酸枣仁治疗卒中后失眠药理机制及研究进展

卒中是常见的脑血管疾病之一,卒中后失眠是卒中后发病率较高的并发症,主要临床表现为卒中后出现的入睡困难、易醒、早醒等症状,其发病机制复杂且尚不完全明确,现有研究显示其与解剖部位、神经生物学因素及机体整体功能状态和社会心理学等因素有关。神经生物学因素中包含炎症介质、神经递质、脑血流量、血容量、下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能等的变化,长期的卒中后失眠严重时会引起脑血管疾病的复发,对患者的基本日常生活产生了很大的影响,中医认为卒中后失眠是中风与不寐的合病,归属于“不寐”范畴。营卫失衡、阴阳失交、气血失调、神失所司均可导致卒中后失眠。而酸枣仁作为临床中常用的中药,具有养心补肝、宁心安神、敛汗、生津止渴之功用。通过对唐宋时期医家及李济仁国医大师、闫咏梅教授等医家的临床用药规律总结,发现酸枣仁是临床上治疗卒中、卒中后睡眠障碍用药频率最高的单味中药之一,通过大量的临床及实验研究发现酸枣仁的养心安神功效确切,现代研究发现,酸枣仁的主要成分有三萜皂苷类、黄酮类、生物碱类及脂肪酸类等,其具有镇静催眠、抗抑郁、抗氧化、抗肿瘤、抗心律失常、抗心肌缺血等作用。临床上经常用于治疗失眠、焦虑、抑郁等情感障碍类精神疾病以及心血管疾病,该文对酸枣仁有效成分的药理作用及其治疗卒中后失眠的药理机制进行综述,并对酸枣仁的炮制及药对进行归纳梳理,明确酸枣仁对卒中后失眠的重要作用,以提供卒中后失眠的最佳用药选择。

酸枣仁总皂苷提取工艺优化及其改善睡眠作用机制研究

目的优化酸枣仁总皂苷的提取工艺,并研究其改善睡眠作用。方法本研究采用单因素和响应面实验优化高压脉冲电场法提取酸枣仁总皂苷的工艺参数。同时采用随机法把小鼠分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组和酸枣仁总皂苷低、中、高剂量组。除正常对照组外,其余5组灌胃对氯苯丙氨酸(parachlorophenylalanine,PCPA)溶液构建失眠小鼠模型。记录各组小鼠3 min内的水平、垂直和修饰活动得分,测定小鼠神经递质中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、去肾上腺素(noradrenaline,NE)、多巴胺(dopamine,DA)、谷氨酸(glutamic acid,Glu)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的含量。结果最佳提取工艺条件为:乙醇浓度71%、电场强度20 kV/cm、脉冲数10,此条件下酸枣仁总皂苷得率为7.18%。改善睡眠实验结果表明:酸枣仁总皂苷能降低PCPA诱导失眠模型小鼠的水平、垂直和修饰得分,升高失眠模型小鼠神经递质中5-HT和DA的含量,降低NE的含量,同时降低Glu含量和Glu/GABA的比值,提高GABA含量,表明其对PCPA诱导失眠模型小鼠有良好的改善睡眠作用。结论该研究获得了酸枣仁总皂苷的最佳提取工艺,得到的酸枣仁总皂苷对PCPA诱导失眠模型小鼠有良好的改善睡眠作用。

酸枣仁总皂苷抗抑郁作用的实验研究

目的研究酸枣仁总皂苷对行为绝望小鼠抑郁模型的影响。方法采用小鼠强迫游泳实验和悬尾实验抑郁模型,小鼠行为绝望的不动时间作为指标,考察酸枣仁总皂苷抗抑郁活性。结果酸枣仁总皂苷中、高剂量组均能减少小鼠强迫游泳和悬尾不动时间,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论酸枣仁总皂苷具有一定的抗抑郁作用。

