyclin)D1和A表达以及磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和胞外信号调节激酶(ERK1/2)信号通路活化。结果:c-Met siRNA显著抑制c-Met蛋白表达,且随着其浓度的增加,c-Met蛋白表达逐渐下降,500 nmol/L c-Met siRNA对c-Met蛋白表达的抑制率达65%。HGF刺激24 h,细胞增殖是对照组的4.54倍,100 nmol/L c-Met siRNA预处理即显著抑制HGF诱导的细胞增殖,其抑制率达26%,且随浓度增加,其抑制作用逐渐增强,500 nmol/L c-Met siRNA对HGF诱导的细胞增殖的抑制率达85%。HGF刺激4h,PI3K和Akt的活性即显著增强,分别是对照组的4.09和4.54倍,c-Met siRNA可呈浓度依赖性的抑制HGF诱导的PI3K/Akt活化,500 nmol/L c-Met siRNA几乎完全抑制HGF诱导的PI3K/Akt活化。HGF显著诱导人CCAQBC939细胞ERK1/2活化,50 ng/ml HGF刺激4 h,磷酸化ERK1/2表达是对照组的3.63倍,c-Met siRNA可呈浓度依赖性的抑制HGF诱导的ERK1/2活化。HGF显著诱导人CCA QBC939细胞细胞周期素D1和A表达,分别是对照组的2.83和3.16倍,c-Met siRNA可呈浓度依赖性的抑制HGF诱导的细胞周期素D1和A表达。结论:针对人c-Met基因的RNA干扰可有效阻断人CCA QBC939细胞c-Met表达,并通过阻断PI3K/Akt和ERK1/2信号通路活化而抑制HGF诱导的细胞增殖。

XAV939对肝癌细胞增殖及糖酵解的影响

目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路特异性抑制剂XAV939对肝癌细胞增殖及糖酵解过程的影响。方法:MTT方法检测不同浓度XAV939对肝癌细胞Bel-7402、HCCLM3增殖能力的影响;Western blot方法检测XAV939对肝癌Bel-7402、HCCLM3细胞Wnt/β-catenin信号通路关键基因和其下游靶基因表达的影响,以及对糖酵解过程中关键调控基因表达的影响。运用SPSS 19.0统计软件分析各组间的差异。结果:MTT结果表明不同浓度的XAV939能够不同程度的抑制Bel-7402、HCCLM3细胞增殖能力,XAV939对两种细胞的抑制率接近50%时,浓度分别为:30μmol/L、20μmol/L。Western blot结果显示,XAV939可以显著抑制Wnt/β-catenin及其下游基因c-myc、Cyclin D1的表达,有效抑制β-catenin信号通路活性;同时,XAV939可以通过抑制HK-2、LDHA而非Glut-1的蛋白表达水平来抑制肝癌细胞的糖酵解过程。结论:XAV939在体外能够有效抑制肝癌细胞Wnt/β-catenin信号通路及其依赖性细胞增殖和糖酵解过程。

体外转染PTEN抑制胆管癌QBC939细胞生长及下调mTOR表达的研究

目的研究信号转导通路PI3K/AKT/PTEN/mTOR中抑癌基因PTEN在体外对胆管癌QBC 9 3 9细胞生长的抑制作用,及对下游mTOR表达的影响。方法用携带有野生型PTEN和突变型PTEN的真核表达载体及空载质粒转染QBC 9 3 9;用W estern blot检测转染后PTEN蛋白的表达及蛋白激酶B磷酸化的变化;流式细胞技术检测细胞周期和细胞凋亡情况,及对下游mTOR表达的影响。结果野生型PTEN转染成功后的QBC 9 3 9细胞中PTEN明显上升,磷酸化AKT明显下降,mTOR表达也明显下调;而突变型PTEN转染后的细胞中PTEN上升,但磷酸化AKT的变化不明显,mTOR的表达亦无明显变化。结论PTEN通过磷酸化AKT使之活化,进一步使下游的mTOR同步下调,继而调节肿瘤细胞周期和细胞凋亡。在PI3K/AKT/PTEN/mTOR信号转导途径中,PTEN与mTOR通过AKT的磷酸化有密切关系。

