mTOR信号通路在DDC诱导的胆管损伤中的作用

目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在3,5-二乙氧基羰基-1,4-氢-尿嘧啶(DDC)诱导的胆管损伤中的作用。方法24只雌性C57BL/6J小鼠随机分为N-甲基呲咯烷酮(NMP)组、mTOR抑制剂(Torin1)处理组(Torin1组)、NMP+DDC组、Torin1+DDC组,每组6只小鼠。DDC组给予3 w 0.1%DDC饲料喂养,4组小鼠均在造模第1天通过腹腔注射的方式给予NMP或Torin1处理,每2 d注射1次,连续3 w。血清学检测肝功能变化情况;苏木素-伊红(HE)和Masson染色检测胆管增生、炎性细胞浸润及肝脏纤维化程度;免疫组织化学法检测肝脏(Ki67)和细胞角蛋白(CK19)的表达;qRT-PCR检测肝组织炎症相关基因白细胞介素(IL)-6、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、IL-10、精氨酸(Arg)1的表达;Western印迹检测mTOR信号通路活化表达情况。结果与NMP组和Torin1组相比,NMP+DDC组血清谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)均明显升高,肝脏炎症细胞浸润、胆管增生及肝纤维化病变严重,IL-6、MCP-1和Arg1 mRNA表达明显升高,IL-10明显下降。而Torin1处理后,IL-6和MCP-1 mRNA表达明显下调,IL-10和Arg1 mRNA的表达明显升高。Western印迹检测结果显示NMP+DDC组p-mTOR、p-蛋白激酶B(Akt)、p-p65的表达相比于NMP组和Torin1组明显升高,而注射Torin1则抑制该信号通路的活化。结论mTOR/AKT/核因子(NF)-κB信号通路参与DDC诱导小鼠胆管损伤的发生发展,抑制该信号通路可以减轻肝胆管的损伤。