白芍总苷药理活性及临床免疫应用研究进展

白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根,广泛用于各种现代中成药产品和传统中药制剂。白芍总苷是白芍的提取物中的重要药效部位,有广泛的药理作用,包括镇痛、抗炎、抗氧化、抗癌、肝脏保护、心血管保护、抗抑郁、免疫调节等,主要表现在调节体内相关受体表达、信号通路转导等方面,临床用于免疫性疾病,疗效显著。本文综述了近年关于白芍总苷的药理作用及临床免疫应用研究,以期为白芍总苷后续的研究和产品开发提供参考。

白芍总苷调控AMPK/RANKL/OPG轴治疗CIA模型大鼠骨破坏的作用研究

目的:探讨白芍总苷调控AMPK/RANKL/OPG轴治疗CIA大鼠骨破坏的作用研究。方法:60只造模成功的雌性Wistar大鼠随机分为模型组、AICAR组、来氟米特组及白芍总苷高、中、低剂量组,每组10只,另选取10只健康雌性Wistar大鼠作为正常对照组。监测大鼠体质量及足趾肿胀度变化,HE染色观察大鼠膝关节滑膜组织病理学变化,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1α、IL-6、IL-10水平;RT-PCR和Western Blot检测滑膜组织AMPK、OPG、RANKL、TRAP mRNA和(或)蛋白表达,彩色B超及小动物断层扫描(Micro-CT)观察大鼠关节软骨及软骨下骨质破坏情况。结果:与模型组比较,白芍总苷可有效缓解关节肿胀,呈剂量依赖性降低CIA模型大鼠血清中TNF-α、IL-1α、IL-6水平及滑膜RANKL、TRAP mRNA及蛋白表达,升高滑膜OPG、p-AMPK mRNA和(或)蛋白表达(P<0.05~P<0.001),中剂量的作用与AICAR相当。来氟米特提高AMPK信号相关mRNA表达的作用不明显。结论:白芍总苷可一定程度上改善CIA大鼠关节破坏,其可能是通过调控AMPK/RANKL/OPG信号通路来发挥RA的骨保护作用。

赤芍总苷对大鼠血小板功能的影响

为了研究赤芍总苷对血小板聚集功能的影响,采用比浊法观察赤芍总苷对大鼠血小板聚集功能的作用,用放射免疫法观察对大鼠TXB2/6-keto-PGF1α、ET水平的作用,并用硝酸还原酶法测定大鼠血清中NO的浓度。结果发现,赤芍总苷能降低ADP诱导的血小板最大聚集强度,降低大鼠血浆中TXB2的浓度,同时升高血浆中6-keto-PGF1α的水平,调节大鼠血清NO/ET的平衡。实验证明,赤芍总苷有明显降低大鼠血小板聚集的作用。

黄芪总皂苷和赤芍总苷协同抗血小板作用研究

目的:观察黄芪总皂苷和赤芍总苷(1:3)(简称芪芍双苷)的抗血小板作用。方法:芪芍双苷按100、200、400mg/kg三种剂量给药,进行了血小板聚集试验,测定了大鼠血浆中血小板α颗粒胰蛋白-14O(GMP-14O)含量及血栓素A_2(TXA_2)/前列环素(PGI_2)水平。结果:芪芍双苷三种剂量均能抑制 ADP诱导的血小板聚集,明显降低GMP-140含量,显著降低TXA_2/PGI_2比值。结论:芪芍双苷具显著抗血小板作用。

赤芍总苷对大鼠血液流变学的影响

目的:研究赤芍总苷对血液流变学的影响。方法:用注射肾上腺素并附加冰浴的方法复制血瘀模型,观察赤芍总苷对大鼠血液流变性的作用。结果:赤芍总苷能降低血瘀大鼠的血液粘度、纤维蛋白原含量和红细胞聚集指数,减小红细胞压积。结论:赤芍总苷对血瘀大鼠血液流变学异常有明显改善作用。

赤芍总苷诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究

目的:采用赤芍总苷(TGC,从赤芍中提取的中药单体),作用于荷瘤小鼠,较系统对TGC诱导肿瘤细胞凋亡进行观察,为TGC的开发应用提供实验依据。方法:采用SABC免疫组化法检测bcl-2、p16及原位杂交法测定c-mycmRNA表达。结果:瘤鼠造模后,采用赤芍总苷作用,实验组与模型组bcl-2、c-myc阳性表达显著性差异,下调相关基因bcl-2蛋白和c-mycmRNA表达水平,上调相关基因p16蛋白表达水平。结论:赤芍总苷诱导肿瘤细胞凋亡,其机理可能与下调bcl-2和c-myc,上调p16基因蛋白mRNA表达水平密切相关。

赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤细胞凋亡的影响

目的探讨赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤生长及肿瘤细胞凋亡的影响及其机制。方法60只健康昆明小鼠,随机分5组,分别为模型组,环磷酰胺(100mg/kg)组,赤芍总苷(240、120mg/kg)组,环磷酰胺(100mg/kg)+赤芍总苷(240mg/kg)组。复制小鼠HepA肝癌皮下移植模型后,第2天ig给药,连续给药7d,第8天处死,取肿瘤组织,计算抑瘤率,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率和分析细胞周期,以及免疫组化法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果赤芍总苷高、低剂量明显抑制HepA肝癌小鼠肿瘤的生长;肿瘤细胞凋亡指数增加;抑制肿瘤细胞G0/G1期比例,向S期细胞转化,凋亡率增高;下调肿瘤细胞中Bcl-2蛋白的表达,同时明显提高肿瘤细胞中Bax蛋白的表达。结论赤芍总苷对HepA肝癌小鼠肿瘤生长有明显抑制作用,并诱导肿瘤细胞凋亡,其主要机制与调节Bcl-2和Bax蛋白表达有关。

赤芍功效物质基础研究进展

赤芍是来源于芍药属的常用中药,有清热凉血,散瘀止痛之功效,在中医药领域的应用十分广泛。赤芍之所以有如此功效,皆归因于赤芍内丰富的化学组分,而在这些化学组分当中,具有药理活性的、能够表达临床疗效的一个或多个化学组分—物质基础,发挥至关重要的作用。遗憾的是,赤芍的功效与其物质基础研究相结合的阐述较少,因此,通过对赤芍相关文献的广泛查阅,结合实际工作的研究情况,现归纳整理如下,旨在为赤芍的进一步研究提供科学依据。

赤芍总苷对荷瘤小鼠肿瘤细胞形态学实验研究

目的:观察赤芍总苷(TGC)对S180肉瘤小鼠的抑瘤作用,进行较系统的肿瘤细胞组织形态学观察。方法:造模后,观察TGC对瘤鼠肿瘤抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数、以及肿瘤组织光、电镜病理变化的影响。结果:通过赤芍总苷中药的治疗,实验组、联合组、CY组与模型组的抑瘤率表达具有显著性差异,对免疫器官胸腺指数、脾脏指数影响也具有显著作用。肿瘤组织病理学观察显示,赤芍总苷具有明显抑瘤作用。结论:赤芍总苷对瘤细胞具有抑制作用。

川芎赤芍提取物不同配比的活血化瘀作用研究

目的观察不同比例的川芎和赤芍有效部位提取物的配伍对大鼠活血化瘀的作用,探讨其活血化瘀的最佳比例关系。方法用肾上腺素建立血瘀动物模型,观察川芎和赤芍的有效部位提取物不同比例组成的药对大鼠血小板聚集、血小板黏附、红细胞聚集等血液流变学指标的影响。结果造模后大鼠血管明显收缩,血小板聚集性显著增高,红细胞聚集性明显增强且变形性发生改变,大鼠血液黏度升高,川芎和赤芍的有效部位提取物不同比例组成的药对皆有一定程度降低大鼠血液黏度、改善红细胞变形能力、降低红细胞聚集指数和抑制血小板聚集性的作用,其中川芎和赤芍提取物0.45 g∶0.45 g组和0.21 g∶0.45 g组作用较强。结论川芎和赤芍提取物组成的药对可显著改善大鼠的血液流变性,川芎和赤芍提取物0.45 g∶0.45 g组和0.21 g∶0.45 g组作用较佳。

白芍中白芍总苷提取工艺研究

目的优选白芍中白芍总苷的提取工艺。方法采用单因素考察及正交试验设计,以白芍总苷的含量为考察指标优选提取工艺。结果白芍总苷提取的优选工艺为加10倍量70%乙醇提取2次,每次2h。结论采用优选提取工艺,白芍总苷提取效率高且稳定。

赤芍总甙抗血栓作用研究

目的:研究赤芍总甙对血液凝固和血栓形成的影响。方法:赤芍总甙按50、100、200mg/kg灌胃给药,观察其对小鼠、大鼠凝血时间、ADPNa诱导的小鼠肺血栓状态以及电刺激大鼠血栓形成的作用。结果:赤芍总甙能显著延长小鼠、大鼠的凝血时间;缓解ADPNa诱导的小鼠肺栓塞呼吸喘促状态;抑制电刺激大鼠血栓的形成。结论:赤芍总甙有显著的抗凝、抗血栓形成作用。

赤芍总甙对Bcl-2、c-myc基因表达影响及诱导细胞凋亡机制研究

目的:探讨赤芍总甙(TGC)诱导肿瘤细胞凋亡机制,为TGC的开发应用提供实验依据。方法:采用流式细胞仪测定细胞凋亡,SABC免疫组化法检测Bcl-2蛋白表达,原位杂交法测定c-myc mRNA表达,电镜观察凋亡小体。结果:TGC治疗组出现Ap峰GO-G1期细胞明显减少,S期细胞明显增多,与模型对照组比较有显著差异(P<0.05)。实验组下调相关基因Bcl-2蛋白和c-myc mRNA表达水平。TGC组电镜可见细胞内膜结构完好,染色质边集,细胞核形成核带和核突,凋亡细胞数目较多,有新月形或花环状(凋亡小体形成)。结论:TGC诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2和c-myc mRNA表达水平密切相关。