大蒜素诱导人胆管癌细胞QBC939凋亡的实验研究

目的:观察大蒜素对人胆管癌细胞QBC939的作用。方法:MTT法检测大蒜素对QBC939细胞的抑制作用;光镜和电镜观察大蒜素作用后细胞形态的变化;流式细胞仪分析细胞周期的改变;凝胶电泳法检测细胞凋亡情况。结果:随着大蒜素作用时间的延长及浓度的增加,其对QBC939细胞的增殖抑制作用就越明显;流式细胞仪分析显示G2/M期阻滞和细胞凋亡;凝胶电泳示实验组DNA梯带(DNA ladder)形成。结论:大蒜素诱导的人胆管癌细胞的凋亡与细胞DNA分裂期阻滞密切相关。这一作用机制将为临床治疗提供理论依据。

UPR在人胆管癌细胞株QBC939中的作用

目的:研究UPR(未折叠蛋白反应,unfolded protein response)在QBc939细胞中的作用,为临床治疗胆管癌提供新思路。方法:低剂量过氧化氢(H_2O_2)、顺铂(DDP)作用于人胆管癌QBC939细胞系,MTT法测定不同处理组细胞生长曲线,westem-blot法测定不同处理组IRElα、BiP蛋白表达情况。结果:低剂量过氧化氢诱导QBc939增殖,顺铂抑制QBC939细胞增殖,IRE1α、BiP蛋白在过氧化氢组表达强阳性。结论:UPR促进细胞增殖,对细胞起保护作用,降低顺铂的抑制细胞作用。

不同浓度XAV939对肺腺癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的观察不同浓度端锚聚合酶抑制剂XAV939对肺腺癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法取肺腺癌A549细胞,分为XAV939组和空白对照组,XAV939组分别加入0.1、0.5、1.0、5.0、10.0μmol/L的XAV939,空白对照组正常培养。采用MTT法观察各组细胞增殖情况,细胞划痕试验观察细胞24 h内的迁移能力,RT-PCR法检测细胞中WNT通路转录因子β-catenin mRNA表达,免疫荧光法对细胞β-catenin表达进行定位。结果 124、48 h时XAV939组不同浓度的细胞增殖抑制率均较空白对照组升高(P均<0.05);同一时间点XAV939组不同浓度的细胞增殖抑制率比较有统计学差异,随XAV939浓度增加,细胞增殖抑制率增加(P<0.05)。224 h时,XAV939组不同浓度的细胞划痕宽度均大于空白对照组(P均<0.05)。3XAV939组不同浓度β-catenin mRNA表达均较空白对照组减少(P均<0.05)。4空白对照组及XAV939组0.1、1.0、10.0μmol/L的β-catenin荧光染色逐渐由细胞核和细胞质转移至细胞质和细胞膜。结论 XAV939可抑制肺腺癌A549细胞增殖和迁移,其作用机制可能与抑制WNT通路的异常激活相关。

阿托伐他汀对人胆管癌QBC939细胞系侵袭的影响

目的探讨阿托伐他汀(ATV)对人胆管癌QBC939细胞系侵袭的影响及其可能作用机制。方法应用细胞培养技术培养人胆管癌QBC939细胞,经不同浓度的ATV处理后,以Matrigel侵袭实验和半定量RT-PCR检测ATV对QBC939细胞内Rho C mRNA表达的影响情况。结果 Matrigel侵袭实验显示,经10μmol/L、25μmol/L、50μmol/L干预48 h后的QBC939细胞,随着浓度的增加,其体外侵袭能力明显减弱(P<0.01);半定量RT-PCR测定显示,ATV作用48 h后,QBC939细胞中Rho C的表达改变并不明显。结论 ATV可减弱人胆管癌QBC939细胞体外侵袭能力。

原花青素对人胆管癌细胞QBC939抑制的体内外研究

目的研究原花青素(PC)体内外对人胆囊癌细胞的抑制作用。方法常规培养细胞,24 h后随机分为阳性对照组、空白对照组和PC组。MTT法检测PC对人胆囊癌细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;建立QBC939细胞裸鼠异种移植瘤模型。将荷瘤裸鼠随机分为5组:阴性对照组、5-Fu阳性对照组及PC 3个剂量组,每日腹腔注射给药,每隔3 d测肿瘤大小;12 d后,处死裸鼠,剥瘤称重并计算抑瘤率。结果 PC 3个剂量组显著抑制QBC939细胞增殖,且呈时间和剂量依赖性;将细胞周期阻滞在S期,并诱导QBC939细胞凋亡;PC可抑制QBC939细胞裸鼠异种移植瘤的生长。结论 PC体内外均可抑制SHG-44细胞生长,并诱导肿瘤细胞凋亡。

