苜蓿总皂苷对Beagle犬的长期毒性实验研究

目的观察苜蓿总皂苷长期给药对Beagle犬的毒性反应。方法 Beagle犬分为苜蓿总皂苷高、中、低剂量组(分别为3.2、1.6、0.8 g·kg^(-1))和空白对照组,每组8只。连续灌胃给药180d,观察Beagle犬的一般状态,于末次给药后和停药30 d后分别取部分动物,检测血液学指标、血液生化学指标及病理组织学改变。结果与空白对照组比较,各给药组对Beagle犬的生长、行为等无显著影响;血液学和血液生化学分析中,苜蓿总皂苷高剂量组白细胞计数增多、丙氨酸氨基转移酶含量降低,中剂量组总蛋白水平升高,低剂量组肌酐水平升高,原因可能与个别动物的应激反应或个体差异有关;血生化其他各项指标均在正常值范围内,给药组与空白对照组比较差异均无统计学意义;病理学检查未见与受试药物相关的变化。恢复期未发生药物引起的迟发性毒性反应。结论苜蓿总皂苷(0.8~3.2 g·kg^(-1))对Beagle犬经口长期给药,未见明显毒性反应。

苜蓿总皂苷对Beagle犬呼吸系统和心血管系统的影响

目的:观察苜蓿总皂苷对Beagle犬心血管系统和呼吸系统的影响,为临床用药提供参考。方法:将Beagle犬分为苜蓿总皂苷高、中、低剂量组(1.0、0.5、0.25g/kg)和空白对照组,灌胃给药1、2、3h后,观察用药前后Beagle犬呼吸频率、呼吸深度、血压、心率变化情况。结果:用药后Beagle犬呼吸频率、呼吸深度、血压、心率均无明显变化,用药前后比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:苜蓿总皂苷在药效剂量下对Beagle犬呼吸系统及心血管系统无明显影响。

紫花苜蓿茎叶中皂苷和黄酮成分定量分析研究

紫花苜蓿中含有丰富的膳食纤维以及矿物质,具有较高的营养价值。通过溶剂提取法,利用不同的乙醇比例对紫花苜蓿茎叶进行提取,利用分光光度法分别对紫花苜蓿茎叶提取物中皂苷和黄酮质量分数进行测定,探究了不同乙醇比例对紫花苜蓿茎叶中皂苷和黄酮提取量的影响。结果表明:70%乙醇-水提取下的紫花苜蓿皂苷得率为3.05%,黄酮得率为1.76%,远高于50%乙醇-水提取物和水提取物中的皂苷和黄酮得率。通过对不同乙醇比例下紫花苜蓿茎叶含有的皂苷和黄酮质量分数测定,优化提取工艺,提高提取效率。

苜蓿与燕麦混合比例对饲草型发酵全混合日粮营养成分、发酵品质及饲用价值的影响

试验旨在研究苜蓿与燕麦混合比例对饲草型发酵全混合日粮(FTMR)营养成分、发酵品质及饲用价值的影响。试验设置苜蓿、燕麦、玉米秸秆、天然牧草、精料的比例分别为29:35:7:4:25(FTMR1组)、30:30:10:4:26(FTMR2组)、34:29:7:4:26(FTMR3组)、35:26:9:4:26(FTMR4组)、39:25:6:4:26(FTMR5组),配制5组FTMR。常温发酵60d。结果显示,FTMR1组日粮的粗蛋白质含量显著高于FTMR5组(P<0.05)。FTMR3组、FTMR4组日粮的中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量均显著低于FTMR1组(P<0.05)。FTMR3组日粮的氨态氮含量显著高于其他组(P<0.05)。FTMR2组、FTMR4组日粮的丁酸含量显著低于其他组(P<0.05)。FTMR3组、FTMR4组日粮的饲用价值显著高于FTMR1组(P<0.05)。研究表明,FTMR4组饲草型FTMR的营养成分、发酵品质及饲用价值较高,适合在内蒙古地区使用。

