龙须藤的化学成分研究

本文旨在研究龙须藤Bauhinia championii(Benth.)Benth藤的化学成分。本实验运用硅胶、聚酰胺、SephadexLH-20等柱色谱手段进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定其结构。分离得到7个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇、胡萝卜苷、正三十烷、正六十烷、槲皮素、杨梅素和oblongixanthone A。其中化合物oblongixanthone A为首次从该植物中分离得到。

龙须藤提取物的镇痛抗炎作用

目的研究龙须藤乙醇提取物的镇痛抗炎作用,筛选出龙须藤镇痛抗炎作用的有效部位。方法采用热板法和冰乙酸扭体法观察镇痛作用,采用二甲苯致小鼠耳郭肿胀法观察抗炎作用。结果龙须藤醇提物具有较好的镇痛抗炎作用;龙须藤醇提物的乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物具有显著的镇痛作用,并能较好抑制炎症的组织液渗出。结论龙须藤醇提物的乙酸乙酯部位和正丁醇部位可能是龙须藤镇痛抗炎作用的有效部位。

密花香薷总黄酮体外抗氧化及抗肿瘤活性研究

通过超声波法提取、D101大孔吸附树脂纯化密花香薷总黄酮,体外抗氧化试验和MTT(四甲基偶氮唑盐)法评价其抗氧化和抗肿瘤活性。结果表明,总黄酮对羟自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O_2^-·)均具有清除能力,其中对O_2^-·的清除能力优于VC;MTT实验结果显示总黄酮对4株细胞均有不同程度的抑制效应,并呈现时间和剂量依赖性(P<0.05)。其中对人宫颈癌Hela细胞48 h抑制效应最明显,IC50值为0.5 mg/m L;形态观察显示,在总黄酮作用下,SMMC-7721和Hela细胞逐渐变圆,粘附性降低,细胞表面皱缩,产生细胞碎片,显示出明显的细胞毒性,AO/EB染色观察发现随着总黄酮处理浓度的增加,凋亡细胞的数量也在逐渐增加。本研究结果表明密花香薷总黄酮具有很好的抗氧化活性,可作为一种天然抗氧化剂,且总黄酮对肿瘤细胞生长有一定的抑制效应,可作为抗肿瘤药物进一步研究。

龙须藤化学成分及其抗类风湿性关节炎活性研究

目的:研究龙须藤的化学成分及其对滑膜细胞的抑制作用。方法:运用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等方法,对龙须藤乙酸乙酯部位化学成分进行分离纯化,利用现代波谱学技术鉴定化合物结构,采用MTT法对分离得到的单体化合物进行体外抑制滑膜细胞增殖的活性筛选。结果:从龙须藤乙酸乙酯部位分离得到9个化合物,分别鉴定为:豆甾醇-4-烯-3-酮(1)、β-谷甾醇棕榈酸酯(2)、1-(2,4-二羟基苯基)-3-(3,4-二羟基苯基)-3-羟丙基-1-酮(3)、7-羟基香豆素(4)、没食子酸(5)、松柏醛(6)、1-(3,4-二甲氧基苯基)-1-丙醇(7)、丁香酸(8)、没食子酸乙酯(9)。结论:其中,化合物1～4、6、7、9为首次从龙须藤中分离得到,化合物1、3、6、7、9为首次从该属植物中分离得到。MTT法结果显示化合物1～9均对滑膜细胞具有一定的抑制作用,其中化合物5抑制作用最强。

基于响应曲面法的龙须藤多糖提取条件优化

采用响应曲面法分析与确定龙须藤多糖提取工艺,通过单因素实验确定影响多糖提取的主要影响因素,然后在单因素实验的基础上,采用响应曲面法分析提取因素对龙须藤多糖含量的影响,得出龙须藤多糖提取的最优条件为:提取温度100℃、提取时间4 h、料液比1∶23、提取次数为2次。在此条件下龙须藤多糖提取率理论值为3.12%,实测值为2.98%。

紫外—可见分光光度法测定枫蓼水煎液中总黄酮含量

本试验旨在建立测定枫蓼水煎液中总黄酮含量的紫外-可见分光光度法。以芦丁为对照品，用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠为显色体系，采用紫外可见分光光度法于510nm波长处测定其吸光度。结果表明总黄酮浓度在0．008～0．048mg／mL范围内，芦丁浓度与吸光度的线性关系良好。总黄酮加样平均回收率为100．97％，RSD=1．66％。本试验结果表明所用的方法简便、准确，可用于牛耳枫、辣蓼药材的半成品及成品中总黄酮含量的检测。

聚酰胺柱层析--紫外分光光度法测定广藿香叶总黄酮的含量

目的：采用柱层析——分光光度法测定6批广藿香叶中总黄酮的含量。方法：以芦丁作参照物，在室温25℃下，510nm处测定广藿香叶中总黄酮的吸光度。结果：该方法在线性10．1～50．5μg／mL范围内，r=0．9996，平均回收率为97．2％～98．3％；RSD≤2．0％。结论：该方法测定广藿香叶中总黄酮，方法简便，灵敏度和准确度高。