赤芍总苷对荷瘤鼠体内IL-10、IL-12、TGF-β1分泌及细胞免疫功能的影响

目的观察赤芍总苷对荷瘤鼠免疫功能的调控作用。方法分组给药7d后,处死小鼠测定胸腺指数、脾指数;IL-10、IL-12、TGF-β1测定采用ELISA法;流式细胞仪检测血液中CD4+、CD8+T细胞的数目比例。结果赤芍总苷使荷瘤鼠的胸腺指数和脾指数都增加,能降低IL-10和TGF-β1分泌,增加IL-12分泌,纠正荷瘤机体的Th1/Th2漂移现象,维持Th1的优势状态。结论赤芍总苷具有调节IL-10、IL-12、TGF-β1细胞因子分泌的作用,增加CD8+T细胞数量,调节荷瘤鼠的免疫功能。

硫熏对白芍芍药苷和总苷含量的影响研究

[目的]研究白芍产地加工过程中,硫磺熏蒸对其有效成分的影响。[方法]采用高效液相色谱法,对硫熏前后的白芍有效成分芍药苷和白芍总苷含量进行测定。[结果]硫磺熏制后,白芍中芍药苷的含量急剧下降,而白芍总苷的含量下降不明显。[结论]硫熏法对白芍中的芍药苷有较强的破坏,产地加工应严格控制硫熏。

高效液相色谱法测定白芍药材中白芍总苷含量

目的建立白芍药材中白芍总苷的含量测定方法。方法以碱水解法将白芍总苷水解为苯甲酸,采用高效液相色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相,乙腈-0.1%磷酸(25∶75)为流动相,检测波长230nm,流速1.0mL/min,测定苯甲酸含量,从而计算出白芍总苷含量。结果方法重现性和稳定性均良好,苯甲酸进样量线性范围为20.016～500.4ng,回归方程为Y=5.29613X-1.06420,r=1.0000(n=5),平均回收率为98.58%,RSD为0.95%(n=9)。结论该方法适用于白芍药材中白芍总苷的含量测定。

舒心合剂质量控制方法的研究

目的建立舒心合剂的质量控制方法。方法采用薄层色谱法鉴别黄芪、三七和赤芍;运用紫外-可见分光光度法测定总皂苷的含量。结果薄层色谱方法简便、专属性强、重复性好;含量测定结果准确,人参皂苷Re平均回收率为102.2%(RSD=1.0%,n=6)。结论本方法可有效控制舒心合剂的质量。

糖皮质激素联合白芍总苷对大鼠系膜增生性肾炎的治疗作用

目的观察糖皮质激素联合白芍总苷(TGP)对大鼠系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)的治疗作用。方法采用胃肠道综合免疫方法建立大鼠MsPGN模型,以强的松为对照,观察激素和TGP联合应用对大鼠蛋白尿、血生化指标以及肾组织形态学改变的影响。蛋白尿采用双缩脲法测定,血生化指标由半自动生化分析仪测定,肾组织形态学为普通光镜观察。结果模型组大鼠出现大量蛋白尿,血肌酐(Cre)、尿素氮(Bun)、转氨酶(ALT)和甘油三酯(TG)升高,血浆总蛋白(TP)和白蛋白(Alb)下降,模型组的肾小球系膜细胞中至重度增生,系膜基质聚积。灌胃给予强的松和TGP(1mg/kg+100mg/kg)联合治疗4周后,肾小球系膜细胞增生、基质聚积明显减少,大鼠的蛋白尿减轻,Cre、Bun、ALT和TG下降,TP和Alb上升,与单独使用TGP(100mg/kg)、强的松(5mg/kg)有类似作用。结论TGP与强的松联用,可降低强的松的用量,对于MsPGN大鼠的肝肾功能有明显改善作用,并能部分逆转受损肾小球的病理改变。

白芍总甙对大鼠红细胞膜ATP酶活性的影响

目的研究不同浓度白芍总甙（ＴＧＰ）对Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶和Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性的影响。方法制备大鼠红细胞膜和测定Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶和Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性。结果较高浓度ＴＧＰ（２０～４０ｍｇＬ－１）可明显提高两酶活性。

HPLC法测定白芍药材中白芍总苷的含量

目的以苯甲酸为对照品，测定白芍药材中白芍总苷的含量。方法采用碱水解-HPLC法测定白芍药材中苯甲酸的含量，以公式“白芍总苷含量％=苯甲酸含量％x480．27／122．12”计算白芍总苷的含量；采用Kromasil 100-5C18 250＊46mm色谱柱，流动相为乙腈-0．1％磷酸（26：74），检测波长230nm，流速1mL·min-1，柱温30℃。结果方法重现性和稳定性均良好，苯甲酸在4．34—43．4ug·mL-1线性关系良好，回归方程为Y=59136．6879X＋4034．7289，r=1．0000（n=5），平均回收率为97．88％，RSD为2．13％（n=6）。结论该方法用于白芍药材中白芍总苷的含量测定稳定、可靠。