不同品种紫花苜蓿中总皂苷含量的比较研究

采用比色法测定了北京地区栽培不同年限的45个紫花苜蓿品种茎、叶中总皂苷的含量。结果表明,各品种苜蓿叶片中的皂苷含量均高于茎,在不同品种之间存在明显差异。4年生植株中皂苷含量最高的品种“Vernal”为1.174%,最低的品种“Empress”为0.606%;3年生植株中最高的品种“WL442”为1.141%,最低的品种“农保”为0.788%;2年生植株中最高的品种“胜利者”为1.293%,最低的品种“全能”为0.722%。综合比较,含量最低品种与最高的品种相差2.13倍。栽培年限对紫花苜蓿皂苷含量具有一定影响。

紫花苜蓿化学成分的研究(英文)

为研究紫花苜蓿（Medicago scttiva L．）地上部位的化学成分，通过溶剂萃取、硅胶柱色谱、凝胶柱色谱分离纯化，从紫花苜蓿地上部分分离得到9个化合物，根据质谱和核磁共振数据鉴定为小檗碱（1）、大黄素（2）、大黄素8-O-β-D-葡萄糖苷（3）、soyαsαpogenol B-3-O-β-glcA（4）、邻羟基苯甲酸（5）、反式对羟基肉挂酸（6）、顺式对羟基肉桂酸（7）、正三十烷醇（8）和β-胡萝卜苷（9）。其中化合物1—4为首次从苜蓿属植物中分离得到。

3种苜蓿不同部位皂苷含量的测定研究

[目的]研究3种苜蓿不同部位中皂苷含量的测定。[方法]采用比色法测定了江苏地区苜蓿属3种植物紫花苜蓿(包括5种栽培品种)、天蓝苜蓿和南苜蓿不同部位的总皂苷含量。[结果]紫花苜蓿根中皂苷含量(1.39%)明显高于其他2种苜蓿根中皂苷含量;天蓝苜蓿和南苜蓿茎中皂苷含量差异不明显(RSD=2.4%),略低于紫花苜蓿茎中皂苷含量(0.583%);天蓝苜蓿叶中皂苷含量最低(0.623%)。综合3种不同部位的皂苷含量,根中皂苷的平均含量达到1.335%,明显大于茎(0.596%)和叶(0.655%)中皂苷含量。[结论]该研究为进一步开发苜蓿属植物资源提供了一定的理论依据。

紫花苜蓿MsSQE1的克隆及对皂甙合成的功能分析

【目的】鲨烯环氧酶(squalene epoxidases,SQE)是苜蓿皂甙合成途径中的一种限速酶,与苜蓿皂甙的合成密切相关。通过对苜蓿鲨烯环氧酶(MsSQE1)基因的克隆及在苜蓿中过表达,探究鲨烯环氧酶对皂甙合成的作用机制。【方法】以模式植物蒺藜苜蓿鲨烯环氧酶基因序列设计引物,同源克隆苜蓿MsSQE1。对MsSQE1进行生物信息学分析;通过基因枪轰击技术,使MsSQE1在洋葱表皮瞬时表达,进行亚细胞定位。利用qRT-PCR方法分析该基因在根、茎、叶中的表达水平,以及在紫外辐射、ABA和GA3条件下的表达模式。在茉莉酸甲酯(MeJA)的诱导下,分析MsSQE1的转录水平,及对苜蓿皂甙含量的影响。利用根癌农杆菌转化体系,获得过表达MsSQE1的阳性转基因植株,并测定转基因植株的皂甙含量。【结果】克隆了MsSQE1的cDNA序列,开放阅读框1 578 bp,编码525个氨基酸,等电点为8.59。同源性比对分析,其氨基酸序列与蒺藜苜蓿中SQE1氨基酸序列同源性为98.6%,与拟南芥的同源性为80%。亚细胞定位显示,MsSQE1可能定位于细胞膜。组织特异性表达分析显示,MsSQE1在叶中的表达量最高,茎中次之,根中的表达量最低。在紫外辐射、ABA和GA3的诱导表达显示,紫外辐射诱导24 h,叶中表达量最高;GA3(50μmol·L^-1)和ABA(100μmol·L^-1)处理,均为8 h叶中表达量最高;MeJA处理能诱导MsSQE1表达量上调的同时苜蓿总皂甙含量也随着MsSQE1表达的上调而增加。分析过表达MsSQE1转基因苜蓿和转空载体苜蓿株系发现,MsSQE1的表达水平和总皂甙含量均升高,其中MsSQE1的表达水平是对照的3.11-9.45倍,总皂甙含量比对照提高14.26%-28.05%,暗示MsSQE1是苜蓿皂甙合成途径中的一种关键调节酶。【结论】从豆科牧草紫花苜蓿中克隆了MsSQE1并进行功能分析。在苜蓿中过表达MsSQE1能增加苜蓿总皂甙含量,暗示MsSQE1的表达影响苜蓿皂甙的生物合成,可能对皂甙的合成有重要的调节作用。

