响应面法优化广西桔梗总皂甙提取工艺

目的优化一种提取广西桔梗总皂甙的工艺。方法以提取率为指标对4种提取方法进行对比,筛选出效果最理想的超声波提取法。结果通过响应面分析法,得到提取过程的优化工艺条件为乙醇浓度70%(体积分数),超声时间42 min,液料比9 mL/g,总皂甙得率可达3.45%。结论与传统方法相比,本方法具有省时、节能、提取率高的特点。

桔梗总皂苷含量测定方法研究

目的建立一种香草醛-硫酸比色法测定桔梗中总皂苷含量的方法,为桔梗的质量控制提供科学依据。方法索氏提取器提取,大孔吸附树脂纯化,香草醛-硫酸比色法测定桔梗总皂苷含量。结果比色法测定的线性方程为A=0.0034C+0.0064,相关系数为r=0.9997,平均加样回收率为96.97%,RSD=1.51%(n=6)。对不同来源桔梗中总皂苷含量进行测定,其含量范围为1.07%～3.76%。结论该法测定准确,重复性好,可用于桔梗药材中桔梗总皂苷的含量测定,便于对桔梗药材进行质量评价。

不同栽培年限川桔梗中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的含量比较

目的:建立测定川桔梗中桔梗总皂苷及桔梗皂苷D含量的方法,探索不同栽培年限川桔梗药材中2种指标成分的差异。方法:采用紫外-可见分光光度法测定川桔梗中桔梗总皂苷的含量;采用高效液相色谱法测定川桔梗中桔梗皂苷D的含量;比较一年生、两年生及三年生各10份川桔梗药材中桔梗总皂苷及桔梗皂苷D的含量。结果:一年生、二年生、三年生川桔梗药材中桔梗总皂苷含量的平均值分别为2.47%、3.01%、2.47%;桔梗皂苷D含量的平均值分别为0.23%、0.27%、0.33%;即一年生的样品中2种指标的含量均较低,二年生样品的桔梗总皂苷含量最高,三年生样品桔梗皂苷D的含量最高。结论:不同栽培年限的川桔梗药材的指标性成分含量具有一定差异,但二者间并未呈现相关性,建议选用栽培年限为二年生或三年生的药材。

桔梗中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的超声波提取工艺

分别以水和甲醇为提取溶剂,研究超声波法提取桔梗中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的工艺条件。采用正交试验法,考察提取次数(A)、料液比(B)、提取时间(C)、超声功率(D)对桔梗总皂苷和桔梗皂苷D提取率的影响。以水为提取溶剂时,超声提取桔梗总皂苷的影响顺序:提取次数>超声功率>料液比>提取时间,最优组合A3B3C3D2;提取桔梗皂苷D的影响顺序:超声功率>料液比>提取次数>提取时间,最优组合A2B3C1D1。以甲醇为提取溶剂时,超声提取桔梗总皂苷的影响顺序:提取次数>超声功率>提取时间>料液比,最优组合A3B2C1D3;提取桔梗皂苷D的影响顺序:提取时间>提取次数>料液比>超声功率,最优组合A2B1C2D3。

桔梗总皂苷对人肺腺癌细胞系A549移植裸鼠瘤生长和STAT2的影响

目的探讨桔梗总皂苷体内抑制人肺腺癌细胞系A549裸鼠移植瘤生长及其对肿瘤细胞信号传导与转录激活因子2(signal transducer and activatorot transcription2,STAT2)的影响。方法将荷人A549移植瘤BALB/c裸小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组、桔梗总皂苷组1(5 mg/kg·d)、桔梗总皂苷组2(10 mg/kg·d)、桔梗总皂苷组3(20 mg/kg·d)、桔梗总皂苷组4(25 mg/kg·d),分别治疗观察30 d,测量瘤体积与质量,并用HE染色观察各组移植瘤组织的病理形态结构,用免疫组化法检测瘤体细胞STAT2蛋白的表达。结果模型组与桔梗总皂苷各组对人肺癌细胞系A549移植瘤抑制作用比较,差异均有统计学意义(P<0.05);桔梗总皂苷对移植瘤体积与抑瘤率均显示出较好作用,桔梗总皂苷组4移植瘤的体积明显小于模型组、桔梗总皂苷其它各组,差异均有统计学意义(P<0.05);桔梗总皂苷各组移植瘤体积大于环磷酰胺组,差异有统计学意义(P<0.05);桔梗总皂苷各组STAT2表达由强到弱随浓度的增加而减弱,成剂量依赖关系,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论桔梗总皂苷对A549肺移植瘤组织生长有较好抑制作用,可能通过下调移植瘤组织STAT2蛋白表达来抑制瘤组织的生长。