酸枣仁不同炮制品及炒酸枣仁中总黄酮与总皂苷的镇静催眠作用比较

目的:研究比较酸枣仁生品和炒品及总黄酮和总皂苷的镇静催眠作用。方法:采用小鼠活动记数法和协同阈下剂量戊巴比妥钠镇静催眠法。结果:酸枣仁生品以20g/kg剂量及酸枣仁炒品以10g/kg剂量灌胃给药,可显著减少小鼠自发活动次数;酸枣仁生品和炒品以10g/kg和20g/kg剂量灌胃给药均可协同阈下剂量戊巴比妥钠使入睡小鼠数目显著增多。总皂苷以240mg/kg和480mg/kg剂量给药可显著减少小鼠自发活动次数,以480mg/kg剂量给药可显著增加阈下剂量戊巴比妥钠所致翻正反射消失小鼠数;总黄酮以300mg/kg剂量给药可显著减少小鼠自发活动次数、增加阈下剂量戊巴比妥钠所致翻正反射消失小鼠数。结论:酸枣仁生品和炒品均有抑制小鼠自发活动及协同戊巴比妥钠镇静催眠作用,且炒酸枣仁中总黄酮和总皂苷均有抑制小鼠自发活动和协同戊巴比妥钠镇静催眠作用。

多指标正交试验法优选酸枣仁药材水提取工艺

目的:以浸膏收率、总皂苷含量、斯皮诺素含量为指标,优选酸枣仁药材水提取工艺。方法:采用正交试验,考察煎煮时间、提取次数和加水倍量3个因素,对酸枣仁药材水提取工艺条件进行优化。结果:酸枣仁药材最佳水提取工艺条件为加10倍量水浸泡过夜,加热煎煮3次,每次1h。结论:该提取工艺稳定可行,重现性好,适于酸枣仁药材水提取。

大孔吸附树脂纯化酸枣仁总皂苷工艺研究

目的:研究大孔吸附树脂纯化酸枣仁总皂苷的工艺条件及参数。方法:以酸枣仁总皂苷的洗脱率、精制度等为指标,用蒸馏水、30%乙醇、70%乙醇各3BV(柱床沉降体积)依次洗脱,考察大孔吸附树脂对酸枣仁总皂苷的吸附性能和洗脱参数。结果:12·7ml酸枣仁总皂苷样品液上大孔吸附树脂柱,酸枣仁总皂苷富集于70%乙醇洗脱液部位,洗脱率为85·2%,精制度为208·4%。结论:通过大孔吸附树脂富集与纯化,可较好地纯化酸枣仁总皂苷。

超滤法纯化酸枣仁提取物的工艺研究

用超滤法研究纯化酸枣仁提取物的最佳工艺.以总皂苷透过率和浸膏得率为评价指标进行正交实验设计,对操作压力(A)、滤膜的分子截流值(B)、药液浓度(C)、料液温度(D)4个因素进行优选.结果表明,优选工艺为A1B1C2D2,即操作压力为10 Pa,滤膜的分子截流值为1000 u,料液浓度为100 g.L-1,料液温度为30℃时纯化效果最好.采用此工艺纯化酸枣仁中总皂苷的工艺操作简单可靠,纯化效率高.

消泡剂在酸枣仁皂苷浓缩过程中的应用

目的初步探索消泡剂在酸枣仁皂苷浓缩过程中的应用。方法分别以消泡率和表面张力作为指标考察6种消泡剂的消泡性能,进而研究浓缩时温度、消泡剂配制质量浓度及消泡剂使用量对消泡作用的影响。结果选用食品消泡王消泡剂,浓缩温度为70℃,消泡剂配制质量浓度0.08 g/m L,起泡液和消泡剂用量比为6∶1,表面张力可降低30.74%,浓缩时间可减少为原来的50%。结论消泡剂在酸枣仁皂苷浓缩过程中有一定的消泡作用。

酸枣仁总皂苷的含量测定

[目的]测定经大孔树脂纯化后酸枣仁总皂苷的含量。[方法]酸枣仁药材经乙醇提取,正丁醇萃取,大孔树脂纯化得酸枣仁总皂苷。以人参皂苷Rb1为标准品,香草醛-硫酸液显色,采用紫外分光光度法,543 nm为检测波长,以相应的吸收度A为横坐标（X）,浓度（g/L）为纵坐标（Y）绘制标准曲线。[结果]回归方程为：=32.526X-1.675 9,r=0.999 7。皂苷测定在取量1.818~29.09 mg/L时,吸光度与皂苷含量呈良好线性关系。精密度实验相对标准偏差（RSD）为0.09%,重现性实验RSD为0.28%,样品和标准品稳定性实验RSD分别为0.42%和1.13%,加样回收率实验结果平均回收率为99.88%,RSD为1.13%,样品中总皂苷的平均含量为54.59%,RSD为0.38。[结论]建立的含量测定方法可行,稳定,可以用于浸膏的质量控制。