大孔吸附树脂分离纯化龙须藤总黄酮的工艺研究

目的研究AB-8大孔树脂分离纯化龙须藤黄酮的工艺条件。方法通过静态吸附-解吸附实验筛选最佳大孔树脂,并以总黄酮含量为考核指标,采用L9(34)正交试验法对影响AB-8大孔树脂分离纯化龙须藤黄酮的因素进行考察,确定最佳工艺条件。结果最佳工艺条件为:采用AB-8型大孔树脂,取龙须藤黄酮提取液(含生药0.5 g/mL)上样,树脂用量为4倍生药量,洗脱剂采用体积分数50%乙醇,用量为16倍生药量。结论该工艺条件科学合理,可有效地用于龙须藤黄酮的分离富集。

龙须藤中黄酮类化合物提取条件的研究

目的探讨龙须藤中以芦丁为指标的总黄酮最佳提取条件。方法正交试验法对龙须藤中黄酮类化合物的提取工艺进行优选,以提取时间、乙醇浓度、提取次数、料液比为因素,以总黄酮得率为指标进行试验。结果最佳提取工艺条件:60%(体积分数)乙醇溶液,提取时间3 h,提取次数3次,乙醇用量10倍,提取率为7.426%。结论本实验结果可靠,方法简便,适合于该药材的批量提取。

湘葛一号总黄酮与气候因子的灰色关联度分析

目的运用灰色关联法筛选出影响湘葛一号总黄酮含量的气候主导因子。方法利用紫外分光光度法测定不同采收期湘葛一号不同部位总黄酮含量,采用灰色关联法对其与气候因子的相关性进行分析。结果湘葛一号不同部位、不同采收期总黄酮含量有较大区别。月平均气温、月极端最高气温、月极端最低气温、月平均相对湿度、月降水量、日照时数6个气候因子与湘葛一号根、茎、叶中总黄酮含量关系密切,灰色关联系数均达到0.50以上。其中月平均相对湿度、月极端最高气温和日照时数与根、茎、叶的灰色关联系数达到0.75以上。结论月平均相对湿度、月极端最高气温和日照时数是影响湘葛一号不同部位总黄酮含量的主导因素,实验结果可为湘葛一号的规范化种植提供科学依据。

南京紫金山4种蕨类植物不同部位总黄酮含量比较

蕨类植物现存约12000种，以热带、亚热带地区分布最广。中国有蕨类植物61科223属约2600种，其中可供药用的有300余种，以华南及西南地区分布较多。据报道，药用蕨类植物具有舒筋活血、除湿镇痛、清热滑肠、止咳化痰、利尿安神、止血、驱虫、解毒、抗菌、抗癌和抗HIV等功效，其化学成分主要包含酚类、黄酮类、生物碱类、甾体及三萜类等化合物，其中黄酮类化合物是蕨类植物中广泛存在的一类成分，具有一定的分类学意义，且多具有松弛血管痉挛、抗心肌缺血、降血脂、抗肿瘤、抑菌和保肝等生理活性。

反向分子对接法预测龙须藤两种多甲氧基黄酮的分子靶标

目的预测龙须藤两种多甲氧基黄酮5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮(PMFA)及5,6,7,5'-四甲氧基-3',4'-亚甲二氧基黄酮(TMFA)的分子靶标。方法采用反向分子对接法,对这两种成分进行分析。结果 PMFA和TMFA可能在抗癌、抗类风湿性关节炎及抗心血管疾病等方面发挥作用,并通过防止CTSK与DHODH靶点作用于Toll样受体、破骨细胞分化与嘧啶代谢等途径治疗类风湿性关节炎。结论该方法可为龙须藤及两种多甲氧基黄酮的药效学及分子作用机制实验提供参考。

密花香薷中总黄酮的含量测定及提取工艺

通过分光光度法测定不同地区密花香薷中总黄酮的含量,采用正交试验优化提取密花香薷中总黄酮的提取工艺。结果表明,密花香薷中总黄酮的最佳提取工艺为于80℃,加入30倍量60%乙醇回流提取2 h;密花香薷中总黄酮提取含量为13.72%。总黄酮正交提取工艺结果可靠,含量测定方法简便准确,适合于工业化生产。

九龙藤中黄酮类化合物的研究

从豆科植物九龙藤(Bauhinia championii Benth)的乙醇提取物中分离出7个已知黄酮类化合物,经过核磁共振谱(NMR)和质谱(MS)分析及标准品对照,鉴定了它们的结构,分别为:5,6,7,5′-四甲氧基-3′,4′-亚甲二氧基黄酮(1),5,6,7,3′,4′,5′-六甲氧基黄酮(2),5,7,3′,4′,5′-五甲氧基黄酮(3),5,6,7,3′,4′-五甲氧基黄酮(甜橙素)(4),5,7,4′-三甲氧基黄酮(5),5,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(6),(-)-表阿夫儿茶素(7).其中化合物5,7为首次从该植物中分离得到.