比色法测定桔梗中桔梗总皂苷的含量

目的建立桔梗中桔梗总皂苷的含量测定方法。方法以香草醛．高氯酸为显色剂，桔梗皂苷D为对照品，采用比色法测定。结果比色法测定的线性范围为0．096～0．672mg，相关系数为0．99997，平均加样回收率为96．8％（RSD=3．87％，n=9）。结论本法测定准确，重复性好，可用于桔梗药材中桔梗总皂苷的含量测定。

不同等级商品规格的桔梗药材质量研究

对不同等级商品规格的桔梗药材中桔梗总皂苷、桔梗皂苷D含量进行测定研究。比色法测定桔梗总皂苷含量,HPLC测定桔梗皂苷D含量。不同等级规格的桔梗药材之间的总皂苷与桔梗皂苷D含量差异不明显,桔梗药材不同部位中总皂苷与桔梗皂苷D含量差异较大,其中桔梗外周皮的桔梗皂苷D含量最高,须根的总皂苷最高。对不同等级商品规格的桔梗药材进行质量研究,为桔梗药材商品规格的划分提供了实验依据。

桔梗生长年限和采收期与质量的相关性研究

目的确定桔梗最佳生长年限与最佳采收期。方法蒽酮比色法测定多糖含量;HPLC测定桔梗皂苷D含量;改进的总苷称重法测定总皂苷含量。结果以两年生,9月下旬至11月上旬采收的桔梗质量最佳。结论三种指标具有代表性,能够较全面反映药材质量。

不同地区桔梗中总皂苷含量分析

[目的]分析比较不同地区生产的桔梗中总皂苷的含量。[方法]以桔梗皂苷为考察指标,采用超声水提法提取5个产地的桔梗中的总皂苷,并采用比色法测定其含量。[结果]5个产地的桔梗总皂苷得率大小顺序为安康>商洛>通化>安国>淄博;其中安康的桔梗总皂苷得率最高,为5.10%;淄博的总皂苷得率最低,为3.04%。5个产地桔梗待测液的纯度大小顺序为安国>商洛>通化>淄博>安康;其中安国的桔梗待测液纯度最高,为65.55%,安康的桔梗待测液纯度最低,为53.38%。[结论]不同地区生长的桔梗总皂苷的得率及纯度相差较大。

桔梗总皂苷对支气管肺发育不良新生大鼠肺损伤的作用及机制研究

目的探讨桔梗总皂苷(PGS)对高氧致支气管肺发育不良(BPD)新生大鼠肺损伤及HGF/c-Met信号通路的影响。方法将66只SD新生大鼠分为对照组、BPD组、地塞米松(TD)组及桔梗总皂苷低、中、高剂量组,每组11只。除对照组外,通过持续吸入高浓度氧(氧体积分数为90%)复制BPD模型。桔梗总皂苷低、中、高剂量组分别腹腔注射50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg桔梗总皂苷,地塞米松组腹腔注射地塞米松5 mg/kg,BPD组和对照组给予等量生理盐水。连续给药14 d后,检测各组大鼠肺组织湿重/干重(W/D)值,HE染色法观察各组大鼠肺组织病理变化,并进行肺组织辐射状肺泡计数(RAC),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠肺组织中炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western blotting检测蛋白HGF、c-Met、p-c-Met在肺组织的表达。结果与对照组相比,BPD组大鼠肺泡结构不完整,肺泡腔增大,肺泡间隔增厚,且出现炎症细胞浸润,新生大鼠肺组织W/D值,炎症因子IL-6、TNF-α水平,HGF、p-c-Met/c-Met蛋白表达升高(P<0.05),肺组织RAC降低(P<0.05);与BPD组相比,地塞米松组、桔梗总皂苷低、中、高剂量组新生大鼠肺泡病理改变明显减轻,大鼠肺组织W/D值、炎症因子IL-6、TNF-α水平、HGF、p-c-Met/c-Met蛋白表达降低(P<0.05),肺组织RAC升高(P<0.05)。结论桔梗总皂苷可减轻BPD新生大鼠肺损伤及肺组织炎症反应,可能与HGF/c Met信号通路有关。