β-catenin特异性抑制剂XAV939对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞增殖抑制的实验研究

目的:通过短发夹RNA(shRNA)干扰β-catenin基因的表达及使用β-catenin特异性抑制剂XAV939作用于套细胞淋巴瘤(MCL)Jeko-1细胞株,了解特异性抑制β-catenin活性对Jeko-1细胞增殖及细胞凋亡的影响。方法:将构建β-catenin shRNA真核表达载体转染Jeko-1细胞,应用RT-PCR和Western blot的方法鉴定干扰效果,用不同浓度XAV939处理MCL细胞株Jeko-1;应用MTT法绘制细胞生长曲线,流式细胞术分析细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、Cyclin D1、C-MYC、caspase-3表达水平的变化。结果:shRNA转染48 h后,RTPCR、Western blot检测发现,Jeko-1细胞的β-catenin的mRNA、蛋白表达下降;无论使用shRNA或抑制剂处理,均可抑制Jeko-1细胞增殖,促进其凋亡;Western blot检测显示,凋亡相关蛋白BCL-2、Cyclin D1、C-MYC的表达下降,而BAX、caspase-3表达上升。结论:特异性抑制β-catenin活性能有效地抑制Jeko-1细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。

Src激酶特异性抑制剂PP2对人胆管癌QBC939细胞侵袭能力的影响和机制研究

目的探讨Src激酶特异性抑制剂PP2对人胆管癌QBC939细胞侵袭能力的影响和机制。方法通过Western Blot技术检测PP2对人胆管癌QBC939细胞中Src激酶活化的影响;用Transwell小室法观察PP2对QBC939细胞的影响;用RT-PCR和Western Blot技术检测PP2对QBC939细胞侵袭能力相关分子的作用。结果 PP2组中p-Src蛋白的表达水平明显低于对照组;PP2组QBC939细胞的体外侵袭能力较对照组显著降低;与对照组相比,PP2组E-cadherin的表达显著增强,CD44的表达则明显减弱。结论 PP2能通过抑制Src激酶的活化,增强QBC939细胞侵袭抑制分子E-cadherin、减弱促侵袭分子CD44的表达,进而抑制人胆管癌QBC939细胞的侵袭能力。

顺铂与XAV939联合应用对人肺癌细胞A549增殖、迁移能力的影响及机制

目的观察顺铂联合端锚聚合酶抑制剂XAV939对人肺癌细胞增殖和迁移能力的影响,并探讨其机制。方法将体外培养的人肺癌A549细胞分为空白对照组、顺铂组、XAV939组、顺铂+XAV939组,分别用1μmol/L Na Cl、0.002 g/L顺铂、1μmol/L XAV939、0.002 g/L顺铂+1μmol/L XAV939培养。用MTT法观察各组细胞增殖情况并计算细胞增殖抑制率;用细胞划痕实验和Transwell小室实验观察各组细胞迁移能力;用Western blotting法检测各组细胞中的WNT通路转录因子端锚聚合酶、β-连接素蛋白。结果与对照组相比,顺铂组、XAV939组、顺铂+XAV939组细胞增殖抑制率高(P均<0.05),细胞迁移距离短(P均<0.05),穿膜细胞数少(P均<0.05),细胞中端锚聚合酶、β-连接素蛋白相对表达量低(P均<0.05);与顺铂组和XAV939组相比,顺铂+XAV939组细胞增殖抑制率高(P均<0.05),细胞迁移距离短(P均<0.05),穿膜细胞数少(P均<0.05),细胞中端锚聚合酶、β-连接素蛋白相对表达量低(P均<0.05)。结论顺铂联合XAV939可以抑制人肺癌A549的增殖和迁移,且效果强于单用XAV939或顺铂。这可能与二者抑制WNT通路转录因子端锚聚合酶、β-连接素蛋白表达有关。