金莲花黄酮类成分抗菌及抗氧化活性研究

目的比较研究金莲花总黄酮及其黄酮主成分荭草苷和牡荆苷的体外抗菌活性及抗氧化活性。方法体外抗菌活性试验采用管碟法对9个菌株(大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变异链球菌、链霉菌、红酵母、黑曲霉、白色念珠菌)进行体外抑菌圈测定;采用连续稀释法和活菌计数法测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);分别采用邻苯三酚法-超氧阴离子清除能力测定试验、水杨酸法-羟基自由基清除能力测定试验和DPPH清除能力试验评价3种样品的抗氧化活性差异。结果在体外抗菌活性试验中,金莲花总黄酮、荭草苷、牡荆苷对革兰阳性菌的抑菌效果明显,对革兰阴性菌和真菌无明显抑菌作用;3种药物对金黄色葡萄球菌表现出较好的抑菌活性,其抑菌作用强弱为荭草苷=总黄酮>牡荆苷,其中荭草苷和总黄酮的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为0.15625 mg·mL^(-1)和0.625 mg·mL^(-1);3种药物对变异链球菌也表现出较好的抑菌活性,其抑菌作用强弱为荭草苷>总黄酮>牡荆苷,其中荭草苷的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为0.15625 mg·mL^(-1)和0.625 mg·mL^(-1)。在抗氧化活性测定中,金莲花总黄酮对3种自由基均表现出较强的清除能力。结论金莲花总黄酮、荭草苷和牡荆苷对革兰阳性菌表现出明显的抑制作用,也表现出较好的抗氧化活性。荭草苷的杀菌效力及抗氧化活性整体上优于牡荆苷,可能是其清热解毒的主要成分。

金莲花黄酮微波辅助提取及其抗氧化性

采用单因素分析结合正交试验的方法,研究了金莲花黄酮微波辅助提取的工艺条件,以清除DPPH自由基法,对金莲花黄酮的抗氧化性进行了分析,并比较了金莲花黄酮、VC和BHT的抗氧化能力。实验结果表明:微波辅助提取金莲花黄酮的最佳工艺条件是体积分数60%乙醇为溶剂,每克料浸提剂体积为20 mL,微波功率600 W,温度60℃,提取时间2 min。在此工艺下,金莲花黄酮提取率为83.7%;金莲花黄酮能有效地清除DPPH自由基,具有较强的抗氧化能力,与VC和BHT相比,其抗氧化能力为VC>金莲花黄酮>BHT。另外,研究发现金莲花黄酮与VC和金莲花黄酮与BHT均具有一定的抗氧化协同效应。

AB-8大孔吸附树脂分离长瓣金莲花总黄酮

研究了AB-8大孔吸附树脂对金莲花总黄酮的吸附和解吸特性,并比较了AB-8树脂与聚酰胺对金莲花总黄酮的纯化能力.结果表明,经AB-8树脂纯化的总黄酮纯度为38 9%,比粗提物的总黄酮纯度提高了2 88倍;且其纯化能力与聚酰胺相当.

微波-表面活性剂协同提取金莲花黄酮的研究

考察了表面活性剂协同微波提取金莲花黄酮的工艺,筛选出了具有明显增效作用的表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS),最后通过正交实验优化了提取工艺.结果表明,最佳工艺条件为:以质量浓度0.75 g/L的表面活性剂SDS水溶液为提取剂,提取溶剂用量为40 mL/g金莲花,微波功率600 W,温度70℃,提取时间5 min.在该工艺条件下,金莲花黄酮的提取率为5.35%.与溶剂浸提法相比,提取时间显著缩短,金莲花黄酮的提取率提高约30%.

金莲花总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究金莲花总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MI/RI)的保护作用及机制。方法:50只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,阳性对照地奥心血康组,金莲花总黄酮高、低剂量组,每组10只,手术前1周,金莲花总黄酮组灌胃给予不同剂量药物[50、100 mg/(kg·d)],地奥心血康组按0.06 g/(kg·d)生药灌胃,其余2组给予等量生理盐水。结扎大鼠左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min制备MI/RI模型。观察缺血期及再灌注期心电图ST段的变化,测定血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、肌酸激酶(creatine kinas,CK)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)变化,TTC染色法测定心肌梗死面积;TUNEL法测定心肌细胞凋亡。结果:与对照组相比,金莲花总黄酮高剂量组能明显降低CK(945.2±94.6)、LDH(978.8±37.5)的释放和MDA(5.75±1.22)的产生,提高SOD(107.71±10.95)、GSH-Px(1.62±0.45)活性,降低心肌梗死面积(22.18±1.99),拮抗心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡(差异均有统计学意义P<0.01)。结论:金莲花总黄酮对大鼠MI/RI有保护作用,其作用机制可能是与清除氧自由基、抗脂质过氧化、抑制心肌细胞凋亡、减少心肌酶释放入血有关。