维药苜蓿子中总多酚与总多糖的含量测定

目的建立苜蓿子中总多糖与总多酚含量的测定方法。方法以葡萄糖、没食子酸为对照品,以蒽酮-硫酸、福林试剂-碳酸钠溶液体系为显色剂,采用可见分光光度法在检测波长582、760 nm处测定10批苜蓿子中总多糖与总多酚的含量。结果葡萄糖溶液浓度在0.02～0.12 mg/mL、没食子酸溶液浓度为1～7μg/mL（r=0.999 5）范围内与吸光度呈良好的线性关系,加样回收率为104.30%、101.46%,RSD为2.40%、2.90%,总多糖的含量为22.34～53.43 mg/g,总多酚的含量为3.03～4.88 mg/g。结论可见分光光度法简单,准确性、重复性良好,为苜蓿子多糖与多酚的进一步研究奠定了基础。

苜蓿皂苷研究概述

综合近年来国内外有关苜蓿皂苷的研究,从苜蓿皂苷特征、分离提取、生理功能、应用前景等方面对其进行了详细介绍,为今后苜蓿皂苷资源的深入研究和开发利用提供一定的参考和借鉴作用。

南苜蓿、天蓝苜蓿、紫花苜蓿根茎叶中皂苷含量的测定和比较

采用比色法测定南苜蓿、天蓝苜蓿、紫花苜蓿根茎叶中的皂苷含量。以齐墩果酸为标准品,利用香草醛-冰醋酸体系,在545nm处检测,浓度在50μg/mL～150μg/mL范围内线性关系良好,其回归方程为Y=0.0073X-0.2178,相关系数R=0.9994。本法简便、快速、准确、可靠。实验结果表明,南苜蓿、天蓝苜蓿、紫花苜蓿三者中,根中皂苷含量大于茎中和叶中皂苷含量,紫花苜蓿根中皂苷含量略高于其他两种苜蓿;叶中皂苷含量与茎中皂苷含量无明显差异。

苜蓿总皂甙含量的遗传变异及其与农艺性状的相关分析

【目的】通过对苜蓿总皂甙含量与农艺性状的相关分析找出一个能快速标记总皂甙含量高低的性状,探索总皂甙含量的遗传变异规律。【方法】以耐湿热苜蓿新品种渝苜一号为材料,测定100个苜蓿单株,从中选出5个高皂甙植株和5个低皂甙植株。【结果】通过各单株后代系的试验确定了这10个植株的总皂甙遗传力在0.118到0.745之间变化,后代系的变异系数在15.54%到28.81%之间变化,高低皂甙群体的遗传力分别为0.636和0.208,高皂甙群体的遗传力明显高于低皂甙群体。苜蓿总皂甙含量与株高、叶色、虫害程度、干重和干物质率的相关分析及通径分析的结果表明:叶色与总皂甙含量呈极显著负相关(r=-0.405**),且叶色与总皂甙含量的的相关关系主要是直接效应(P=-0.422**);干重与总皂甙含量的相关主要是通过株高、叶色和干物质率的间接作用。【结论】通过常规育种方法要育成低皂甙苜蓿品种较为困难,而一些高皂甙含量的后代系可作为高皂甙苜蓿品种的育种材料;苜蓿的叶色可以作为快速识别苜蓿总皂甙含量高低的标记。