不同产地桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的测定

目的建立测定桔梗Platycodon grandiflorum中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的测定方法,并准确测定我国不同产地桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的量。方法采用超声波甲醇提取法,称重法测定桔梗总皂苷量;采用HPLC法测定桔梗皂苷D量,色谱条件:Waters Symmetry-C18色谱柱,流动相为乙腈-水(22∶78),体积流量1.0 m L/min,检测波长为210 nm,柱温为30℃。结果不同产地的桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D量差别较大。在所测的桔梗药材中,浙江产桔梗总皂苷量最高,为12.03%;黑龙江、辽宁、安徽、山东、江西产桔梗总皂苷量均高于《中国药典》2005年版规定的6%;而其余各省的量均低于6%,最低的为河南,其量仅为1.57%。对于桔梗皂苷D来说,云南产桔梗的量最高,为0.654%;河北产桔梗的量最低,为0.017%。结论建立的方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D量的测定。在我国不同产地桔梗药材中,桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的量存在差异。同一药材中桔梗总皂苷与桔梗皂苷D的量,未显示出相关性。

桔梗总皂苷对人肺腺癌A549细胞抑制作用研究

目的:探讨桔梗总皂苷对人肺腺癌A549细胞周期及增殖抑制作用的影响。方法:体外培养肺腺癌细胞系A549细胞,MTT法检测桔梗总皂苷对人肺腺癌A549细胞增殖的影响;Giemsa染色法观察细胞形态学变化;流式细胞术检测桔梗总皂苷对A549细胞周期的影响。结果:MTT法检测显示,桔梗总皂苷能明显抑制人肺腺癌A549细胞的增殖,其抑制作用随药物浓度的增加而增强,呈剂量依赖关系(P<0.05)。流式细胞仪分析检测提示不同浓度的桔梗总皂苷均能促细胞凋亡,细胞周期被阻滞于G0/G1期,其凋亡率随药物浓度增高而增加(P<0.05)。结论:桔梗总皂苷能抑制人肺腺癌A549细胞增殖。

不同产地桔梗皂苷生物合成与土壤元素关系的研究

目的 研究桔梗皂苷积累与土壤元素的关系,从基因表达水平明确不同产地桔梗皂苷含量差异的原因,为桔梗药材的科学种植提供理论依据。方法 利用HPLC法和香草醛-冰醋酸比色法测定不同产地桔梗韧皮部和木质部的桔梗皂苷D和桔梗总皂苷含量,实时荧光定量PCR测定6种关键酶基因的表达量,利用原子吸收法、比色法等方法测定土壤元素含量,用Pearson相关性分析法分析土壤元素与桔梗皂苷及其关键酶基因表达量的关系。结果 河南洛阳产桔梗根中的桔梗皂苷D和桔梗总皂苷含量显著高于其他产地,桔梗韧皮部和木质部的桔梗皂苷含量和关键酶基因表达量存在较大差异;相关性分析表明,土壤中Cu、Ca和Zn含量对桔梗皂苷的合成起主要作用,甲羟戊酸焦P酸脱羧酶基因、法尼基焦P酸合酶基因和异戊烯基焦P酸异构酶基因是桔梗皂苷合成过程中的主要关键酶基因,土壤元素对桔梗关键酶基因具有一定的调控作用。结论 土壤元素通过调控关键酶基因进而影响桔梗皂苷的合成,其中土壤中Zn含量起主要作用。

不同产地桔梗药材中总皂苷及桔梗皂苷D的含量比较

目的：比较不同产地桔梗中总皂苷及桔梗皂苷D的含量差异,为该药材的质量控制与生产提供参考。方法：采用2005年版《中国药典》方法测定桔梗总皂苷含量,2010年版《中国药典》方法测定桔梗皂苷D的含量,对36批桔梗药材总皂苷及桔梗皂苷D含量进行测定。结果：赤峰产区10批样品总皂苷质量分数在5.02%~9.20%,桔梗皂苷D质量分数在0.1%~0.175%,二者含量分布较窄。其他产区桔梗药材含量分布较宽,与内蒙古桔梗药材品质存在较大差异。结论：各产地桔梗的质量总体较好,但不同产地间及同产地各桔梗样品间的质量及其稳定性存在较大差异,浙江产桔梗的桔梗皂苷D和总皂苷含量均较高,而赤峰产桔梗品质稳定性较好;从整体质量评价角度看,桔梗质量标准中宜增加总皂苷含量的限量规定。