启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤和补气运脾汤对hEGF刺激的人食管癌EC9706细胞生长信号转导的调节

目的:探讨食管癌中医证方启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤和补气运脾汤对hEGF刺激的人食管癌EC9706细胞生长的影响,进而研究该证方抑制食管癌细胞生长信号转导的机制.方法:体外正常条件培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞,无血清饥饿细胞24h,用200ng/mLhEGF刺激细胞45min后,加入启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤和补气运脾汤,通过镜下形态观察、MTT染色、流式细胞技术观察细胞增殖变化情况.取抑制EGF刺激EC9706细胞增殖IC50所用的各方药物浓度处理细胞,用Westernblot方法检测细胞内PLC-γ1和PI3K介导的生长信号通路的蛋白表达和酪氨酸磷酸水平.结果:启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤抑制细胞增殖的IC50值分别为849、1004和1615mg/L,以此浓度干预细胞,可明显抑制细胞生长,阻止细胞进入S期,补气运脾汤对此细胞株无明显抑制作用.在两个生长信号通路中,3方可不同程度地抑制EGFR和PLC-γ1蛋白表达和酪氨酸磷酸化,以及PKCα、MARCKS、PI3K、AKT-1和NF-κBp50蛋白的表达,其中,在PLC-γ1通路中,抑制作用强弱依次是:通幽汤>启膈散>沙参麦冬汤;在PI3K通路中,作用强弱依次是:通幽汤>沙参麦冬汤>启膈散.结论:启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤可不同程度地抑制hEGF刺激的EC9706细胞生长.抑制PLC-γ1和PI3K介导的生长信号转导是其抑制EC9706细胞生长的重要机制.

噎膈证方对人表皮生长因子刺激的食管癌EC9706细胞生长信号转导的影响

目的:研究噎膈病辨证施方在不同浓度下对食管癌细胞生长的影响;从生长信号转导角度探讨启膈散等对人表皮生长因子(hEGF)刺激的食管癌EC9706细胞生长抑制机理。方法:体外培养人表皮生长因子(hEGF)刺激的EC9706食管鳞癌细胞株,分别加入启膈散等4方提取液,通过MTT染色、流式细胞技术等观察细胞增殖变化;以western blot法检测PLC-γ1介导的生长信号通路蛋白表达。结果:启膈散(Q)、沙参麦冬汤(S)、通幽汤(T)IC50值分别为849,1004,1 615μg.mL-1;可抑制PLC-γ1信号通路相关蛋白表达,抑制作用强度:T>Q>S;结论:除补气运脾汤外,噎膈证方可抑制hEGF刺激的EC9706细胞的生长;启膈散等3方可通过抑制PLC-γ1介导的生长信号转导而抑制EC9706细胞生长。

中药复方抗食管癌研究进展

食管癌是恶性程度高、侵袭能力强、预后较差的一类上消化道恶性肿瘤,属中医学“噎膈”范畴。中药复方在抗肿瘤方面具有显著优势。通过查阅国内外相关文献,获知构成食管癌(噎膈)的证素包括气滞、痰、气虚、血瘀、阴虚等,中医临床辨证多分为痰气交阻、气阴两虚、津亏热结、气虚痰湿、痰热互结、痰瘀互结、热毒瘀结、正虚毒蕴等,大半夏汤、启膈散、旋覆代赭汤、六君子汤、沙参麦冬汤、通幽汤等为临床常用方剂,其中启膈散、六君子汤、通幽汤等经体内外实验研究已证明可通过直接抑制肿瘤细胞增殖、或促进凋亡、影响肿瘤微环境、调节细胞能量代谢、抑制血管生成等机制发挥抗食管癌作用,且中药复方通过靶向非编码单链RNA分子(microRNA)发挥抗食管癌作用的研究越来越多,发现临床收效良好的复方大半夏汤、参赭培气汤、小陷胸汤、人参半夏汤、六神丸等尚无深入的机制研究,古籍所载的吴茱萸汤、通关散等复方却于现代少有应用。因此,该文将中医经典古籍中专药专方、现代临床常用复方及实验研究进行梳理,以期推广中药复方抗食管癌的治疗方法,发挥中西医结合治疗的协同优势。