金莲花中总黄酮的提取

研究了以水和乙醇—水混合溶剂提取金莲花中总黄酮的工艺条件,探讨了提取温度、提取时间、料液比、提取次数对总黄酮得率的影响。结果表明,以水为溶剂最佳提取条件为:提取温度80℃、料液比1∶18、提取2次、每次2h,金莲花总黄酮得率为14.0%;以50%乙醇水溶液在其最佳工艺条件提取时,金莲花总黄酮得率为15.3%。

金莲花70％乙醇提取液中黄酮碳苷类成分的研究(Ⅰ)

目的:对金莲花70％乙醇提取物中的黄酮碳苷类成分进行分离和鉴定,为制定金莲花的品质评价标准提供科学数据。方法:用聚酰胺、硅胶、SephadexLH-20色谱柱连续分离和纯化,利用波谱技术对化合物进行结构鉴定。结果:分离得到3个黄酮碳普类化合物,经鉴定分别为荭草素-2″O-β-L-半乳糖苷(2″O-β-L- Galactopyranosyl orientin)、荭草苷(Orientin)和牡荆苷(Vitexin)。结论:首次证明了金莲花中含有荭草素-2″O-β-L -半乳糖苷,并采用聚酰胺-硅胶-SephadexLH-20连续色谱法对该化合物进行了富集。本研究所采用的分离、纯化黄酮碳苷类成分的方法简便、经济、分离效果好。从金莲花中提取黄酮碳苷类成分用70％乙醇为溶剂效果较佳。佥莲花中的抗菌、抗病毒成分主要是黄酮碳苷类化合物,所以,本研究对科学阐释金莲花药效物质基础和有效组分具有重要意义。

超声波辅助法提取金莲花中黄酮工艺研究

以超声波辅助法对大兴安岭金莲花中总黄酮的最佳提取工艺条件进行研究。以温度、料液比、乙醇体积分数、超声时间为提取影响因素,通过正交试验优化提取工艺。结果表明,各因素对总黄酮提取的影响次序为:料液比>超声时间>温度>乙醇体积分数,超声波辅助法的最佳工艺提取条件为:提取温度为50℃,料液比1:55,乙醇体积分数75%,超声时间40 min,总黄酮的提取率达4.659%。

金莲花注射剂精制新工艺研究

研究精制金莲花注射剂的最佳工艺条件.水提醇沉法和大孔吸附树脂吸附法联合应用对金莲花粗提物进行精制,紫外分光光度法测定混合物中总黄酮的含量,考察最佳精制工艺条件.该方法精制金莲花总黄酮的最佳工艺条件为金莲花提取物上样质量浓度40 mg/mL(按总黄酮计),总黄酮最大吸附量为32.5 mg/mL,洗脱流速为1.5 BV/h,洗脱剂为30%乙醇,所得的总黄酮纯度达到81.7%.该方法适合对金莲花注射剂的精制.

蒙药金莲花药理作用研究

目的观察金莲花总黄酮镇痛、解热、抗炎作用的效果。方法实验动物采用热板法与醋酸扭体法、家兔与大鼠致热法、耳廓渗出与棉球肉芽法测定金莲花总黄酮的镇痛、解热、抗炎效果。结果金莲花0.8,0.4,0.2 g/kg剂量组,在给药90 min,小鼠疼痛阈值提高47.6%,39.9%,14.2%,扭体抑制率为31.6%,28.5%,12.1%;对家兔解热作用可持续5 h,对大鼠解热作用可持续4 h,解热作用2 h后最明显;对小鼠耳壳炎性渗出抑制率为22.6%,29.7%,14.4%,对大鼠棉球肉芽肿抑制率为43.9%,24.6%,5.3%。结论金莲花总黄酮具有镇痛、解热、抗炎作用,作用强度呈量效关系。

正交试验法确定金莲花中总黄酮最佳提取工艺

目的研究金莲花提取工艺。方法采用正交试验法对金莲花中总黄酮进行提取,以出膏率和紫外分光光度法测定的总黄酮得率为指标,考察乙醇浓度(A)、回流时间(B、回流次数(C)、料液比(D)4个因素。检测波长为500 nm。结果优化的金莲花提取条件为A2B1C3D2。结论采用65%乙醇,料液比为1∶10,回流3次,每次2小时为最佳工艺,其中回流次数为显著性因素。黄酮最高含量为15.74%,最高出膏率为45.72%。