不同产地猴耳环总黄酮含量比较研究

目的:测定不同产地猴耳环药材中的总黄酮含量。方法:以芦丁为对照品,三氯化铝(AlCl_3)比色,采用紫外可见分光光度法(UV)测定样品总黄酮含量,检测波长406 nm。结果:总黄酮在5.09~50.90μg·mL^(-1)线性关系良好,回归方程为Y=0.026 7X+0.007 2,r=0.999 1;平均加样回收率为101.23%,RSD=1.93%(n=6)。结论:AlCl_3比色法准确、简便,具有良好的重复性和稳定性,可用于猴耳环药材中总黄酮的含量测定;不同产地猴耳环中总黄酮的含量存在一定的差异。

星点设计-效应面法优化龙须藤总黄酮分散片的处方

目的优选龙须藤总黄酮分散片的处方。方法以乳糖(Lactose)、微晶纤维素(MCC)、羧甲基淀粉钠(CMS-Na)的用量为考察因素,以崩解时限和分散均匀性为评价指标,采用星点设计-效应面法优选龙须藤总黄酮分散片的处方。结果最优处方为龙须藤总黄酮6.6%,乳糖18.4%,MCC 64.0%,CMS-Na 10.0%,滑石粉1%。结论按最优处方所制备的龙须藤总黄酮分散片崩解快,分散均匀,有效成分溶出速率快,该处方可用于龙须藤总黄酮分散片的质量控制。

狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮对H2O2致LO2细胞损伤的保护作用

目的:探讨狭基线纹香茶菜水溶性总黄酮(WSTF)对氧化应激损伤LO_2细胞的保护作用。方法:通过细胞毒性实验确定给药范围,建立过氧化氢(H2O_2)致LO_2细胞损伤模型,用含不同浓度WSTF的培养液与急性损伤肝细胞共孵育不同时间,采用MTT比色法测定细胞活力,检测谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙二醛(MDA)的水平,评价WSTF对肝细胞损伤的保护作用。检测细胞线粒体膜电位和细胞内活性氧簇(ROS)水平,分析WSTF抑制H2O_2诱导LO_2细胞凋亡情况。结果:0.3 mmol·L^(-1)H2O_2处理LO_2细胞4 h构建H2O_2损伤LO_2细胞模型,确定0.031 2~0.125 mg·ml^(-1)WSTF为保护LO_2细胞损伤的给药浓度范围。WSTF可抑制H2O_2对肝细胞的损伤,并明显降低H2O_2致急性损伤肝细胞的ALT、AST释放量和MDA水平,逆转H2O_2诱导LO_2肝细胞线粒体膜电位去极化和细胞内ROS升高。结论:WSTF体外给药对肝细胞损伤有保护作用。

3种闽产中药体外对大鼠血小板聚集的影响

为观察闽产巴戟天、养心草、龙须藤85%乙醇提取物对体外ADP诱导的SD大鼠血小板聚集的影响,采用大鼠血小板加中药孵育,比浊法测定血小板聚集率。结果:巴戟天、养心草、龙须藤均具有抗血小板聚集作用,其中巴戟天、养心草、龙须藤的85%乙醇提取物在体外具有抗血小板聚集作用,巴戟天、养心草优于阿司匹林;龙须藤与阿司匹林相当。

纤维素酶-乙醇协同提取龙须藤总黄酮的工艺研究

目的考察用纤维素酶-乙醇协同提取龙须藤总黄酮的最佳提取工艺条件。方法在单因素分析的基础上进行Box-Behnken效应面优化,以龙须藤总黄酮提取率为指标,并采用Design expert 7.0.0软件对数据进行分析。结果纤维素酶-乙醇协同提取龙须藤总黄酮的最佳工艺条件为:每1 g药材酶用量9.13 mg、酶解时间2.06 h、酶解温度51.03℃。在优化条件下,提取率平均值为19.24%(RSD为1.68%),与预测值19.02%接近。结论纤维素酶-乙醇协同提取龙须藤总黄酮可获得较高的提取率。

龙须藤提取物对胶原诱导性关节炎模型大鼠的影响

目的研究龙须藤乙酸乙酯提取物对胶原诱导性关节炎模型大鼠滑膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的影响,探讨其作用机理。方法建立胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,观察大鼠足趾肿胀度的变化,用免疫组化法检测大鼠踝关节滑膜组织中TNF-α、IL-6、IL-8的含量。结果龙须藤乙酸乙酯提取物能抑制大鼠足趾肿胀及滑膜组织中TNF-α、IL-6及IL-8的表达。结论龙须藤乙酸乙酯提取物对类风湿性关节炎有一定的治疗作用,其作用机理是降低滑膜组织中TNF-α、IL-6、IL-8的表达水平。