苜蓿地上部分化学成分及降脂活性研究

目的:对苜蓿地上部分的化学成分进行研究。方法:利用各种色谱技术进行分离,根据化合物的光谱数据(IR、UV、MS、1H-NMR、13C-NMR)和化学方法鉴定其结构。结果:从苜蓿地上部分中分离得到两个化合物,分别鉴定为大豆皂苷Ⅰ(Ⅰ)、黄芪皂苷Ⅴ(Ⅱ);降脂实验结果表明此化合物的混合物具有降脂作用。结论:化合物Ⅰ、Ⅱ均为首次从苜蓿地上部分分离得到,且此类化合物具有良好的降脂活性。

苜蓿对旱地土壤有机碳氮变化的驱动作用

根据旱地长期定位试验和分离土壤有机质中微粒有机质及矿物结合有机质的方法,研究了长期生长苜蓿对土壤有机碳、全氮变化的驱动作用。结果表明:不施肥条件下,苜蓿地土壤有机碳、全氮的含量比裸地土壤中的含量明显增加,土壤有机碳和氮库中的微粒有机碳、氮的含量没有显著增加,而增加的有机碳、氮主要分布在矿物结合有机碳、氮组分中。在施用有机肥及氮、磷化肥条件下,苜蓿地土壤有机碳和全氮的含量显著地提高,增加的有机碳、氮几乎平均地分布在微粒有机碳、氮和矿物结合有机碳、氮组分中。由此表明,保持适宜的苜蓿生产力并采用合理的施肥措施,长期生长苜蓿能够有效地驱动土壤固定有机碳和氮素,从而保持和提高土壤肥力。

苜蓿总皂苷对高脂血症小鼠血清血脂水平的影响

目的:观察苜蓿总皂苷对高脂血症小鼠血清血脂水平的影响。方法:采用高脂乳剂灌胃的方法建立高脂血症小鼠模型,分为苜蓿总皂苷高﹑中﹑低剂量组(1g/kg、0.5g/kg、0.25g/kg),阳性组(绞股蓝总苷片80 mg/kg),模型组,另设正常组,每组10只。灌胃给药,连续40天,各组取血清测定TCH、TG、HDL-C和LDL-C的含量。结果:苜蓿总皂苷高、中剂量组高脂血症小鼠的血清TCH、TG、LDL-C水平均明显下降,HDL-C水平明显上升,与模型组比较有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:苜蓿总皂苷有良好的降血脂作用。

苜蓿总皂苷对小鼠精神神经系统的影响

目的:观察苜蓿总皂苷对小鼠精神神经系统的影响,为临床用药提供参考。方法:小鼠分为苜蓿总皂苷高﹑中﹑低剂量组(5.0、2.5、1.25g/kg)和空白对照组,利用爬杆试验、翻正反射试验、睡眠试验,观察用药前后小鼠的行为变化。结果:用药后小鼠的爬杆、翻正反射、睡眠等自主活动行为能力均无明显变化,与空白对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:苜蓿总皂苷的药效学剂量对小鼠的神经系统无明显影响。

响应面法优化提取紫花苜蓿叶总黄酮及其抗氧化活性研究

目的:确定紫花苜蓿叶总黄酮超声辅助提取最佳工艺条件,并对其抗氧化活性进行评价。方法:以紫花苜蓿叶片为试验材料,以总黄酮提取率为指标,在单因素试验的基础上,应用响应面法优化其超声提取条件,并通过不同的抗氧化评价指标测定研究其抗氧化活性。结果:在试验范围内各因素对紫花苜蓿叶总黄酮提取率的影响程度从大到小依次为:超声时间>乙醇体积分数>提取温度;紫花苜蓿叶总黄酮的最佳提取工艺参数为乙醇体积分数65%、超声波功率100 MHz、提取温度67℃、提取时间40 min,在此工艺条件下,苜蓿叶中总黄酮的得率为5.29 mg/g;紫花苜蓿叶总黄酮具有一定的抗氧化能力,并与总黄酮质量浓度呈一定的正相关关系。结论:利用响应面法分析结果可靠,得到紫花苜蓿叶总黄酮超声辅助提取的最佳工艺条件。紫花苜蓿叶总黄酮具有一定的抗氧化活性。