金莲花总生物碱分离及其活性研究

以金莲花为试材,使用响应面法优化总生物碱提取分离工艺,并分析测定金莲花总生物碱抗氧化和抑菌活性,以期为金莲花的深入开发和综合利用提供参考依据。结果表明:最佳提取分离工艺为90%乙醇,液料比39∶1 mL·g^(-1),超声功率400 W,超声32 min,总生物碱得率为0.844 mg·g^(-1);对DPPH、ABTS自由基及超氧阴离子清除率的IC50(半抑制浓度)值分别为0.016、0.036、4.404 mg·mL^(-1);对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC值分别为1.990 mg·mL^(-1)和1.330 mg·mL^(-1)。该研究初步证实金莲花富含生物碱类物质,且具有较强的抗氧化和抑菌活性。

不同采收期金莲花茎叶中总黄酮和荭草苷的动态变化研究

目的研究不同采收期金莲花茎叶中总黄酮和荭草苷量的变化规律,为合理开发利用金莲花药用资源提供实验依据。方法采用UV法和HPLC法,分别以芦丁和荭草苷为对照品,测定不同采收期金莲花茎叶中总黄酮和荭草苷量,并绘制动态曲线。结果从5月下旬至6月下旬,总黄酮量呈现不断升高的趋势,从4.597%上升到5.125%;从7月上旬至8月中旬,总黄酮量持续下降,从4.264%下降至1.181%。而荭草苷量从5月下旬至7月中旬一直呈上升趋势(0.095～0.332 mg/g);从7月下旬至8月中旬,呈下降趋势(0.306～0.092 mg/g)。结论结合花的产量,并综合总黄酮和荭草苷量的动态变化,采收期以7月上旬至中旬为佳。本实验方法稳定、可行,结果可靠,为合理采收金莲花茎叶提供了理论依据。

金莲花总黄酮抗炎作用研究

目的:观察金莲花总黄酮(TFTL)的抗炎作用,为其临床应用提供实验依据。方法:以阿司匹林(Asp)及金莲花片(JLHT)为阳性对照药,采用大鼠皮内色素渗出法、大鼠足跖肿实验、大鼠棉球肉芽肿法评价0.1,0.2,0.4 g.kg-1TFTL的抗炎活性。结果:TFTL 0.2,0.4 g.kg-1剂量组大鼠皮内蓝斑面积、蓝斑内色素含量(吸光度),足肿胀度和肉芽肿质量均明显低于空白对照组(P<0.05,P<0.01,);TFTL 0.4 g.kg-1剂量组大鼠蓝斑内色素含量(吸光度),足肿胀度和肉芽肿质量均明显低于JLHT 2.4 g.kg-1对照组(P<0.05);TFTL 0.4 g.kg-1组足跖肿胀度低于Asp组,差异有统计学意义(P<0.05);TFTL对足跖肿胀度的抑制作用持续时间为5～6 h,Asp持续时间为3 h。结论:TFTL对大鼠急慢性炎症模型均有明显的抑制作用,其作用优于金莲花片,持续时间长于阿司匹林。

外翻肠囊法研究金莲花总黄酮的吸收特征

目的研究金莲花总黄酮的吸收特征,为确定金莲花的主要药效物质和进一步开发利用提供依据。方法建立外翻肠囊模型,浴槽中给予Tyrode液配置的质量浓度分别为2、6、10 mg/m L的金莲花总黄酮溶液,分别在给药后15、30、45、60、90、120、150、180 min从肠囊内取样100μL,补以相同体积的空白Tyrode液,样品经处理后作为供试品溶液;以荭草素为对照品,应用酶标仪测定供试品在341 nm下的吸光度(A)值,计算总黄酮含量、单位面积累积吸收量(QS)和药物吸收率(V)。结果浴槽中给予低、中、高浓度的总黄酮溶液后,随着时间的延长,肠囊内V逐渐增加,但均较小,最大吸收率分别为8.74%、8.15%、8.77%,组间无统计学差异;在0~180 min内,低、中、高浓度QS持续增加,最大值分别为32.00、63.49、115.29μg/cm2,45~180 min高浓度组显著大于低浓度组(P<0.01)。结论金莲花中的总黄酮不易被机体吸收,其吸收特征与其单体化合物一致。