山香圆总黄酮对慢性咽炎模型大鼠NF-κB、IκBα表达的影响

以2.5%氨水喷咽部建立大鼠慢性咽炎模型,用HE染色法观察咽部病理形态学改变,用ELISA法检测血清炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6,用RT-qPCR测定咽部组织NF-κBp65mRNA的表达,用Western blot检测咽部组织NF-κBp65和IκBα蛋白的表达,探讨山香圆总黄酮对慢性咽炎模型大鼠NF-κB、IκBα表达的影响.结果显示:山香圆总黄酮能明显改善模型大鼠咽部病理形态学;与模型组比较,山香圆总黄酮各组能不同程度地下调TNF-α、IL-1β、IL-6和NF-κBp65的表达并上调IκBα的表达,其中高剂量组最显著.这表明山香圆总黄酮能通过抑制NF-κB的表达和IκBα的解离下调炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,从而减轻炎症,发挥抗慢性咽炎作用.

山香圆总黄酮提取工艺的研究

目的优化山香圆总黄酮提取工艺。方法采用乙醇回流浸提法,在单因素分析的基础上,通过L16(45)正交试验,优选出山香圆总黄酮的提取工艺。结果山香圆总黄酮的最佳提取工艺为:提取温度60℃、时间1.5 h、乙醇体积分数90%、料液比1:50、提取次数4次。结论该法适用于山香圆总黄酮的提取制备。

藤梨根总黄酮提取方法及含量测定研究

目的筛选藤梨根中总黄酮的提取方法,为进一步研究总黄酮的最佳提取工艺,充分利用和开发藤梨根资源提供科学依据。方法以芦丁为对照品,用分光光度法测定不同方法提取的藤梨根中总黄酮的含量。结果甲醇索氏提取法所得的总黄酮的含量较高,以芦丁计为7.93%。结论与甲醇回流提取法和甲醇超声提取法比较,甲醇索氏提取法所得提取物的总黄酮含量最高。

分光光度法测定山香圆片中黄酮的含量

采用不同溶剂经超声、微波、热回流三种方法提取山香圆片,以芦丁为对照品,用分光光度法测定总黄酮含量.结果表明:以70%乙醇作溶剂,回流3h的条件下,黄酮的提取量最高.

表面活性剂-超声协同提取山香圆叶总黄酮工艺的优化

目的优化表面活性剂-超声协同提取山香圆Turpinia arguta Seem.叶总黄酮工艺。方法在单因素试验基础上,以十二烷基硫酸钠(SDS)用量、液料比、乙醇体积分数为影响因素,总黄酮提取率为评价指标,Box-Behnken设计优化提取工艺。结果最佳条件为十二烷基硫酸钠用量0.64%,液料比25∶1,乙醇体积分数50%,超声温度60℃,超声时间40 min,总黄酮提取率为3.48%。结论该方法简单、节能、省时,可用于山香圆叶总黄酮的提取。

山香圆叶提取液纯化工艺的优化

目的优化山香圆Turpinia arguta(Lindl.)Seem.叶提取液纯化工艺。方法以总黄酮、女贞苷、野漆树苷的吸附率和解吸率为评价指标,上样液和洗脱剂(乙醇)的质量浓度(或体积分数)、体积流量、用量为影响因素,静态吸附试验筛选大孔吸附树脂,并结合动态吸附优化工艺。结果最佳条件为HPD300大孔吸附树脂,上样液质量浓度0.2 g/mL,体积流量1 mL/min,上样量30 mL,2 BV去离子水洗涤,6 BV 50%乙醇以1 mL/min体积流量洗脱,总黄酮、女贞苷、野漆树苷含有量分别为53.95%、13.74%、4.07%。结论该方法简单准确,稳定可靠,可用于纯化山香圆叶提取液。

Box-Behnken响应面法优化藤梨根总黄酮超声提取工艺

目的:优化藤梨根总黄酮超声提取工艺。方法:超声提取药材,利用分光光度计法于510 nm波长处测定总黄酮含量,运用Design-Expert 8.0.6 Trial软件建立以总黄酮提取率作响应值,液料比、乙醇体积分数和提取时间为三因素的Box-Behnken响应面并进行多元二次回归分析。结果:最佳提取工艺条件为液料比12.45,乙醇体积分数78.09%,提取时间39.66 min,总黄酮的提取率为7.49%,与预测值7.58%偏差1.19%。结论:该工艺稳定可行,可用于藤梨根中总黄酮的工业化生产。

大孔树脂纯化山香圆叶中的总黄酮

目的研究大孔树脂纯化山香圆叶中总黄酮的工艺条件。方法采用静态吸附法筛选6种大孔树脂,再用动态吸附法优化山香圆叶中总黄酮的纯化工艺。结果山香圆叶中总黄酮的最佳纯化工艺为:上样浓度为0.1 g·m L-1(以生药计),上样速率为2 BV·h-1,上样体积为2 BV,用2 BV去离子水洗脱、5 BV 50%乙醇以2 BV·h-1的速率洗脱;在此工艺下,总黄酮的转移率为60.48%,产物中总黄酮的纯度为41.11%。结论 HPD400型大孔树脂对山香圆叶中总黄酮有良好的纯化效果。

山香圆总黄酮对LPS诱导的RAW264.7细胞iNOS,COX-2,NF-кB表达的影响

目的观察山香圆总黄酮对LPS诱导的RAW264.7细胞中iNOS、COX-2及NF-кB表达的抑制作用。方法采用Griess法检测山香圆总黄酮对NO生成的影响,通过westernblot分析i NOS、COX-2及NF-кB的表达。结果山香圆总黄酮能显著抑制RAW264.7细胞中NO的生成以及iNOS、COX-2及NF-кB蛋白的表达,且随着浓度的增加,抑制效果明显。结论山香圆总黄酮的抗炎作用是通过下调NF-кB的活性进而抑制i NOS、COX-2的表达来实现的。

野生软枣猕猴桃总黄酮抑菌作用研究

利用试验室自制的野生软枣猕猴桃总黄酮,进行抑菌作用研究。结果表明,野生软枣猕猴桃总黄酮对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、根霉、米曲霉、热带假丝酵母、啤酒酵母均有抑制作用,且作用相当。随着总黄酮浓度的增大,抑制作用增强,最小抑制浓度在25～50 mg/mL之间;对黑曲霉无抑制作用。温度和pH对野生软枣猕猴桃总黄酮的抑菌效果也有一定影响,温度越高,抑菌效果越明显,偏酸性的pH更有利于抑菌,在pH5~6范围内,野生软枣猕猴桃总黄酮抑菌效果较好。

山香圆总黄酮对LPS诱导的RAW264.7细胞MAPK信号通路的影响

目的观察山香圆总黄酮对脂多糖诱导的RAW264.7细胞MAPK信号通路的影响。方法采用脂多糖刺激RAW264.7细胞制备炎症模型;CCK-8法测定细胞活力;ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌量;westernblot法检测ERK1/2、JNK和p38蛋白的磷酸化水平。结果低于400μg/mL的山香圆总黄酮对RAW264.7细胞生长无影响;山香圆总黄酮各剂量组均能抑制p-ERK1/2、p-JNK、p-p38蛋白的表达以及TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,中、高剂量组呈显著性抑制(P<0.05,P<0.01)。结论山香圆总黄酮能通过抑制ERK1/2、JNK、p38磷酸化水平,降低TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,发挥抗炎作用。