紫花苜蓿总黄酮的微波辅助提取及其体外抗肿瘤活性研究

目的探究微波辅助提取法提取紫花苜蓿总黄酮的最佳工艺条件,并对其进行体外抗肿瘤活性研究。方法采用微波辅助提取法提取紫花苜蓿总黄酮;采用MTT法、细胞活力测定法及双荧光染色法考察紫花苜蓿总黄酮的体外抗肿瘤活性。结果微波辅助提取法提取紫花苜蓿总黄酮的最佳工艺为:pH为10.00、固液比1∶50、功率140W、提取时间30s;MTT法和CASY细胞分析仪测定结果显示紫花苜蓿总黄酮能抑制人肝癌细胞SMMC7721的活性,并呈现出剂量-效应关系;吖啶橙荧光染色法结果表明紫花苜蓿总黄酮作用于人肝癌细胞SMMC7721后,其凋亡数量较阴性对照组明显增加,试验组与对照组及试验组间比较差异均极显著(P<0.01)。结论微波辅助提取法提取紫花苜蓿总黄酮的提取效率较高;紫花苜蓿总黄酮对人肝癌细胞SMMC7721有抑制作用,并可诱导细胞凋亡,呈现出较为显著的体外抗肿瘤活性。

毕岱总皂苷对实验性高血脂症大鼠血脂代谢的影响

目的:建立高血脂症大鼠模型,观察毕岱总皂苷(BD-TAS)对高血脂症大鼠血脂代谢的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组(NC),高脂模型组(HC),血脂康对照组,毕岱总皂苷组(BD-TAS,低、中、高剂量组);除NC组,其余各组高脂饲料喂养8周,建立高脂血症大鼠模型;从模型复制成功后第0周开始,NC组和HC组均ig等量生理盐水,BD-TAS低、中、高剂量组(4,9,12 g.kg-1)和血脂康对照组(0.5 g.kg-1)均ig给药,并在第0,2,4,6周后称量体重,眼眶取血,离心取血清,用酶法测定血浆中胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平以及血清和肝脏丙二醛(MDA)水平,评价BD-TAS对高血脂症大鼠血脂代谢和肝脏保护作用。结果:以高脂饲料喂养大鼠8周后,与NC组相比,HC组TC,TG,HDL-C和LDL-C均升高且有显著性差异(P<0.01),成功复制了混合型高脂血症大鼠模型。以不同剂量BD-TAS溶液ig后,各组血浆TC,TG水平与高脂模型组比较,在第2,4,6周具有显著性差异(P<0.05或P<0.01);与NC组和HC比较,BD-TAS低、中剂量组TC,TG水平降低明显(P<0.05);BD-TAS高剂量组与低剂量组比较,TC,TG水平具有显著性差异(P<0.01)。与NC组比较,BD-TAS给药组血清MDA差异显著(P<0.05)。结论:BD-TAS摄入量越大,其改善血脂水平的效果越好,显示出明显的剂量依赖关系,提示毕岱总皂苷具有降血脂的作用,而且具有一定的肝保护作用。

超声辅助酶解法提取紫花苜蓿总皂苷工艺研究

以"青大1号"紫花苜蓿(Medicago sativa L.)新品系青干草为试材,采用超声辅助酶解法提取总皂苷,对所得总皂苷提取液用石油醚、正丁醇进行2项萃取,紫外分光光度法测定总皂苷的含量。以单因素试验设计分别考察固液比(A)、超声时间(B)、超声温度(C)、超声功率(D)4个因素对总皂苷的粗总皂苷提取率的影响。以单因素试验结果为依据,采用4因素(固液比、超声时间、超声温度、超声功率)3水平正交实验设计进行提取工艺优化,以开发新的紫花苜蓿总皂苷资源。结果表明:超声法提取总皂苷最优工艺条件为A3B1C1D2,即固液比为1∶30g/mL、超声时间20min,超声温度20℃、超声功率360W。