酸枣仁总皂甙对大鼠脑缺血损害及脑组织生化指标的影响

酸枣仁总皂甙能减少缺血脑组织含水量及ＭＤＡ含量，使脑组织中ＳＯＤ，ＣＫ及ＬＤＨ活性增高，乳酸含量下降，脑神经细胞损害减轻，对缺血性脑损伤具有保护作用。

Box-Behnken法优化酸枣仁总皂苷和多糖提取工艺及抗氧化作用研究

为优化酸枣仁总皂苷和多糖提取工艺,及研究其抗氧化作用,采用Box-Behnken法优化提取工艺,利用3种抗氧化检测方法对酸枣仁不同炮制品进行抗氧化作用研究。试验结果表明,酸枣仁总皂苷最佳提取工艺为超声功率228.5 W,液固比70:1,乙醇体积分数10%,提取时间21.1 min;多糖最佳提取工艺:超声功率200 W,液固比70:1,乙醇体积分数21.2%,提取时间27.7 min;炒酸枣仁总皂苷含量较高,生-炒配伍的多糖含量较高。研究表明酸枣仁的总皂苷和多糖均具有一定抗氧化能力,优化的工艺可为酸枣仁的开发和应用提供依据。

酸枣仁总皂苷对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用及机制研究

目的观察酸枣仁总皂苷对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用及其机制。方法采用差速贴壁法分离培养1～3 d Wistar新生乳鼠心肌细胞,以过氧化氢作用心肌细胞建立氧化损伤模型,将培养72 h的原代心肌细胞,选择搏动良好、生长密度无明显差异的细胞按孔随机分为以下4组:①空白对照组:细胞培养过程中不给予任何处理;②模型组:心肌细胞培养基中加终浓度为400μmol.L-1过氧化氢作用4 h;③酸枣仁总皂苷治疗组:操作同模型组,造模前予酸枣仁总皂苷(20 mg.L-1)干预24 h;④蛋白激酶C抑制剂组:操作同治疗组,但在造模前5 min予白屈菜红碱(5μmol.L-)1。倒置显微镜观察心肌细胞形态学变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测心肌细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫印迹技术检测心肌细胞膜蛋白中蛋白激酶C Eplison亚型(PKCε)的表达。结果与空白对照组比较,模型组经400μmol.L-1过氧化氢作用4 h后,细胞核暗淡,伪足显著变细,细胞间连接明显减少,搏动节律减慢,细胞活力显著下降(P<0.001),细胞凋亡率显著增高(P<0.001),PKCε的表达差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,酸枣仁总皂苷能使心肌细胞形态明显改善,显著提高细胞活力、降低细胞凋亡率及升高PKCε的表达,差异有统计学意义(P<0.001)。PKC抑制剂白屈菜红碱可显著减弱酸枣仁总皂苷的保护作用,差异有统计学意义(P<0.01)。结论酸枣仁总皂苷对过氧化氢损伤大鼠心肌细胞具有保护作用,其机制可能与激活PKCε有关。

酸枣仁不同炮制品以及不同配伍方式有效成分的含量比较

目的 分析比较酸枣仁不同炮制品和不同配伍方式有效成分的含量。方法 以《金匮要略》中酸枣仁汤制备方法为参考优化提取方法,采用紫外分光光度法比较各药物间总黄酮与总皂苷含量。结果 优化后制备工艺为取225g药材粗粉,加水1600mL浸泡1h后,在100℃下煎煮25min。酸枣的总黄酮和总皂苷含量均高于酸枣仁其他炮制品和其他配伍方式。结论 无论是单味药还是复方汤剂,酸枣的总皂苷,总黄酮含量均高于酸枣仁,这可为酸枣的药用开发和临床应用提供研究思路,也为酸枣仁汤标准汤剂的研究提供参考。

酸枣仁总黄酮和总皂苷部位制备工艺的稳定性考察

目的：考察酸枣仁总黄酮和总皂苷部位制备工艺的稳定性,为后续药效学评价的样品制备提供保证。方法：采用相同工艺条件制备10批酸枣仁总黄酮和总皂苷部位样品。选择斯皮诺素、白桦酯酸及酸枣仁皂苷A,B为指标成分,利用ELSD/HPLC分析两部位样品的特征图谱,流动相乙腈（A）-水（B）梯度洗脱（0~10 min,12%~18%A;11~20 min,19%~23%A;21~30 min,23%~34%A;31~40 min,35%~45%A;41~50 min,46%~100%A;51~60 min,100%~11%A;61~70 min,12%A）,漂移管温度40℃。结果：总黄酮部分的化学成分分布主要集中于前25 min,总皂苷部分化学成分集中在25 min后,总黄酮和总皂苷纯度均〉50%,54.46 min处色谱峰确定为白桦酯酸。结论：制备酸枣仁总黄酮和总皂苷部位的工艺稳定性良好,可作为药效学试验的样品。

正交试验优选酸枣仁总皂苷提取工艺

目的：优选酸枣仁总皂苷的提取工艺,为该成分的工业化生产提供参考。方法：采用HPLC-UV检测酸枣仁皂苷A和B的含量,流动相乙腈-水（34∶66）,检测波长204 nm。在单因素试验基础上,通过正交试验考察乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间及提取次数对酸枣仁总皂苷提取工艺的影响。结果：酸枣仁皂苷A,B的线性范围分别为0.24-2.40,0.12-1.20μg,平均加样回收率分别为100.39%,99.40%。酸枣仁总皂苷最佳提取工艺为加12倍量70%乙醇回流提取2次,每次1.5 h;酸枣仁皂苷A,B的平均质量分数分别为0.606,0.228 mg·g^-1。结论：建立的HPLC检测酸枣仁皂苷A,B含量方法准确可靠,优选的酸枣仁总皂苷提取工艺稳定可行,具有节约成本、省时等特点,适用于工业化生产。

解郁舒心颗粒制备工艺与质量分析

目的:优选解郁舒心颗粒的制备工艺,并考察其质量,为该制剂的质量标准制订提供参考。方法:根据颗粒剂的特性,采用湿法造粒,以颗粒剂的溶化性、澄明度及细粉率为考察指标,优选颗粒剂的辅料种类及用量;以粒度合格率为评价指标,通过正交试验考察木糖醇用量、糊精用量、乙醇体积分数对颗粒剂成型效果的影响。应用HPLC-ELSD检测解郁舒心颗粒中酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B的含量,流动相乙腈-水(35∶65),柱温35℃。结果:木糖醇辅料澄明度最好,细粉率最小。最佳处方配比为干膏粉-木糖醇-糊精(0.5∶15∶7),50%乙醇为黏合剂。解郁舒心颗粒中酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B平均质量分数分别为0.683,1.369 mg·g^(-1)。结论:制备的解郁舒心颗粒剂符合《中国药典》2010年版的质量要求,质控方法简便、准确、可行。

酸枣仁总皂苷改善对氯苯丙氨酸诱导失眠大鼠模型学习记忆损伤机制的研究

目的基于代谢组学技术考察酸枣仁总皂苷(total saponins of Ziziphi Spinosae Semen,SZSS)对失眠大鼠内源性代谢物的影响,并探讨酸枣仁总皂苷改善学习记忆的药效及其作用机制。方法采用对氯苯丙氨酸(DL-4-chlorophenylalanine,PCPA)诱导大鼠失眠模型,给予地西泮和酸枣仁总皂苷干预后,进行旷场实验及Morris水迷宫实验;采用苏木素-伊红(HE)染色观察海马组织病理变化;采用ELISA测定海马组织5-羟色氨(5-hydroxytryptamine,5-HT)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)及NO(nitric oxide,NO)水平。利用UPLC-Orbitrap-MS/MS技术对大鼠海马组织代谢轮廓进行分析,结合多元统计分析筛选差异性代谢物,并基于MetaboAnalyst 5.0数据库进行代谢通路及代谢网络分析,多角度探讨酸枣仁总皂苷改善学习记忆的代谢特征及作用途径。结果与模型组比较,酸枣仁总皂苷组大鼠学习能力显著提高(P<0.05、0.01),海马组织病理结构明显改善,海马组织中5-HT、GABA及NO水平显著升高(P<0.05、0.01);代谢组学共鉴定出18种与学习记忆损伤相关的潜在生物标志物,酸枣仁总皂苷主要通过苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸等7条主要氨基酸代谢通路发挥改善记忆损伤的作用。结论酸枣仁总皂苷能够通过回调海马组织内源性差异代谢物,并调控相关氨基酸代谢通路,从而改善失眠引起学习记忆减退。